CRISPR/Cas9 基因组编辑是一种现代生物技术方法,用于改良植物品种,仅改变特定品种的一个或几个性状。然而,由于缺乏对关键基因的了解、幼苗期较长以及特定品种的整株植物难以再生,这种技术不能轻易用于改良柑橘果实的品质性状。在这里,我们介绍了一种基因组编辑方法,目的是生产果实中同时含有番茄红素和花青素的柑橘幼苗。我们的方法采用双单向导 RNA (sgRNA) 定向基因组编辑方法来敲除果实特异性的 β-环化酶 2 基因,该基因负责将番茄红素转化为 β-胡萝卜素。两个 sgRNA 同时靶向该基因以产生大量缺失,并在两个 sgRNA 靶标中诱导点突变。农杆菌 EHA105 菌株用于转化五种不同的花青素甜橙(属于 Tarocco 和 Sanguigno 品种组)和“Carrizo”枳橙(一种柑橘砧木)作为柑橘转化的模型。在目标区域测序的 58 个小植株中,86% 成功编辑。最常见的突变是缺失(从 -1 到 -74 个核苷酸)和插入(+1 个核苷酸)。此外,在六个小植株中发现了一个新事件,包括两个 sgRNA 之间区域的倒置。对于发生单个突变的 20 个小植株,我们排除了嵌合事件。小植株在营养组织中没有表现出改变的表型。据我们所知,这项工作是使用基因组编辑方法潜在改善柑橘水果品质性状的第一个例子。
b'genation 的 C3 和 C2 位尚未开发。在此,我们报道了一种无催化剂获取 1-芳基 2,3-二碘咔唑 [7,8] 的方法,其中涉及碘转位(方案 1D)。值得注意的是,我们的方案允许在三个连续位置 [9] 即 C1、C2 和 C3 对咔唑核心进行可控官能化。环化前体 (碘吲哚基)炔醇 1a \xe2\x80\x93 n 是使用已知程序由适当的吲哚-2-甲醛制备的。[5] 我们的旅程始于研究苯基取代炔醇 1a 作为模型底物的反应(表 1)。 [10] 我们研究了 1a 与几种碘化试剂(如 I 2 、NIS、ICl 和 Ipy 2 BF 4 )的反应。在碳酸钠存在下,在异丙醇中,在 15 °C 下使用 ICl [11] 可有效实现串联碘环化-碘移位。使用 1.1 倍过量的 ICl 可得到三环 2a ,产率为 50%(表 1,条目 5),而使用 2.5 倍过量的 ICl 可得到所需的杂环,产率为 60%(表 1,条目 3)。通过对粗反应混合物进行 TLC 和 1 H NMR 分析观察到总转化率,未检测到副产物或聚合反应。然而,在柱层析纯化 2,3-二碘-咔唑 2a 的过程中观察到一些分解,这可能是导致分离产率适中的原因。值得注意的是,重排的 1-苯基-2,3-二碘-咔唑 2a 是唯一的区域异构体。使用有机碱代替 K 2 CO 3 或不同的溶剂'
1 土耳其科尼亚塞尔丘克大学药学院药物化学系 * 通讯作者电子邮件:kucukogluk35@hotmail.com 要点 人类谷氨酰胺环化酶 (hQC) 有两种同工型,即分泌型 QC (也称为 sQC) 和高尔基定位型 QC (也称为 isoQC 或 gQC)。 hQC 通过释放氨或水介导 N 端谷氨酰胺或谷氨酸残基的环化。 在某些疾病中,QC 的分泌水平会增加,例如阿尔茨海默氏症 (AD)、亨廷顿氏病 (HD)、黑色素瘤、甲状腺癌、动脉粥样硬化的快速形成、化脓性关节炎。 近年来,发现抑制 QC 的新药被认为是预防和治疗许多生理问题和疾病的重要方法。 已发现具有咪唑骨架的化合物具有抑制 QC 的潜力。这些药物中最引人注目的一种是瓦罗谷氨酸司他,目前正处于阶段研究中。 ARTICLEINFO 收稿日期:2022 年 5 月 21 日 接受日期:2022 年 6 月 25 日 发表日期:2022 年 7 月 15 日 关键词:阿尔茨海默氏症淀粉样蛋白β谷氨酰胺环化酶焦谷氨酸修饰瓦罗谷氨酸司他
