复原 我们建议在打开前先短暂离心此小瓶,使内容物沉至底部。请使用去离子无菌水复原蛋白质至浓度为 0.1-1.0 mg/mL。我们建议添加 5-50% 甘油(最终浓度)并分装以在 -20°C/-80°C 下长期储存。我们默认的甘油最终浓度为 50%。客户可以将其作为参考。
2-苯基乙醇以其玫瑰般的气味和抗菌活性而闻名,通过苯基丙酮酸脱羧酶(PDC)和醛还原酶的顺序反应通过外源苯基丙酮酸合成。我们首先靶向ARO10,这是酿酒酵母的苯基丙酮酸脱羧酶基因,并鉴定出合适的醛还原酶基因。大肠杆菌转化体中ARO10和YAHK的共表达在批处理培养中产生1.1 g/L的2-苯基乙醇。我们假设PDC活动可能有瓶颈。利用基于计算机的酶进化来增强产量。与野生型ARO10相比,在ARO10(ARO10 I544W)中引入氨基酸取代(ARO10 I544W)稳定了苯基丙酮酸底物的芳族环,增加了2-苯基乙醇的产量4.1倍。培养ARO10 I544W表达大肠杆菌的培养2.5 g/l的2-苯基乙醇,在72小时后,葡萄糖的产量为0.16 g/g。这种方法代表着显着的进步,迄今为止使用微生物从葡萄糖中获得了2-苯基乙醇的最高收率。培养ARO10 I544W表达大肠杆菌的培养2.5 g/l的2-苯基乙醇,在72小时后,葡萄糖的产量为0.16 g/g。这种方法代表着显着的进步,迄今为止使用微生物从葡萄糖中获得了2-苯基乙醇的最高收率。
摘要 微生物(包括潜在病原体)可在水环境中的塑料表面定殖。本研究调查了大肠杆菌(E. coli)作为水环境中粪便病原体的替代物对塑料颗粒的定殖情况。将来自污染海滩的塑料颗粒放置在添加了大肠杆菌的海水水族箱中。多种细菌(主要来自变形菌门)在 24 小时内迅速在颗粒上定殖,其中值得注意的是以塑料或碳氢化合物降解而闻名的菌种。在 26 天内,塑料表面形成了生物膜,细菌种群达到 6.8 10 5 个 16S rRNA 基因拷贝数 (gc) mm 2 。使用培养方法在颗粒中检测到大肠杆菌长达 7 天,无论来源或环境因素如何,其附着密度均有所不同。该研究强调塑料生物膜是大肠杆菌的储存器,有助于粪便细菌在水生系统中生存和持续存在。这些发现加深了我们对海洋环境中塑料污染相关风险的理解,深入了解了粪便指标的行为及其对水质评估的影响,同时提供了有关塑料相关微生物群落中潜在病原体传播的宝贵信息。
对于大多数生物体,DNA采用了负超螺旋的状态[( - )SC],该状态已知促进DNA螺旋的疾病,从而促进与关键细胞过程有关的分子机械获得遗传信息的获取(1)。相比之下,在DNA复制和转录机械之前生成正涂层[(+)SC](2)。在没有放松(+)SC的拓扑异构酶的情况下,这些基本过程受到阻碍(3)。IIA型DNA拓扑异构酶(topoiia)是进化保守的大分子,通过通过短暂的双链断裂,使DNA弛豫,衰减和脱节来调节DNA拓扑,从而调节DNA拓扑。拓扑素酶是用于传染病和癌症治疗的治疗剂的主要靶标(5,6)。
Access Microbiology 是一个开放的研究平台。预印本、同行评审报告和编辑决定可在本文的在线版本中找到。收到日期:2023 年 10 月 11 日;接受日期:2024 年 6 月 26 日;发布日期:2024 年 7 月 17 日作者隶属关系:1 美国陆军作战能力发展司令部化学生物中心,8908 Guard St. E3831,Gunpowder,MD 21010,美国;2 Excet Inc. 6225 Brandon Ave #360,Springfield,VA 22150,美国。*通信:Nathan D. McDonald,Nathan.d.mcdonald5.civ@army.mil 关键词:CRISPR-Cas9;基因组工程;脂质 A;脂多糖。缩写:KDO,3-脱氧-d-甘露-辛-2-乌洛索;LOS,脂寡糖;LPS,脂多糖;PAM,原间隔区相邻基序。本文的在线版本提供了两个补充图。000723.v3
简介:紫皮蛋白是一种由各种细菌产生的双座,众所周知,可以显示出广泛的药物特性。不幸的是,天然紫饼蛋白生产商的生产力低,导致了不一致的紫cile蛋白供应,从而限制了其作为未来治疗剂的应用。异源表达系统,例如大肠杆菌和Pichia Pastoris,提供了一种产生这些高价值的次级代谢物的替代方法。这项工作描述了大肠杆菌中紫质蛋白异源生产的遗传体系的发展。方法:紫c。violaceum,mth01的生产者是从马来西亚马来西亚大学的林理学基础上分离出来的。使用基因特异性底漆,整个7.3 Kb紫out基因簇从C. volaceum mth01 DNA成功扩增,克隆到PUC19矢量(PVIO19)中,然后分别为PET-3A和PET-3A和PET-11B,分为PVIO3A和PVIO3A和PVIO11B,分别为PET-3A和PET-11B。为异源表达,优化了碳源,温度,诱导剂(IPTG)和L-色氨酸的参数。使用TLC和FTIR分析了从紫色的大肠杆菌转化体中提取的violacein。结果:几天后,含有PVIO3A或PVIO11B的大肠杆菌转化体开发了紫色菌落,表明紫co菌菌素在大肠杆菌中成功表达。TLC分析显示,RF值可与脱氧维奥莱辛(紫氧化紫葡萄丝(Deoxyviolacein)(一种中介代谢物)中的脱氧葡萄蛋白相媲美,而FTIR光谱揭示了胺和羰基的存在,这两个都是吲哚的特征。结论:此处描述的大肠杆菌异源系统可以利用葡萄糖或甘油作为碳源。将L-色氨酸添加到生长培养基中对于成功表达紫col途径是必要的。
