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将1.5kb目的DNA片段克隆于pLSODN-1的Nt.BspQI和Nb.BsrDI位点之间。同样,将3.0kb目的DNA片段克隆于pLSODN-3的Nt.BspQI和Nb.BsrDI位点之间。用Nt.BspQI和Nb.BsrD消化质粒。将双切口质粒与变性凝胶上样缓冲液混合并加热,然后上样至常规非变性琼脂糖凝胶电泳。切除并提取对应于长ssDNA的条带。
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