引言与连接上游 5′ 剪接位点 (ss) 和下游 3′ ss 的经典剪接不同,反向剪接将下游 5′ 反向剪接位点 (bss) 与上游 3′ bss 连接,产生共价闭合的环状 RNA (circRNA) [1-7]。尽管反向剪接的加工方式不利,但它由与经典剪接相同的剪接体机制催化 [8-10],表明它们之间存在直接竞争 [11]。此外,反向剪接也受顺式元件和反式因子的严格调控 [10,12-16],导致 circRNA 在所检测的广泛细胞系、组织和物种中呈现时空表达 [17-25]。越来越多的证据表明,circRNA 表达失调与人类疾病有关,如癌症 [ 26 – 29 ]、系统性红斑狼疮 [ 30 ] 和神经元变性 [ 31 , 32 ],表明它们在生理和病理条件下都发挥着潜在作用 [ 1 , 2 , 5 ]。从机制上讲,大多数 circRNA 位于细胞质中,有些被发现充当 miRNA 或蛋白质的诱饵 [ 12 , 15 , 19 , 22 , 30 , 32 , 33 ]。尽管如此,大多数 circRNA 的生物学意义仍未被充分探索,部分原因是其功能研究方法有限,例如 DNA 水平上的 circRNA 敲除 (KO)。例如,CRISPR/Cas9 基因组编辑去除了
摘要:赭曲霉毒素 A (OTA) 是一种众所周知的霉菌毒素,广泛分布于食品和饲料中。真菌基因组测序对于识别已知和新化合物的次级代谢物基因簇非常有用。对 A. steynii、A. westerdijkiae、A. niger、A. carbonarius 和 P. nordicum 中 OTA 生物合成簇的比较分析表明,在五个结构基因 (otaA、otaB、ota、otaR1 和 otaD) 中,OTA 簇的组织具有高度的同源性。此外,最近对黑曲霉 OTA 产生菌进行的详细比较基因组分析发现了一个环化酶基因 otaY,它位于 otaA 和 otaB 基因之间的 OTA 簇中,编码的预测蛋白质与 SnoaL 的结构域高度相似。这些蛋白质已被证明能催化链霉菌中产生的聚酮抗生素生物合成中的闭环步骤。在本研究中,我们证明了在 OTA 允许条件下 A. carbonarius 中环化酶基因的上调,这与其他 OTA 簇基因的表达趋势及其在 OTA 生物合成中的作用一致,即通过完全基因缺失。我们的研究结果首次指出了环化酶基因参与了 OTA 生物合成途径。它们代表着对 A. carbonarius 中 OTA 生物合成分子基础的理解向前迈出了一步。
下面我们将证明 TCDC 方法成功应用于 2-炔基烯酮 1 与硝酮 2 的对映选择性串联反应,其中硝酮表现为亲核 1,3-偶极子,得到形式上的 [3+3] 环加成产物 3(方案 1b)。[14] 此外,我们证明这些串联环化/[3+3] 环加成可以作为多组分反应进行,通过羟胺 4 和醛 5 原位形成硝酮。该方法适用于广泛的芳基和烷基取代底物,克服了此类对映选择性反应的一些当前局限性。[14] 该方法依赖于一种新的 CPA-Phos 型配体,在有和没有活化银盐的情况下均可操作。DFT 计算提供了有关新 Au(I) 复合物在此反应中的行为的见解。
摘要:糖尿病肾病 (DN) 是糖尿病最严重的长期影响之一,影响超过 30% 的患者。在患病肾脏中,肾小球内系膜细胞在促进细胞外基质成分的促纤维化周转和促进肾小球增生方面起着关键作用。这些病理影响部分是由可溶性鸟苷酸环化酶 (sGC) 功能受损以及抗纤维化信使 3′,5′-环鸟苷酸单磷酸 (cGMP) 合成减少引起的。Bay 58-2667 (cinaciguat) 能够重新激活有缺陷的 sGC;然而,该药物的生物利用度较差,全身给药与严重低血压等不良事件有关,这可能会妨碍治疗效果。因此,在本研究中,西那西呱被有效地封装到病毒模拟纳米颗粒 (NP) 中,这种纳米颗粒能够特异性地靶向肾系膜细胞,从而增加细胞内药物的积累。因此,NP 辅助药物输送使西那西呱诱导的 sGC 稳定和活化以及相关的下游信号在体外的效力提高了 4 到 5 倍。此外,载药 NP 的给药显著抑制了非典型转化生长因子 β (TGF- β ) 信号通路,并抑制了由此产生的 50-100% 的促纤维化重塑,使该系统成为一种有前途的工具,可用于更精细地治疗 DN 和其他相关的肾脏病变。
