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1医学实验室科学系,应用医学科学学院,国王阿卜杜勒齐兹大学,吉达,沙特阿拉伯2分子诊断实验室,国王阿卜杜勒齐兹大学医院,国王阿卜杜勒齐兹大学,沙特阿拉伯国王阿卜杜勒阿拉伯,阿拉伯人,mol。res。22(4):GMR19097于2023年8月30日收到2023年10月26日,于2023年12月26日发表,doi http://dx.doi.org/10.4238/gmr19097摘要。下一代测序(NGS)平台现在作为治疗前结肠癌患者的K-RAS突变的常规分析实施。NGS平台中使用的DNA是从结肠癌福尔马林固定的石蜡包裹(FFPE)块中提取的。在这项研究中,我们利用了20个FFPE结肠癌块。通常,优质的DNA样品包括紧凑的高分子量DNA。通过琼脂糖凝胶电泳检查提取的DNA的质量。由于自动分解和自发脱尿,或细菌污染和提取的DNA的自然机制,发现某些样品被高度退化,然后通过超声处理将其定期碎片。在这项研究中,进行了PCR来重建较大的DNA片段,而不是扩增DNA片段。无原始PCR依赖于PCR循环的两个段的自然力量来重建碎片的PCR,作者:变性DNA可以随机退火为其互补序列(退火)和TAQ聚合酶在3'端(扩展)扩展DNA。通过重复150个循环,产生较大的DNA片段而不是扩增DNA。碎片的DNA通过无底漆PCR重建150个周期。然而,每50个周期将TAQ聚合酶的1U添加到PCR反应中。为这项研究选择的样品被高度降解。样品的降解程度为

通过Primerless PCR拯救高度退化的DNA

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