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亚培养从相邻的细胞中去除旧培养基,并将其洗净,而PBS不含钙和镁。对于T25烧瓶,使用3-5 mL PBS,对于T75烧瓶5-10 ml。然后,使用1-2 mL对T25和2.5 ml平底物完全覆盖Accutase细胞,用于T75烧瓶。让细胞在室温下持续8-10分钟,将它们分开。孵育后,将细胞与10 mL培养基轻轻混合以再次悬挂,然后以300xg的速度将其提起3分钟。拒绝上清液,再次将细胞挂在新鲜的培养基中,然后将其转移到已经包含新鲜培养基的新瓶中。
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