承认这项工作是四年的毅力和对一个项目的奉献精神的结果,这使我为我带来了如此多的科学知识,这是典型的研究,作为横向知识和基本技能,例如毅力,理解,同情,团队合作,尤其是很多耐心。 尽管多年来一直在遭受苦难和关注,但这种经历将以我们在实验室内拥有的幸福,欢乐和伟大家庭的伟大时刻为标志,而没有他们的合作是不可能的。 向我要感谢他们的奉献精神和努力,这使我有机会能够发表这篇博士学位论文,因此,没有它是可能的: Dolors Pujol。 由于其出色的研究能力和高品质,我能够获得丰富的科学和个人经验。 我想表达我的同理心,毅力,耐心,他们的努力,倾听,教导,尤其是永不放弃的能力。 我还要感谢您提供的所有技巧和帮助,随时准备倾听并为我看最好的事情。 感谢您给我的所有机会,并帮助我专业和个人成长。 第二,我要感谢博士。弗朗西斯·S·威拉德(Francis S. Willard),博士 对博士弗朗西斯·威拉德(Francis Willard),感谢他的信任和积极的态度,总是应对新的挑战。 对博士 劳拉·格劳(Laura Grau),德拉(Dra)。 对博士尽管多年来一直在遭受苦难和关注,但这种经历将以我们在实验室内拥有的幸福,欢乐和伟大家庭的伟大时刻为标志,而没有他们的合作是不可能的。 向我要感谢他们的奉献精神和努力,这使我有机会能够发表这篇博士学位论文,因此,没有它是可能的: Dolors Pujol。 由于其出色的研究能力和高品质,我能够获得丰富的科学和个人经验。 我想表达我的同理心,毅力,耐心,他们的努力,倾听,教导,尤其是永不放弃的能力。 我还要感谢您提供的所有技巧和帮助,随时准备倾听并为我看最好的事情。 感谢您给我的所有机会,并帮助我专业和个人成长。 第二,我要感谢博士。弗朗西斯·S·威拉德(Francis S. 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Willard),博士 对博士弗朗西斯·威拉德(Francis Willard),感谢他的信任和积极的态度,总是应对新的挑战。 对博士 劳拉·格劳(Laura Grau),德拉(Dra)。 对博士我想表达我的同理心,毅力,耐心,他们的努力,倾听,教导,尤其是永不放弃的能力。 我还要感谢您提供的所有技巧和帮助,随时准备倾听并为我看最好的事情。 感谢您给我的所有机会,并帮助我专业和个人成长。 第二,我要感谢博士。弗朗西斯·S·威拉德(Francis S. Willard),博士 对博士弗朗西斯·威拉德(Francis Willard),感谢他的信任和积极的态度,总是应对新的挑战。 对博士 劳拉·格劳(Laura Grau),德拉(Dra)。 对博士我还要感谢您提供的所有技巧和帮助,随时准备倾听并为我看最好的事情。 感谢您给我的所有机会,并帮助我专业和个人成长。 第二,我要感谢博士。弗朗西斯·S·威拉德(Francis S. Willard),博士 对博士弗朗西斯·威拉德(Francis Willard),感谢他的信任和积极的态度,总是应对新的挑战。 对博士 劳拉·格劳(Laura Grau),德拉(Dra)。 对博士感谢您给我的所有机会,并帮助我专业和个人成长。 第二,我要感谢博士。弗朗西斯·S·威拉德(Francis S. Willard),博士 对博士弗朗西斯·威拉德(Francis Willard),感谢他的信任和积极的态度,总是应对新的挑战。 对博士 劳拉·格劳(Laura Grau),德拉(Dra)。 对博士第二,我要感谢博士。弗朗西斯·S·威拉德(Francis S. 