摘要。量子计算机的威胁是真实的,将需要经典系统和应用程序的显着资源和时间,以准备针对威胁的补救措施。在算法级别,这是两个最受欢迎的公钥加密系统RSA和ECC,使用Shor's算法易于量化加密分析,而Grover的Algorithm的algorithm却削弱了对称键和基于哈希的密码系统。在实施层中了解了较少的知识,在这种情况下,企业,运行和其他考虑因素,例如时间,资源,专有技术和成本可以影响受威胁的申请的速度,安全性和可用性。,我们对20种众所周知的威胁建模方法进行了景观研究,并在与攻击树和大步互补时识别面食,作为评估现有系统量子计算威胁的最合适方法。然后,我们在通用的网络物理系统(CPS)上进行意大利面威胁建模练习,以证明其效率并报告我们的发现。我们还包括在威胁建模练习中确定的缓解策略,以供CPS所有者采用。
(未通过同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。此预印本版的版权持有人于2025年2月23日发布。 https://doi.org/10.1101/2025.02.22.639634 doi:Biorxiv Preprint
在过去的十年中,非病毒DNA模板递送已与工程核酸酶一起使用,以靶向造血茎和祖细胞中的单链DNA序列。虽然对基因治疗有效,但该方法仅限于简短的DNA供体模板,从而限制了其对基因矫正的应用。为了扩大其范围,我们使用千层长的圆形单链DNA供体模板和TALEN技术开发了一个编辑过程。我们的结果表明,CSSDNA编辑过程可在可行的HSPC中实现高基因插入频率。与常规的AAV编辑过程相比,CSSDNA编辑的HSPC显示出更高的植入和维持鼠模型中基因编辑的倾向。这种积极的结果部分是由于较高水平的原始编辑的HSPC,更静止的代谢状态以及骨髓粘附标记的表达升高。我们的发现突出了CSSDNA作为基因治疗应用的通用和有效的非病毒DNA模板的强大潜力。
使用叶片组织作为外植物材料的单子蛋白转化的最新进展已扩大了能够转基因的草物种的数量。然而,矢量的复杂性和对基本形态调节剂的诱导切除率的依赖性迄今已有限的广泛应用。Plant RNA viruses, such as Foxtail Mosaic Virus (FoMV), present a unique opportunity to express morphogenic regulator genes, such as Babyboom ( Bbm ), Wuschel2 ( Wus2 ), Wuschel-like homeobox protein 2a ( Wox2a ), and the GROWTH- REGULATING FACTOR 4 (GRF4) GRF-INTERACTING FACTOR 1 (GIF1) fusion protein transiently在叶外植物组织中。此外,传统和病毒矢量的利他传递可以提供简化用于叶片转化的向量的机会 - 促进矢量优化并降低对形态学调节基因整合的依赖。在这项研究中,使用高粱双高粱叶叶植体促进胚胎calli的形成的能力,这是促进胚胎转化方案的关键步骤的能力。尽管传统的叶转换载体产生了可行的胚胎calli(43.2±2.9%:GRF4-GIF1,50.2±3%:BBM / WUS2),但采用GRF4-GIF1形态学调节剂的极端传统载体导致提高的效率,导致了改善的效率(61.3±4.7%)。无私的递送,分别为75.1±2.3%和79.2±2.5%的胚胎calli形成。由常规和病毒载体产生的胚胎calli产生了表达荧光记者的芽,并使用分子分析证实。这项工作为使用利他的载体和病毒表达的形态学调节剂提供了重要的概念证明,以改善植物转化。
使用叶片组织作为外植物材料的单子蛋白转化的最新进展已扩大了能够转基因的草物种的数量。然而,矢量的复杂性和对基本形态调节剂的诱导切除率的依赖性迄今已有限的广泛应用。Plant RNA viruses, such as Foxtail Mosaic Virus (FoMV), present a unique opportunity to express morphogenic regulator genes, such as Babyboom ( Bbm ), Wuschel2 ( Wus2 ), Wuschel-like homeobox protein 2a ( Wox2a ), and the GROWTH- REGULATING FACTOR 4 (GRF4) GRF-INTERACTING FACTOR 1 (GIF1) fusion protein transiently在叶外植物组织中。此外,传统和病毒矢量的利他传递可以提供简化用于叶片转化的向量的机会 - 促进矢量优化并降低对形态学调节基因整合的依赖。在这项研究中,使用高粱双高粱叶叶植体促进胚胎calli的形成的能力,这是促进胚胎转化方案的关键步骤的能力。尽管传统的叶转换载体产生了可行的胚胎calli(43.2±2.9%:GRF4-GIF1,50.2±3%:BBM / WUS2),但采用GRF4-GIF1形态学调节剂的极端传统载体导致提高的效率,导致了改善的效率(61.3±4.7%)。无私的递送,分别为75.1±2.3%和79.2±2.5%的胚胎calli形成。由常规和病毒载体产生的胚胎calli产生了表达荧光记者的芽,并使用分子分析证实。这项工作为使用利他的载体和病毒表达的形态学调节剂提供了重要的概念证明,以改善植物转化。