。cc-by-nc-nd 4.0国际许可证(未经同行评审证明)获得的是作者/资助者,他授予Biorxiv授予Biorxiv的许可,以永久显示预印本。这是该版本的版权所有,该版本于2024年10月7日发布。 https://doi.org/10.1101/2024.08.06.606784 doi:Biorxiv Preprint
在过去的几十年中,人们对太空环境在微生物遗传和表型变化中的作用的研究兴趣日益浓厚。更具体地说,人们担心宇航员在执行月球及更远太空任务期间的健康会因许多条件的变化而受到损害。这些变化包括细菌生理学变化,这些变化会导致与人类健康直接相关的变化,例如毒性和抗生素耐药性,或生命支持系统的功能变化,例如供水或处理组件中生物膜形成的增加。十多年来,人们一直在研究太空条件对微生物的影响;然而,仍然需要确定微重力的生理效应不仅对细菌生长的影响,而且对可能有助于表型可塑性和微生物适应的不同毒力相关表型的影响。本研究重点是利用 2D 微重力模拟物来解释共生菌大肠杆菌 K12 在模拟微重力条件下生长后的表型变化。利用 2D 回转器,大肠杆菌生长长达 22 天,并用于测量通常与毒力相关的表型变化。测量的表型包括细胞群生长、生物膜发育以及对酸性 pH 和氧化应激的反应。我们的研究结果表明,在酸性条件下,生物膜形成有增强趋势,对氧化应激的抵抗力下降,并且更容易生长。这些结果表明,微重力调节大肠杆菌的适应性和表型可塑性,从而导致毒力发生变化。
a quadram institute bioscience, Norwich Research Park, Norwich NR4 7UQ, United Kingdom B Department of Pathobiology, University of Guelph, Guelph N1G 2W1, Canada C Microbiology Laboratory, Public Health Agency of Canada, Winnipeg, Manitoba R3E 3R2, Antibioresistance and bacterial virulence, ANSES- University of Lyon, Lyon 69007, France e Intestin microbes In fl ammation and susceptibility of the host (M2ISH), Faculty of Medicine, Clermont Auvergne University, Clermont- Ferrand 63001, France F National Reference Center for Antibiotics, Center Hospitalier universitaire-Ferrand, Clermont- Ferrand 63000, France G Institute of Microbiology and Epizootics, School of Veterinary Medicine, Freie柏林大学,柏林大学,14163年,德国H兽医阻力研究中心(TZR),柏林弗里大学兽医医学院,柏林,柏林,柏林14163医学微生物学和传染病,Max Rady医学院,Rady Health Secunty of Manitoba,Manitizization of Manitizistion of Manitizization of Winnipeg,Manitoba Rytoba,Manitoba Rynipeba,Manitoba Rybar3e999999999。抗生素单元监测抗生素的抵抗力,联邦保护和食品安全,柏林12277,德国K东安格利亚大学,诺里奇NR4 NR4 7TJ,英国
1 埃及索哈杰大学药学院微生物学与免疫学系,2 埃及米尼亚大学药学院微生物学与免疫学系,3 埃及米尼亚德拉亚大学药学院微生物学与免疫学系,4 埃及埃尔法塔赫艾斯尤特大学医学院医学微生物学与免疫学系,5 黎巴嫩贝鲁特黎巴嫩美国大学吉尔伯特与罗斯玛丽查古里医学院,6 埃及索哈杰大学药学院药理学与毒理学系,7 沙特阿拉伯麦加乌姆古拉大学药学院药物化学系,8 沙特阿拉伯麦加乌姆古拉大学药学院药剂学系