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在这些博士学位期间,我很高兴与博士每天在药品化学实验室分享。 Lorena Navarro,博士 Patricia Mateo,博士 Lucia Acedo,Marta Vilaplana,MiquelViñas和Dani Jahani。 劳拉·格劳(Laura Grau)感谢您所教给我的一切。 对博士 洛雷娜·纳瓦罗(Lorena Navarro),要成为实验室内外的基准测试,并始终提供一个愉快,出色的专业人士和伟大的人。 对博士 Patricia Mateo,感谢您的所有经验和建议,因为充满热情,动力和团队合作,一切都更加有意义。 对博士 露西亚·阿奇多(Lucia Acedo)对生活的愿景和对挑战的宁静。 对旅途的开始,玛塔·维拉普拉纳(Marta Vilaplana),为了她的喜悦,为她的动力和关心,在我们生活的所有时刻,帮助我们在必要时,尤其是在这次旅行旁边没有她的障碍时,帮助我们克服障碍。 到MiquelViñas,鼓励他以他的智慧和宁静遵循同样的道路,您一定会到达您所处的位置。 对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。在这些博士学位期间,我很高兴与博士每天在药品化学实验室分享。 Lorena Navarro,博士 Patricia Mateo,博士 Lucia Acedo,Marta Vilaplana,MiquelViñas和Dani Jahani。 劳拉·格劳(Laura Grau)感谢您所教给我的一切。 对博士 洛雷娜·纳瓦罗(Lorena Navarro),要成为实验室内外的基准测试,并始终提供一个愉快,出色的专业人士和伟大的人。 对博士 Patricia Mateo,感谢您的所有经验和建议,因为充满热情,动力和团队合作,一切都更加有意义。 对博士 露西亚·阿奇多(Lucia Acedo)对生活的愿景和对挑战的宁静。 对旅途的开始,玛塔·维拉普拉纳(Marta Vilaplana),为了她的喜悦,为她的动力和关心,在我们生活的所有时刻,帮助我们在必要时,尤其是在这次旅行旁边没有她的障碍时,帮助我们克服障碍。 到MiquelViñas,鼓励他以他的智慧和宁静遵循同样的道路,您一定会到达您所处的位置。 对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。Lorena Navarro,博士 Patricia Mateo,博士 Lucia Acedo,Marta Vilaplana,MiquelViñas和Dani Jahani。 劳拉·格劳(Laura Grau)感谢您所教给我的一切。 对博士 洛雷娜·纳瓦罗(Lorena Navarro),要成为实验室内外的基准测试,并始终提供一个愉快,出色的专业人士和伟大的人。 对博士 Patricia Mateo,感谢您的所有经验和建议,因为充满热情,动力和团队合作,一切都更加有意义。 对博士 露西亚·阿奇多(Lucia Acedo)对生活的愿景和对挑战的宁静。 对旅途的开始,玛塔·维拉普拉纳(Marta Vilaplana),为了她的喜悦,为她的动力和关心,在我们生活的所有时刻,帮助我们在必要时,尤其是在这次旅行旁边没有她的障碍时,帮助我们克服障碍。 到MiquelViñas,鼓励他以他的智慧和宁静遵循同样的道路,您一定会到达您所处的位置。 对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。Lorena Navarro,博士 Patricia Mateo,博士 Lucia Acedo,Marta Vilaplana,MiquelViñas和Dani Jahani。 劳拉·格劳(Laura Grau)感谢您所教给我的一切。 