最近开发的CRISPR激活剂(CRISPRA)系统使用基于CRISPR-CAS效应子的转录激活剂有效地控制靶基因的表达而不会引起DNA损伤。但是,基于CAS9/CAS12A的现有CRISPRA系统必须在效力和准确性方面提高,这是由于与CRISPR-CAS模块本身相关的限制。为了克服这些局限性,并有效,准确地调节基因表达,我们基于小的CRISPR-CAS效应子candidatus woesearchaeota cas12f(CWCAS12F)开发了一个有效的CRISPRA系统。通过设计CRISPR-CAS模块,链接激活域,并使用接头和核定位信号序列的各种组合,优化的ECWCAS12F-VPR系统启用了与使用现有CRISPRA系统相比,基因表达的有效和目标特定于基因表达的调节。这项研究中开发的ECWCAS12F-VPR系统具有控制生物体内源基因转录的巨大潜力,并为未来的基因疗法和生物学研究提供了基础。
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