背景:基因操作在微生物中有着广泛的应用。通过基因操作和基因编辑,可以构建多功能菌株,同时生产包括酶在内的多种工业生物材料。目的:根据纤维素酶在包括食品工业在内的各个行业中的重要性,本研究旨在通过基因操作在土著蜡状芽孢杆菌EG296菌株中生产纤维素酶。材料与方法:采用SOEing PCR扩增位于蜡状芽孢杆菌蛋白酶基因(aprE)调控上游和下游区域之间的枯草芽孢杆菌168纤维素酶基因,并通过自然转化转化为蜡状芽孢杆菌EG296。在筛选出具有纤维素酶活性的菌株后,通过同源重组从转化子的基因组中删除scoC基因(aprE基因的负转录调控因子),以同时提高纤维素酶和蛋白酶活性。结果:蜡状芽孢杆菌基因组中引入纤维素酶基因,纤维素酶活力约为0.61 u.mL -1 。通过scoC基因缺失,蛋白酶活力由230 u.mL -1 提高到363.14 u.mL -1 ,同时,在蛋白酶启动子调控下的纤维素酶活力也由0.61 u.mL -1 提高到0.78 u.mL -1 。蜡状芽孢杆菌表达的纤维素酶和蛋白酶的不稳定性指数分别为26.16和20.18,远低于40的阈值,因此两种酶均比较稳定。结论:获得了1株能够生产和分泌两种重要工业胞外酶(纤维素酶和蛋白酶)的基因工程菌株,且后续纯化工艺简单。
摘要:蜡状芽孢杆菌是重要的人畜共患病原病原体。它是在蔬菜,乳制品,大米和其他食物中发现的,从而极大地危害了人类健康。对中国蜡状芽孢杆菌污染的调查主要集中在原始牛奶,乳制品,肉类等上,并且已经对植物性食品进行了有限的研究。测序技术的快速发展以及与生物信息学相关的技术的应用意味着,基于全基因组测序的分析已成为酿酒芽孢杆菌分子 - 性能学研究的重要工具。在这项研究中,我们调查了从八个省的六个地区的六种商业植物食品中熟食的污染。通过全基因组测序分析了分离的蜡状芽孢杆菌的分子流行病学。我们旨在为中国食品中食品酿酒芽孢杆菌的监视和流行病学分析提供基本数据。这项研究中建立的蜡状芽孢杆菌的快速可追溯性系统可以为蜡状芽孢杆菌快速分子流行病学分析以及预防和监视蜡状芽孢杆菌提供基础。此外,它也可以扩展到监测和快速追踪食源性病原体。
抽象的背景肿瘤内BCG治疗是最早的免疫疗法之一,可导致免疫细胞浸润到治疗的肿瘤中。然而,肿瘤微环境中BCG诱导的肿瘤特异性T细胞数量的增加可能导致治疗作用增强。方法,我们已经开发了一种基于BCG的新型癌症疫苗平台,可以将BCG诱导的免疫反应扩展到包括肿瘤抗原。通过将肿瘤特异性肽物理连接到分枝杆菌外膜上,我们能够诱导强大的全身和肿瘤内T细胞特异性免疫反应对附着的肿瘤抗原。这些治疗肽可以使用与肿瘤特异性肽融合的聚丝氨酸序列N末端有效地连接到分枝杆菌外膜。使用两种小鼠黑色素瘤模型和一个结直肠癌的小鼠模型的结果,我们观察到,可以通过将BCG涂有肿瘤特异性肽来改善BCG的抗肿瘤免疫反应。此外,通过将这种新型的癌症疫苗平台与反编程死亡1(抗PD-1)免疫检查点抑制剂(ICI)治疗相结合,对抗PD-1免疫疗法的响应者的数量显着增加。结论本研究表明,可以通过将细菌与改良的肿瘤特异性肽涂层来改善肿瘤内BCG免疫疗法。此外,这种改善的BCG免疫疗法可以与ICI治疗相结合,以获得增强的肿瘤生长控制。这些结果需要对这个新型癌症疫苗平台的临床测试。
多态毒素是细菌战争的武器,用于限制竞争对手、帮助亲属选择和塑造细菌群落。多态毒素系统 (PTS) 在革兰氏阴性细菌中得到了充分研究,但对革兰氏阳性细菌的研究有限。在枯草芽孢杆菌中,已报道了几种毒素免疫蛋白对,包括 YeeF-YezG、YobL-Y、obK YxiD- YxxD。很少有研究描述这些毒素-免疫对的结构/机制细节。这种毒素需要 VII 型分泌系统。我们已经证明 YeeF 的 C 端结构域 (YeeF-CT) 含有具有 DNase 活性的毒素。YeeF-CT 的表达会导致大肠杆菌的生长缺陷并导致形态变化。