对博士 洛雷娜·纳瓦罗(Lorena Navarro),要成为实验室内外的基准测试,并始终提供一个愉快,出色的专业人士和伟大的人。 对博士 Patricia Mateo,感谢您的所有经验和建议,因为充满热情,动力和团队合作,一切都更加有意义。 对博士 露西亚·阿奇多(Lucia Acedo)对生活的愿景和对挑战的宁静。 对旅途的开始,玛塔·维拉普拉纳(Marta Vilaplana),为了她的喜悦,为她的动力和关心,在我们生活的所有时刻,帮助我们在必要时,尤其是在这次旅行旁边没有她的障碍时,帮助我们克服障碍。 到MiquelViñas,鼓励他以他的智慧和宁静遵循同样的道路,您一定会到达您所处的位置。 对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。Patricia Mateo,博士 Lucia Acedo,Marta Vilaplana,MiquelViñas和Dani Jahani。 劳拉·格劳(Laura Grau)感谢您所教给我的一切。 对博士 洛雷娜·纳瓦罗(Lorena Navarro),要成为实验室内外的基准测试,并始终提供一个愉快,出色的专业人士和伟大的人。 对博士 Patricia Mateo,感谢您的所有经验和建议,因为充满热情,动力和团队合作,一切都更加有意义。 对博士 露西亚·阿奇多(Lucia Acedo)对生活的愿景和对挑战的宁静。 对旅途的开始,玛塔·维拉普拉纳(Marta Vilaplana),为了她的喜悦,为她的动力和关心,在我们生活的所有时刻,帮助我们在必要时,尤其是在这次旅行旁边没有她的障碍时,帮助我们克服障碍。 到MiquelViñas,鼓励他以他的智慧和宁静遵循同样的道路,您一定会到达您所处的位置。 对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。Patricia Mateo,博士 Lucia Acedo,Marta Vilaplana,MiquelViñas和Dani Jahani。 劳拉·格劳(Laura Grau)感谢您所教给我的一切。 对博士 洛雷娜·纳瓦罗(Lorena Navarro),要成为实验室内外的基准测试,并始终提供一个愉快,出色的专业人士和伟大的人。 对博士 Patricia Mateo,感谢您的所有经验和建议,因为充满热情,动力和团队合作,一切都更加有意义。 对博士 露西亚·阿奇多(Lucia Acedo)对生活的愿景和对挑战的宁静。 对旅途的开始,玛塔·维拉普拉纳(Marta Vilaplana),为了她的喜悦,为她的动力和关心,在我们生活的所有时刻,帮助我们在必要时,尤其是在这次旅行旁边没有她的障碍时,帮助我们克服障碍。 到MiquelViñas,鼓励他以他的智慧和宁静遵循同样的道路,您一定会到达您所处的位置。 对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。Lucia Acedo,Marta Vilaplana,MiquelViñas和Dani Jahani。 劳拉·格劳(Laura Grau)感谢您所教给我的一切。 对博士 洛雷娜·纳瓦罗(Lorena Navarro),要成为实验室内外的基准测试,并始终提供一个愉快,出色的专业人士和伟大的人。 对博士 Patricia Mateo,感谢您的所有经验和建议,因为充满热情,动力和团队合作,一切都更加有意义。 对博士 露西亚·阿奇多(Lucia Acedo)对生活的愿景和对挑战的宁静。 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到MiquelViñas,鼓励他以他的智慧和宁静遵循同样的道路,您一定会到达您所处的位置。 对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。