利用光和温度转化细胞:我的夏季研究之旅

Saket Ram,SEAS '27,新泽西州泽西市 今年夏天,我有幸在宾夕法尼亚大学工程学院的 Bugaj 实验室担任本科研究员。这是我第一次做研究,我有点紧张——但是……

来源:宾夕法尼亚大学职业服务博客

Saket Ram,SEAS ’27,新泽西州泽西市

Saket Ram,SEAS ’27,新泽西州泽西市

今年夏天,我有幸在宾夕法尼亚大学工程学院的 Bugaj 实验室担任本科研究员。这是我第一次做研究,我有点紧张——但是,实验室的研究生导师 Dennis 和我的 PI Bugaj 博士都非常耐心,亲自向我展示了未来的研究生涯是什么样的。

该实验室对合成生物学和细胞信号传导的关注范围非常广泛,我们了解细胞工作原理的两种方式是通过光遗传学(对光敏感的蛋白质,如 Cry2)或热遗传学(对温度敏感的蛋白质)工具。我关注的项目主要与此有关:在光遗传学方面,我们感兴趣的是创建使用光诱导聚集来调节细胞质-核运输的工具。在产热方面,我们通过将温度敏感片段插入预定位置来探索热敏蛋白的产生,包括热敏荧光蛋白报告基因(一种根据亮度指示体内温度的蛋白质)。

为了合成这些构建体,我们需要制作质粒,它们是小的环状 DNA 片段,包含编码我们想要创建的任何蛋白质的碱基对序列。通常,我们还将编码我们想要的蛋白质的 DNA 与荧光蛋白融合,以便我们可以通过共聚焦显微镜对其进行可视化。为此,我们需要利用克隆的力量。

在 t = 0s 时与 Cry2-mCherry(一种红色荧光蛋白)共转染的 HEK(左)。在蓝光刺激的几秒钟内,簇开始形成(中间,在 t = 20s 时)。显示光刺激直到 t = 180s(右)。

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