图 3. CRISPR-Cas 应用。 A)基因编辑。利用Cas9可以促进基因组中单个位点或两个位点的切割。在第一种情况(A1)中,切口的修复可以通过 NHEJ 进行,这可以通过随机插入或删除导致基因沉默,或者如果将修复模板引入细胞,则可以通过 HDR 进行修复,这将允许将新序列引入基因组以修改基因、引入点突变等。在第二种情况下(用两个 sgRNA 进行转化),可以发生两次 DNA 切割(A2),因此可以消除 DNA 序列,甚至可以进行易位。 B、C) dCas9 不具有核酸酶活性,也可以与阻遏物或激活物融合使用,以使用 CRISPRi (B) 减少或沉默基因,或使用 CRISPRa (C) 增加基因表达。 (图片由 BioRender.com 生成)