RBC 的载体 RNA 是合成的 poly-A 核糖核苷酸。正如许多不同的 RT-PCR 系统所证明的那样,用作载体 RNA 的少量 poly-A RNA 不会干扰后续的 RT-PCR,即使使用 oligo-dT 作为逆转录的引物也是如此。
聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)家族在细胞过程中具有许多基本功能,包括调节转录,凋亡和DNA损伤反应。PARP1具有聚(ADP-核糖)活性,当通过DNA损伤激活时,增加了分支的PAR链以促进其他修复蛋白的募集,以促进DNA单链断裂的修复。PARP抑制剂(PARPI)是第一个批准的癌症药物,该药物专门针对BRCA1/2突变的乳腺癌和卵巢癌中的DNA损伤反应。从那时起,我们了解肿瘤对PARP抑制剂的敏化的机制以及扩大PARPI治疗其他几种癌症类型的方法的显着进步。在这里,我们回顾了PARPI的作用机理,肿瘤对PARPI的生物标志物的最新进展,PARPI疗法的临床进展,包括联合疗法的潜力和肿瘤耐药机制。
通过开发微生物或纳米生物催化剂,从农业养成物中合成稀有糖(D-催化糖,D-talose,L-核糖和L-核糖)的5年研究经验。在筛选,鉴定和保存细菌培养物,分子克隆,蛋白质表达,蛋白质纯化,纳米材料的功能化以及酶在纳米育量和基于金属的构建体上的固定化方面的专业知识。有关HPLC,UPLC,HPAEC,SEM,FTIR,TGA,BET,亲和色谱,凝胶elletrophoresis,Kjeldhal蛋白分析仪和紫外分光光表的技术知识。kowledege,例如GraphPad Prism,Minitab统计和其他蛋白质建模工具,例如Gromacs数据分析。寻求在组织中的入门级职位,以学习新技能,并利用我以前的研究经验来为组织的增长和尊重做出贡献。
生物技术育种方法应用于木本植物的主要瓶颈是由于几种基因型表现出的体外再生困难。另一方面,木本植物,尤其是葡萄树(Vitis vinifera L.),使用大部分农药和其他昂贵的农业投入,因此开发有效的遗传改良方法迫在眉睫。基因组编辑是一种非常有前途的技术,特别是对于酿酒葡萄基因型,因为它允许在一个步骤中修改所需的基因,保留在优良品种中选定和重视的所有品质性状。本文报道了一种用于生产无转基因葡萄植物的基因组编辑和再生方案,利用脂质转染胺介导的 CRISPR - Cas9 核糖核蛋白(RNP)直接递送以靶向八氢番茄红素去饱和酶基因。我们重点研究了内比奥罗 (V. vinifera),这是一种极难在体外生长的葡萄酒基因型,可用来生产优质葡萄酒,例如巴罗洛和巴巴莱斯科。文献中提供的用于高度胚胎发生的葡萄树基因型的 PEG 介导的编辑方法无法使难生长的内比奥罗获得正常的胚胎发育。相反,脂质转染剂对原生质体活力和植物再生没有负面影响,转染后约 5 个月即可获得完全发育的编辑植物。我们的工作是使用脂质转染剂在植物原生质体中递送编辑试剂的首批例子之一。在酿酒葡萄基因型育种方面取得的重要成果可以扩展到其他重要的酿酒葡萄品种和难生长的木本植物。
CRISPR-CAS12A:群集定期间隔短的短质体重复蛋白酶12A; IHC:免疫组织化学;墨水:源自诱导多能干细胞的天然杀伤细胞; Pflow:磷酸化流式细胞仪; RNP:核糖蛋白
图2核糖开关机制,功能和保护。(a)核糖开关是高度结构化的RNA基序,这些RNA基序嵌入了许多细菌mRNA的5'非翻译区域中,在那里它们可以在共同转文时增强或抑制基因表达,以结合小分子或元素离子离子配体。这样的机制涉及RNA聚合酶(RNAP)对转录产量的调节,而其他机制则更直接地改变了mRNA转化为蛋白质的可能性。(b)上游适体区域结合配体,渲染形成结合口袋(黄色框)的核心段以及侧翼建筑片段(蓝色框),高度保守。[112,113]相比,下游表达平台显示出较少的保护,最可能是因为它在功能上与许多对特定细菌具有特殊性的蛋白质效应子相互作用。使用biorender.com创建。
由于血脑屏障和复杂的突变谱,原发性中枢神经系统肿瘤的治疗具有挑战性,并且与低存活率有关。然而,最近的研究已经发现了神经胶质瘤的常见突变[异柠檬酸脱氢酶 (IDH) - 野生型和突变型,WHO II-IV 级;IV 级肿瘤称为胶质母细胞瘤 (GBM)]。这些突变驱动表观遗传变化,导致烟酸磷酸核糖转移酶 (NAPRT) 基因位点的启动子甲基化,该基因位点编码一种参与生成 NAD + 的酶。重要的是,NAPRT 沉默使另一种 NAD + 生物合成酶烟酰胺磷酸核糖转移酶 (NAMPT) 的抑制剂具有治疗脆弱性,从而使这些恶性肿瘤的治疗变得合理。多种系统给药的 NAMPT 抑制剂 (NAMPTi) 已在临床试验中得到开发和测试,但剂量限制性毒性——包括骨髓抑制和
PARP家族的ADP-核糖基转移酶包括一组细胞中具有各种调节功能的酶,范围从DNA损伤修复到控制细胞周期进展和免疫反应。多年来,这些知识导致使用PARP1/2抑制剂作为治疗卵巢,泛氧化,前列腺和乳腺癌治疗的主要药物策略,并在编码涉及DNA修复机制的蛋白质的基因中持有突变(合成六)。同时,过去十年在理解受单ADP-核糖基调节的细胞途径方面取得了重大进展,在开发新型选择性化合物以抑制那些赋予具有单ADP-核糖基化活性的parps的细胞中。本综述着重于癌症领域的进展,深入研究了有关酶的一部分(干扰素刺激的PARP)在癌症进展中的作用的最新发现。