对旅途的开始,玛塔·维拉普拉纳(Marta Vilaplana),为了她的喜悦,为她的动力和关心,在我们生活的所有时刻,帮助我们在必要时,尤其是在这次旅行旁边没有她的障碍时,帮助我们克服障碍。 到MiquelViñas,鼓励他以他的智慧和宁静遵循同样的道路,您一定会到达您所处的位置。 对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。到MiquelViñas,鼓励他以他的智慧和宁静遵循同样的道路,您一定会到达您所处的位置。 对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。到MiquelViñas,鼓励他以他的智慧和宁静遵循同样的道路,您一定会到达您所处的位置。 对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。对Dani,也鼓励他继续在实验室努力工作,并为他带来良好的祝愿。以同样的方式,我想强调参与JorgeBaladón,Amelia Morantin,Ariadna Martin,Josep Grima,Marina Cervera,Alexandre Chabrit和Elena Haro的参与,否则他将无法获得这些记忆中的所有结果。
DOI:http://dx.medra.org/10.17374/targets.2020.23.92 Ana G. Neo 生物有机化学和膜生物物理实验室 (LOBO),有机和无机化学系,埃斯特雷马杜拉大学,10003 卡塞雷斯,西班牙(电子邮件:aneo@unex.es) 摘要。光化学环化允许获得多种类型的杂环和成分,成为合成有机化学的有力工具。在这种类型的过程中,光诱导周环闭合反应生成中间体,该中间体以不同的方式演变成稳定的最终产物。光环化发生在非常温和和简单的反应条件下,具有很好的原子经济性,并且对环境非常尊重。目录 1. 简介 2. 氧化条件下的光化学环化 2.1. 用于合成具有生物特性的分子 2.2。新材料设计中的应用 3. 碱存在下的光化学环化 3.1. 用于合成具有生物特性的分子 3.2. 新材料设计中的应用 4. 环化/脱卤及相关 5. 杂项 6. 结论 致谢 参考文献 1. 简介 约瑟夫·普里斯特利 (Joseph Priestley, 1733-1804) 对硝酸中阳光效应的研究和对光合作用原理的发现被认为是光化学的开端。在有机化学领域,光化学时代是由坎尼扎罗 (Cannizzaro) 对光对山托宁的影响的研究开创的,而 Giacomo Ciamician 和 Paul Silber 基本上是对光对有机化合物影响的完整和创新研究。在这些先驱之后,其他研究人员,如 Emanuele Paternò、Otto Schenck、Julius Schmidt 或 Alexander Schönberg,也将注意力集中在研究光对分子反应性的影响上。 1,2 早期的光化学研究主要研究太阳光对分子反应性的作用,因为当时人们还不知道光的性质及其在原子水平上的影响。目前,人们了解到,分子吸收紫外-可见光会将电子从基态转移到激发态,随后这些电子重新分布,从而形成在热条件下无法获得的产品。此外,光反应还具有其他吸引人的特性,如原子效率高、环境友好、功能组和杂原子耐受性范围广、反应非常简单,而且通常成本低廉。3-6 所有这些特性使得光化学反应在有机化学各个领域的各种分子合成中发挥着重要作用。7-13 在众多类型的光化学反应中,光诱导的周环闭合反应,尤其是6π-光环化反应是其中最重要的一种。这种类型的反应允许在单一且绿色的工艺中构建芳香族和杂芳族多环化合物。14 通常,6π-光环化反应分为氧化、消除和重排。本综述按照以下分类进行组织:首先,它们将展示一些氧化条件下的光环化例子以及您在合成具有生物活性的化合物和材料中的应用。第二部分是关于碱性介质中的光环化和