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1，弗吉尼亚州林奇堡的自由大学骨病学院，弗吉尼亚州林奇堡2个生物学与化学系，自由大学，林奇堡，弗吉尼亚州林奇堡3 3医学系，杜克大学医学院，杜克大学医学院，北卡罗来纳州北卡罗来纳州北卡罗来纳州新近加密氏菌，是一个机会性的真实性病原体，负责为每年艾滋病死亡的15％。杜克大学的先前工作确定了许多基因在新生虫中显示出碱性pH的生长改变，其中包括Gene cnag_05866，这是酿酒酵母中PRM1的同源物，涉及质膜膜融合。我们的目标是验证该基因是否参与了pH适应并影响新梭菌的毒力。首先，使用CRISPR-CAS9在野生型（WT）C。Neoformans菌株CM2049中删除了PRM1。为了将突变体重构为WT表型，将PRM1基因克隆到质粒PSDMA25中，并转化为PRM1Δ菌株。然后对PRM1Δ和重构菌株进行各种表型/应激源测试。YPD pH 8上的点测定显示WT菌株和PRM1Δ菌株之间的生长差异，这支持了以下假设：Neoformans C. Neoformans中的PRM1同源物会影响其适应碱性pH的能力。此外，在PRM1δ和RIM101δ中看到了生长的相似性，表明PRM1可能会响应pH适应的途径。使用Galleria模型的毒力研究表明，WT和PRM1Δ菌株之间的毒力没有统计学上的显着差异。PRM1Δ突变体的含义将通过新生梭菌疾病的鼠吸入模型进一步评估。总体而言，我们的数据支持以下假设：CNAG_05866是PRM1的直系同源物，并且参与了Neoforman C的pH适应，但是PRM1对Neoformans毒力的影响仍然不清楚。
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