XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemActivators
2024; 15（3）：623-631。 doi：10.7150/jca.90085研究论文BCG免疫疗法通过FLT3/FLT3LG途径促进肿瘤来源的T细胞激活
膀胱滴注疗法是浅表或非肌肉浸润性膀胱癌的常见治疗方法。手术或清理后，化学疗法药物（表纤维素）或药物（例如杆菌Calmette-guérin（BCG））用于膀胱滴注疗法，这可以降低膀胱癌复发和进展的风险。但是，尚未透露BCG刺激抗肿瘤反应的特定机制。此外，尽管BCG免疫疗法有效，但很难预测哪些患者将具有阳性反应。在这项研究中，我们探索了BCG诱导的免疫反应，发现高水平的与FMS相关的受体酪氨酸激酶3配体（FLT3LG）在BCG处理后表达了。该FLT3LG可以直接作用于CD8 + T细胞并促进其增殖和激活。使用FLT3抑制剂可以中和BCG的抗肿瘤作用。体外实验表明，FLT3LG可以与T细胞受体激活剂协同作用，以促进肿瘤衍生的T细胞的激活。这项研究部分阐明了BCG免疫疗法中CD8 + T细胞激活的机制，并为优化BCG灌输疗法提供了膀胱癌
细胞周期蛋白A-CDK1抑制CDK1激活剂CDC25A的表达
细胞周期蛋白A和Cdc25a都是依赖细胞周期蛋白激酶（CDKS）的激活剂：Cyclin A充当Cdks和Cdc25a的激活子单位，A cdks抑制性磷酸化位点的磷酸酶。在这项研究中，我们发现了两个CDK激活剂之间的反比关系。作为细胞周期蛋白A是必不可少的基因，我们使用CRISPR-CAS9和DEGRON标记的细胞周期蛋白A的组合产生了有条件的沉默细胞系A. Cyclin A的破坏促进了CDC25A的急性积累。细胞周期蛋白A后Cdc25a的增加发生了整个细胞周期，并且独立于细胞周期延迟由细胞周期蛋白A缺乏效率引起的细胞周期延迟。此外，我们确定与Cyclin A的反相关关系是CDC25A的特异性，而不是其他调节CDK中相同位点的CDC25家庭成员或激酶。出乎意料的是，Cdc25a的上调主要是由于转录活性的增加而不是蛋白质稳定性的变化引起的。逆转Cyclin a耗尽细胞中Cdc25a的累积严重延迟G 2 - M。综上所述，这些数据提供了涉及CDC25A的补偿机制的证据，该机制可确保在不同级别的细胞周期蛋白A中及时进入A.
用于（表观）基因组编辑和基因治疗的 mRNA 反式剪接双 AAV 载体
大基因包括几个 CRISPR-Cas 模块，如基因激活剂 (CRISPRa)，需要双腺相关病毒 (AAV) 载体才能有效地在体内传递和表达。当前的双 AAV 载体方法具有重要的局限性，例如重建效率低、产生外来蛋白质或分裂位点选择的灵活性低。在这里，我们介绍了一种基于通过 mRNA 反式剪接 (REVeRT) 重建的双 AAV 载体技术。REVeRT 在分裂位点选择方面具有灵活性，可以在多种体外模型、人类类器官和体内有效地重建不同的分裂基因。此外，REVeRT 可以通过单一或多重方法在不同的给药途径上功能性地重建针对各种小鼠组织和器官中基因的 CRISPRa 模块。最后，REVeRT 能够在 Stargardt 病小鼠模型中玻璃体内注射后重建全长 ABCA4。由于其灵活性和效率，REVeRT 在基础研究和临床应用方面具有巨大潜力。
基于遗传筛查平台-KU Scholarworks
摘要：小分子药物靶标识别是表型药物发现中必不可少的限制步骤，并且仍然是一个主要挑战。在这里，我们通过利用群集定期间隔短的圆柱体重复序列（CRISPR）敲除库来报告一个新颖的平台，用于识别信号通路的激活剂的目标识别。此平台将自杀基因的表达链接到创建选择系统的小分子激活信号通路。使用该系统，使用CRISPR单个指南（SG）RNA库进行功能丢失筛选，积极地富集了靶标的细胞。然后通过测序发现药物靶标和其他感兴趣分子活性所需的其他必要基因。我们在BDW568上测试了该平台，BDW568是一种新发现的I型干扰素信号传导激活剂，并确定了干扰素基因（STING）的刺激剂是其靶标和羧酸酯酶1（CES1），是激活BDW568的关键代谢酶。我们提供的平台可以是一种通用方法，适用于激活不同信号通路的各种小分子的目标识别。■简介
通过基于挤出的3D打印来开发地球聚合物轻量级体系结构
对CO 2排放的缓解一直是近几十年来的主要社会问题，而后燃烧后CO 2是研究界提出的有效策略。分层多孔地球聚合物整体使用基于挤出的3D打印来制造CO 2捕获。首先使用碱性激活剂和增塑剂制定基于高岭土的粘弹性糊，并且观察到粘度随时间增加。第二，使用不同的后处理条件（如热固化，热液固化和高温热处理及其物理机械特性和CO 2 Adsorptive）对3D打印的多孔整体进行处理。热固化和加热的样品表现出无定形相，而在水热处理的样品中观察到了沸石相。印刷并随后进行热处理的机械稳定样品显示出比传统铸造的地球聚合物（0.66 mmol/g）明显更高的CO 2吸附（1.22 mmol/g）。将3D打印与地球聚合物技术相结合可以为CO 2捕获提供可持续的方法设计和结构吸附剂。
新生儿肺动脉高压的新治疗靶点