而毒素-免疫对的共表达可恢复正常的细菌生长。在这里,我们报告了 YeeF-CT 与其同源抗毒素 YezG 结合的晶体结构,分辨率为 2.1 Å。晶体结构表明,毒素 (YeeF-CT) 在与其同源免疫蛋白 (YezG) 结合后会发生重大构象变化。比较结构分析表明,毒素的六个 β 片层(核酸酶活性所必需的)在与免疫蛋白结合后被撕裂成两个子域。这种机制不同于其他 II 型毒素-抗毒素系统,其中抗毒素的内在无序区域与毒素的活性位点结合,从而在空间上阻断其底物的结合。我们目前正在研究这种毒素-免疫蛋白对的结构指导详细表征。
β-六氨基胺单核苷酸(β -NMN)是一种生物活性物质,在人体中具有必不可少的功能。nmn可以转换为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD +),这是一种参与NAD依赖性信号转导的辅酶,并充当代谢氧化还原反应的电子载体。当NAD +不足时,补充额外的NMN可以增加体内的NAD +含量以预防帕金森氏病(Lu等,2014; Martin等,2017),调节代谢,减少凋亡,并保持氧化还原状态(Alano等,2004)。此外,补充NMN可以防止DNA损伤和活性氧的积累(ROS)(Tarantini等,2019)。此外,NMN发挥神经保护作用并改善了认知和行为功能(Li等,2017; Johnson等,2018; Hosseini等,2019; Miao等,2020)。Recent studies have reported that NMN supplementation exerts therapeutic effects on chronic inflammation and retinal damage, promotes melanogenesis ( Chen et al., 2020; Liu et al., 2021; Lin et al., 2021b; Brito et al., 2022 ), and helps prevent skin photoaging, glaucoma, and cisplatin-induced ototoxicity ( Katayoshi et al., 2021; Petriti等人,2021年;
2 Partiolab,校园大学De laChactultéDemblouxAgro-Bio-Bio-Bio-Bio-Bio Tech/UniversitédeLiège,B-5030 Gembloux,比利时3 Bioecoagro研究部门,Terra联合研究中心,Terra Terra教学中心,微生物过程和互动 and Bakhtiari Agricultural and Natural Resources Research and Education Center, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Shahrekord, Iran 5 Department of Food Hygiene and Quality Control, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran 6 Department of Animal and Aquatic Sciences, Faculty of Agriculture, Chiang Mai University, Chiang Mai, Thailand ♦ Corresponding作者:hamed_ghafari@alumni.ut.ac.ir; ccchou@nchu.edu.tw