推荐引用推荐引用fadhil,al-shumoos,“工程THP-1细胞使纵向报告基因成像能够评估脱皮的脂肪组织水凝胶作为人单核细胞的递送平台”(2024)。电子论文和论文存储库。10645。https://ir.lib.uwo.ca/etd/10645
图 1 布氏锥虫 PCF 中的 GFP 失活。(a)对组成性表达胞浆 eGFP 的布氏锥虫进行荧光流式细胞术分析。在用 20 μ g(无 Cas9、Cas9/gRNA GFP1、Cas9/gRNA GFP2、Cas9/gRNA GFP3)或 60 μ g(Cas9/gRNA GFP2)来自 IDT 的 RNP 复合物转染后 24 至 72 小时随时间监测 GFP 荧光,条形图显示用不同向导转染后 72 小时 GFP 阴性细胞的百分比(n = 3)。采用 Prism 软件进行统计分析,采用 t 检验(非配对、正态分布、参数检验和双尾)。显着性水平(p 值)用星号表示。 (b)上图显示了允许 e Sp Cas9 在大肠杆菌中表达的质粒的示意图。蓝色框表示蛋白质 N 端和 C 端的两个多组氨酸序列,红色框表示 TEV 和肠激酶 (EK) 蛋白酶的切割位点,灰色框表示三个核定位信号 (NLS),黑色框表示 FLAG 表位的三个重复,橙色框表示 e Sp Cas9 编码序列。下图显示了在用来自 IDT 或实验室纯化 (Lab) 的 RNPs 复合物 (无 Cas9、20 μ g Cas9/gRNA GFP2、40 μ g Cas9/gRNA GFP2、40、60 和 80 μ g Cas9/gRNA GFP2) 转染后 72 小时监测的表达 GFP 的 T. brucei 的荧光流式细胞术分析。(c)不再表达 GFP 的克隆中 GFP 基因的一部分的序列比较。该序列仅显示 GFP2 向导 RNA 所针对的区域。灰色框(H1 和 H2)突出显示可能用于 MMEJ 修复的同源区域。由实验室纯化的 Cas9 失活产生的序列和来自商业 Cas9 的序列分别标记为 Lab 和 IDT。下面显示了 Dc6 和 Ba10 克隆的相应色谱图(置信区间 95%— p 值样式:0.1234 (ns);0.0332 (*);0.0021 (**);0.0002 (***);< 0.0001 (****))。
1 Introduction ............................................................................................................................................ 3
Philippe E Mangeot,Laura Guiguettaz,Thibault J M Sohier,Emiliano P Ricci。通过病毒样颗粒(“纳米薄片”)在永生和原代细胞中递送Cas9/sgrna核糖核蛋白复合物。可视化实验杂志:Jove,2021,169,10.3791/62245。hal-04892096
上下文。Atacama大毫米/亚毫米阵列(ALMA)透露,原始盘的毫米灰尘结构极为多样,从小而紧凑的灰尘盘到具有多个环和间隙的大型灰尘盘。已经提出,内部圆盘中H 2 O发射的强度特别取决于外盘中的冰卵石的涌入,这一过程将与外尘盘半径相关,并且可以通过压力凸起来预防。此外,灰尘结构还应影响内盘中其他气体物种的发射。由于陆地行星可能在内部圆盘区域形成,因此了解其组成是感兴趣的。目标。这项工作旨在评估压降对内盘分子储层的影响。存在尘埃间隙,并可能在圆盘上较远的巨型行星形成,可能会影响内盘的组成,从而影响陆地行星的构建块。方法。使用詹姆斯·韦伯(James Webb)空间望远镜(JWST)上中红外仪器(MIRI)中型仪器(MIRI)中型培养物(MRI)的敏感性和光谱分辨率与Spitzer相比,我们比较了H2 O,H2 O,HCN,C 2 H 2的观察性发射特性,并与Alma观察的二张外粉丝观察,并确认二张外的盘中,并在ALMA观察中进行杂物,并在ALMA观察中涂鸦,并在Alma观察中涂鸦,并在Alma观察中,在Alma观察中,中间涂抹量宽度有数十个天文单位的椎间盘,周围有m⋆≥0的恒星。45m⊙。 结果。 我们发现,尘埃间隙的存在并不一定会导致H 2 O发射弱。45m⊙。结果。我们发现,尘埃间隙的存在并不一定会导致H 2 O发射弱。我们使用了新的可见性平面拟合ALMA数据来确定外尘盘半径并识别盘中的子结构。此外,相对缺乏较冷的H 2 O-发射似乎与含碳物种的发射升高有关。,大多数显示碳种类可检测到的发射。盘子和极宽的圆盘似乎作为一个有点独立的群体,具有更强的冷H 2 O发射和弱温暖的H 2 O发射。结论。我们得出的结论是,即使对于具有非常宽的间隙或空腔的盘子,完全阻塞径向尘埃似乎很难实现,这仍然可以显示出明显的冷H 2 O发射。但是,椎间盘之间似乎确实存在二分法,这些椎间盘表现出强烈的冷H 2 O和显示出HCN和C 2 H 2的强烈发射的二分法。对外灰尘盘结构和内盘组成的影响的更好限制需要有关子结构形成时间尺度和圆盘年龄的更多信息,以及将(CO和CO 2)等(Hyper)挥发物(如CO和CO 2)捕获的重要性,例如H 2 O(例如H 2 O),以及CO的化学转化,将CO转化为挥发性较小的物种。