新生儿持续性肺动脉高压 (PPHN) 是新生儿发病和死亡的重要原因。尽管医疗保健取得了进步，但死亡率仍然很高。在美国，吸入一氧化氮是 PPHN 患者的金标准治疗方法。然而，虽然它减少了对体外膜氧合的需求，但许多患者对吸入一氧化氮没有反应，并且它不会改善 PPHN 患者的总体死亡率。此外，在世界许多地方，使用一氧化氮的成本过高。因此，迫切需要研究替代疗法以改善新生儿的结果。在这篇综述中，我们介绍了一些新兴的肺动脉高压治疗目标的动物和人类数据，并优先考虑可用的儿科和新生儿数据。具体来说，我们讨论了可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂和活化剂、前列环素及其类似物、磷酸二酯酶 3、4 和 5 抑制剂、rho-激酶抑制剂、内皮素受体阻滞剂、PPARγ 激动剂和抗氧化剂在治疗新生儿 PPHN 中的作用。关键词：体外膜氧合、新生儿、新生儿持续性肺动脉高压、肺动脉高压。新生儿 (2022)：10.5005/jp-journals-11002-0015
r e v i e w在局灶性节段性肾小球硬化治疗中的进步，从足够细胞损伤的最新机制的角度来看
摘要：足细胞损伤被广泛认为是驱动局灶性节段性肾小球硬化（FSG）进展的基本机制。最近的研究集中在旨在破坏足细胞内特定致病信号级联的靶向疗法上，从而导致了值得注意的进步。诸如肌动蛋白细胞骨架中改变，氧化应激，线粒体功能障碍以及在足细胞损伤微环体内的自噬不足的机制的作用引起了人们的注意。相应的有针对性药物，例如阿atacept，趋化因子受体（CCR）抑制剂，CDDO-IM（2-甲状体-3,12-12-二氧化碳-1,9-Dien-28-28- imidazolide），单磷酸腺苷单磷酸激活的pro tein kinase（AMPK）激活剂（AMPK）激活剂（AMPK）活化剂，目前是Adaliminabs and Adaliminab。值得注意的是，某些药物（例如利妥昔单抗和斯帕塞坦）可能同时针对多种下游机制，此外，探索分子策略用于已建立药物的分子策略，并开发以抗CD40抗体，血液microRNA，尿液micrororna和Tumor necrise for Aver-aver-aver-pha（Tne Aver-pha）（themerication forsional）的指导。 FSG患者。关键字：局灶性节段性肾小球硬化，足细胞损伤，靶向疗法，生物标志物
核糖核酸酶A（rnase a）（冻干形式）
RNase A是一种用于分子生物学应用的牛胰腺内切核酸酶。RNase A的主要应用是从制备质粒DNA以及提取质粒DNA中去除RNA。它也用于去除非特异性结合的RNA； RNase保护分析； RNA序列的分析以及蛋白质样品中包含的RNA的水解。rNase A在嘧啶核苷酸的3¢磷酸盐处攻击。PG-PG-PC-PA-PG的序列将被裂解以得到PG-PG-PCP和A-PG。最高的活性用单链RNA表现出来。RNase A是一个包含4个二硫键的单链多肽。 rnase a可以通过烷基化12或119的烷基化来抑制，这些烷基化存在于酶的活跃部位中。 RNase A的活化剂包括钾和钠盐。 Molecular mass: 13.7 kDa (amino acid sequence) Extinction coefficient: E1% = 7.1% (280nm) Isoelectric point: pI: 9.6 Optimum temperature: 60°C (activity range of 15 - 70°C) Optimum pH: 7.5 (activity range of 6 - 10) Inhibitors: Ribonuclease inhibitor Activity (Kunitz): ≥60 units/mg蛋白质RNase A是一个包含4个二硫键的单链多肽。rnase a可以通过烷基化12或119的烷基化来抑制，这些烷基化存在于酶的活跃部位中。RNase A的活化剂包括钾和钠盐。 Molecular mass: 13.7 kDa (amino acid sequence) Extinction coefficient: E1% = 7.1% (280nm) Isoelectric point: pI: 9.6 Optimum temperature: 60°C (activity range of 15 - 70°C) Optimum pH: 7.5 (activity range of 6 - 10) Inhibitors: Ribonuclease inhibitor Activity (Kunitz): ≥60 units/mg蛋白质RNase A的活化剂包括钾和钠盐。Molecular mass: 13.7 kDa (amino acid sequence) Extinction coefficient: E1% = 7.1% (280nm) Isoelectric point: pI: 9.6 Optimum temperature: 60°C (activity range of 15 - 70°C) Optimum pH: 7.5 (activity range of 6 - 10) Inhibitors: Ribonuclease inhibitor Activity (Kunitz): ≥60 units/mg蛋白质
259发现合成信号通路受体...