在这项回顾性研究中,评估了从人类,各种样本(血液,脾脏,肺,肺,肝,肝脏,肉类)中获得的炭疽芽孢杆菌分离株的抗菌易感性谱,死动物(牛,绵羊,狗,狗,狗,马)死于炭疽病和土壤中,这些动物死于炭疽病和土壤中,这些动物是从2012年和2023年之间的动物埋葬区中的,来自动物埋葬区和20233年的20233年。在这种情况下,研究了从1人,两匹马,51头牛,7只绵羊,1只狗和25个土壤中获得的炭疽病分离株。使用保护性抗原(PA)和胶囊(CAP)Gen特异性PCR将分离株证实为炭疽芽孢杆菌。使用Kirby-Bauer磁盘扩散方法来恶化抗菌敏感性。在测试了十种包括青霉素,阿莫西林,甲氧苄啶 - 硫唑嗪,红霉素,美霉素,链霉菌蛋白,氧法,环丙沙星,环丙沙星,氯霉素和克林霉素。由于PCR,所有分离株均被确认为炭疽芽孢杆菌的完全毒物场菌株。所有分离株都易受青霉素,阿莫西林,氧氟沙星和环丙沙星的敏感。自从该地区的最后一项研究以来,仅观察到尚硫邻苯二酚 - 磺胺甲氧唑的抗菌菌菌株的抗菌谱发生变化,这是对抗微生物测试的抗菌素的变化,这是从耐药性转变为耐药性的转变。总而言之,青霉素和阿莫西林仍然是预防和治疗炭疽病的首选的抗生素。loxacin和环丙沙星的有效性也足够有效,可以接受治疗。
枯草芽孢杆菌是一种革兰氏阳性细菌,属于多功能枯草芽孢杆菌基团,以及pumilus芽孢杆菌,扁豆芽孢杆菌和阿甘洛氏芽孢杆菌。1,2它表现出一种出色的遗传多样性,使其能够适应各种生态壁ni,范围从深海热液通风口到土壤和人类胃肠道。3,4其形成对恶劣条件有抵触的孢子的能力进一步有助于枯草芽孢杆菌在这些具有挑战性的环境中的生存。5为了在其特定栖息地中获得选择性优势,枯草芽孢杆菌还产生了广泛的生物活性代谢物库,包括聚酮化合物(PKS),非尖型体肽(NRPS),核糖体合成和后变性型eDi peptides(ripps)和terpials ant portials and terpent ant potport potport potpotirimicrip portimirimicrip。6,7该物种还用作农业中的生物防治药物,用于打击植物病原体并促进植物生长。6,8
摘要:许多芽孢杆菌属物种因能够产生可防止疾病生长的抗菌肽而对植物有益。在本研究中,我们研究了芽孢杆菌3-19菌株及其衍生物在靶向基因组编辑后的拮抗活性。利用CRISPR-Cas9系统特异性地失活了芽孢杆菌3-19基因组中的两个具有抗菌作用的肽基因——芽孢杆菌素 (bac) 和细菌素 (bact),以及编码孢子形成西格玛因子的sig F基因。由于芽孢杆菌3-19基因组中靶基因的失活,对蜡状芽孢杆菌和布伦纳泛菌的抗菌活性降低,其中对芽孢杆菌素的影响明显。当 bac 、 bact 和 sig F 基因失活时,培养物的生长动态发生变化,并且变异菌株的蛋白水解活性较低。通过失活 sig F 基因获得了 B. pumilus 3-19 的无孢子突变体。已经证明,bacilysin 在 B. pumilus 3-19 对土壤微生物的拮抗作用的形成中起着独特的作用。
免疫调节通常被定义为对免疫反应的故意调节,对人类健康具有深远的影响(8-12)。免疫系统信号分子在消除异常细胞和维持稳态方面起关键作用。调节这些反应的能力开辟了新的治疗选择,这些选择超出了传统治疗方法。成功的免疫调节的影响扩展到广泛的应用,例如(a)慢性疾病管理,(b)癌症免疫疗法,(c)压力弹性,以及(d)传染病管理(13)。免疫系统和压力是相互联系的,心理和生理状态之间的相互作用在平衡这两个因素方面起着重要作用。许多因素会影响个人对感染的抵抗,例如体育锻炼,压力,年龄和吸烟,饮酒和药物(7)。尽管有许多其他治疗选择,但益生菌在近期被认为是一个突出的选择(4)。益生菌目前被定义为活体生物,如果以足够的量给予宿主,则可以为宿主提供健康益处。该定义反映了广泛的研究,表明益生菌可以增强宿主健康并治疗各种感染性和非感染性病理(14,15)。