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先前已从皮肤活检中收获了原代真皮犬成纤维细胞。使用人类端粒酶逆转录酶 (hTERT) 对真皮犬成纤维细胞进行永生化，以从每个供体 (PDK4 野生型或 wt/wt、PDK4 杂合子或 wt/del、PDK4 纯合子或 del/del) 中创建永生化细胞系。这些细胞将在含有 10% 胎牛血清和 1% 抗生素抗真菌剂的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基的 6 孔板中接种和培养。将使用 QuickExtractTM DNA 提取溶液提取 DNA。将使用 Thermo Scientific NanoDropTM 1000 分光光度计对 DNA 进行分光光度定量。提取 DNA 后，将对 PDK4wt/wt 和 PDK4del/del 细胞中的 PDK4 基因进行 PCR 扩增。扩增后，将使用 DNA Clean & Concentrator™-25 试剂盒纯化 PCR 产物以进行裸 DNA 切割反应。兽医学学生将测试一种名为 KKH 的新酶，它是 Cas9 变体，可在不同的 PAM 或识别位点切割 DNA。我们使用计算方法确定 KKH 将在 PDK4 基因中所需的切割位点切割，从而有效地为插入双链寡脱氧核苷酸 (dsODN) 探针腾出空间。该 DNA 片段将通过同源重组将缺失的 16 个碱基对添加到基因中。已经设计了两个 dsODN，它们包含“丢失的外显子”序列以及与 DCM1 相关的缺失的 16 个碱基对，并将通过核转染反应测试它们是否掺入细胞 DNA 中。dsODN1 由 DCM1 突变两侧的 300 个碱基组成，dsODN2 由突变两侧的 350 个碱基组成。正向和反向引物组将由 Integrated DNA Technologies（IDT，美国爱荷华州科勒尔维尔）合成。将对每个引物组进行 PCR 梯度，退火范围为 dsODN1 的 55°C 至 67°C 和 dsODN2 的 54°C 至 64°C。目标是将缺失的 PDK4 片段插入切割的 DNA 中，并将在体内缺失 16 个碱基对的成纤维细胞中使用核转染试验进行测试。此后，将从细胞中提取 DNA 并评估整合效果。
医院内空气传播的实验研究
实验研究可以提供有关建筑通风和环境因素对医院空气传播影响的理解、知识和真实案例经验证据。从现有研究中获得的信息有助于制定工程解决方案和管理实践，以对抗医院空气传播感染。进行了系统回顾，总结了实验方法、研究兴趣、有用结果和局限性。实验研究的兴趣呈稳步但缓慢增长的趋势，主要集中在通风系统、策略和配置对空气传播的影响上。研究了在环境因素、排放情景和人类运动的综合影响下生物气溶胶的扩散。还研究了局部通风、空气净化器和消毒技术。总结并强调了实验技术和一些关于最佳通风策略和管理实践的有用见解。实证研究的局限性包括采样困难、规模有限和测试场景数量、不受控制/未考虑的影响因素以及实验媒介。利用基于物联网的采样设备进行实验，实时监测生物气溶胶或其替代品，在医院进行逐案现场调查，开展跨学科研究与合作，可以帮助克服研究挑战，并提供切实有效的解决方案，以最大限度地减少医院内的空气传播。
护理技术如何支持院内糖尿病护理？
护理点（POC）技术是自我管理的基石，并且在过去几十年中已经发展为维持糖尿病患者临床安全的重要组成部分。1人被送往医院的糖尿病是一个独特的患者群体，无论入院原因如何，他们都需要在其入院期间进行额外的监控。患有糖尿病的住院患者有患有七个糖尿病并发症的风险，包括严重的低血糖，糖尿病性酮症酸中毒（DKA）和高摩尔超糖态。2这些危害可能与入院的主要原因有关，例如，患有脓毒症状态的患者可能面临DKA的内在风险，但更合理地，由于药物失误，药物治疗，不足的监测以及在某些情况下，在某些情况下进行治疗，因此患者的治疗因素不适用于治疗，因此可能会因药物错误而导致某些并发症。护理点测量有助于促进对糖尿病管理的决策，但除此之外，还拥有
ACS 患者院内开始使用 PCSK9 抑制剂
引言 PCSK9 抑制剂已成为实现低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C) 二级预防目标的重要治疗策略。这对于复发不良事件风险较高的急性冠状动脉综合征患者尤其重要。尽管有人提倡院内开始使用 PCSK9 抑制剂来快速有效地降低 LDL-C 并改善患者的依从性和预后，但可用的数据有限，并且过度治疗的风险可能是某些患者担心的问题；此外，还应评估大规模早期 PCSK9 抑制的成本效益。基于这些考虑，院内开始使用 PCSK9 抑制剂是否应该成为急性冠状动脉综合征患者的标准治疗方法还有待确定。
预防医院内静脉血栓栓塞症
然而，并非所有的改变都会带来改善。最近，一些系统评价试图衡量质量改进策略的有效性和效果，但医院护理研究尚未阐明一种可转移的策略，以便持续提供最佳护理。1、2、3 对美国主要期刊上发表的质量改进研究的回顾发现，其中四分之三使用了简单的前后设计，通常是在单个中心的单个地点进行，这使得很难将观察到的益处归因于所研究的干预措施。4 科学现状不仅因为研究设计缺乏严谨性而受到影响。特定干预措施的选择从根本上缺乏能够预测成功的令人信服的理论。5 虽然最近从其中一项系统评价中得出了质量改进策略的分类法，但文献仍然没有反映出采用标准化语言来阐明绩效改进的基础机制。6
预防医院内静脉血栓栓塞症
对于有风险的住院患者，血栓预防措施可使 VTE 减少 30% 至 65%，大出血并发症发生率低，并且具有公认的成本效益。16,17 权威机构已出台多项指南，概述了如何正确使用血栓预防措施，16,18-24 但多项研究表明，高风险患者的血栓预防率低得令人无法接受。25-30 例如，最近一项横断面国际研究对 358 家医院的近 70,000 名患者进行了研究，发现只有 58.5% 的外科住院患者和 39.5% 的内科住院患者接受了适当的预防措施 27；另一项美国登记处发现，只有 42% 的医院相关 DVT 患者在诊断前 30 天内接受了预防治疗。30 这些事实表明，改进的必要性十分强烈。
在医学院内的卓越庆祝学校庆祝卓越
我为每个选择在加的夫与我们一起学习的学生感到自豪，无论是医学或药理学的本科生还是研究生。我不知所措，无论他们在教室，病房，运动场或社区中都能实现的目标。一年中最大的乐趣之一是阅读我们在选修期最后一年后收到的推荐书，这表明了我们的学生所产生的全球影响。我毫不怀疑他们都有非常光明的未来，最终患者护理掌握了良好的手段。
院内心脏骤停后发生全身性脑梗塞...
她被转至我院，并被送入重症监护室进行监测。神经系统检查显示脑干反射（瞳孔、角膜、眼前庭、呕吐和咳嗽反射）消失，反应迟钝评分（FOUR）为零。头部计算机断层扫描（CT）显示严重脑水肿，灰白分化弥漫性消失，CT 血管造影显示无颅内血流（图 1）。