背景嵌合抗原受体（CAR）T细胞由于慢性抗原刺激引起的CAR-T功能障碍而在实体瘤中具有LIM临床功效，并且在肿瘤微环境中抑制信号。细胞因子介导的信号通过JANUS-激酶信号换能器和转录激活因子（JAK/STAT）途径已显示可调节T细胞分化，并增加效应子功能和持久性。我们假设可以部署合成生物学方法来确定通过调节特定JAK/STAT活性来改善治疗性T细胞功能的合成受体。在没有外部配体（称为合成途径激活剂（SPA））的情况下，旨在参与构成型JAK/Stat信号的合成受体库，并筛选为增强工程CAR-T细胞的抗肿瘤活性的能力。我们在集成的电路T细胞（ICT）中表达了Spa库，它们是表达逻辑门并通过非病毒CRISPR介导的转基因敲击生成的工程T细胞。我们通过流式细胞仪测量了急性和慢性肿瘤挑战测定法，cytokine产生，cyto-Kine产生，STAT磷酸化谱以及效应子/记忆表型的细胞毒性。随后在鼠异种移植肿瘤模型中测试了表达铅SPA的逻辑门构建体，以评估抗肿瘤功效和药代动力学。结果某些合成途径激活剂（称为I类水疗中心）表明，在体外慢性肿瘤挑战测定中，抗肿瘤功效提高，保留效应子功能，并在慢性抗原博览会上保持了茎的标记。这种改善的体外抗肿瘤功效转化为异种移植实体瘤模型中改善的细胞扩张和效力：表达SPA的细胞的剂量明显低于对照ICT细胞的剂量明显低于剂量。重要的是，尽管它们增加了增殖潜力，但表达水疗中心的ICT并未表现出细胞因子独立的产物，并在体内降低了肿瘤清除率。结论我们已经开发了一类SPA，可以参与组成型Stat信号传导，并显着增强临床前测定中治疗性T细胞的抗肿瘤活性。SPA-表达T细胞表现出增加的效应功能的膨胀和保留，从而完全清除了非常低的T细胞剂量的大型异种移植肿瘤。我们的铅I类水疗中心已纳入AB-2100，这是一种综合电路T细胞候选药物，旨在治疗透明细胞肾癌（CCRCC）。
使用高通量测量值在各种情况下开发紧凑的转录效应子
转录效应子是已知激活或抑制基因表达的蛋白质结构域。但是，缺乏对哪种效应域调节转录的系统性理解。在这里，我们开发了DCAS9介导的高通量募集（HT-RECRUIT），这是一种合并的筛选方法，用于量化内源性靶基因的效应子功能和测试效应子功能，用于包含各种环境的5,092个库中的库。我们还使用较大的文库瓷砖调节剂和转录因子来绘制从未注释的蛋白质区域绘制的效应子的上下文依赖性。我们发现许多效应子取决于目标和DBD上下文，例如可以充当激活因子或阻遏物的HLH域。为了实现有效的扰动，我们选择了包括ZNF705 KRAB在内的上下文固定域，从而改善了CRISPRI工具以使启动子和增强子保持沉默。我们通过结合NCOA3，FOXO3和ZnF473结构域来设计一种称为NFZ的紧凑型人类激活剂，该结构域可以通过更好的病毒递送和对嵌合抗原受体T细胞的诱导控制有效的CRISPRA。