OTUDin3后,GRP78泛素化增加,逆转了OTUD3的去泛素化(图4C)。结果表明OTUDin3通过抑制OTUD3的去泛素化活性来增加GRP78的泛素化。随后,在H1299细胞中进行内源性GRP78泛素化实验以进一步证实上述机制。结果表明OTUDin3以浓度依赖性方式增加GRP78泛素化(图4D)。为了验证OTUDin3增加GRP78泛素化是由于靶向OTUD3,我们在OTUD3 KO细胞中进行内源性GRP78泛素化实验。结果表明OTUDin3对OTUD3 KO细胞中GRP78泛素化影响不大(图4E)。总的来说,OTUDin3 通过抑制去泛素化活性来增加 GRP78 泛素化