PANDNA试剂盒包含3个洗涤缓冲液(CW1,CW2和PW1),以提取各种样品类型。CBB套件仅包含2个洗涤缓冲液(CW1和CW2)。缓冲CW1,CW2和PW1作为浓缩物提供。CW1和CW2的最终乙醇浓度使用60%。PW1最终乙醇浓度使用70%。在使用之前,如瓶子上所示,将适当的乙醇量(96-100%)添加到缓冲液CW1,CW2和PW1中。
PANDNA试剂盒包含3个洗涤缓冲液(CW1,CW2和PW1),以提取各种样品类型。CBB套件仅包含2个洗涤缓冲液(CW1和CW2)。缓冲CW1,CW2和PW1作为浓缩物提供。CW1和CW2的最终乙醇浓度使用60%。PW1最终乙醇浓度使用70%。在使用之前,如瓶子上所示,将适当的乙醇量(96-100%)添加到缓冲液CW1,CW2和PW1中。
PANDNA试剂盒包含3个洗涤缓冲液(CW1,CW2和PW1),以提取各种样品类型。CBB套件仅包含2个洗涤缓冲液(CW1和CW2)。缓冲CW1,CW2和PW1作为浓缩物提供。CW1和CW2的最终乙醇浓度使用60%。PW1最终乙醇浓度使用70%。在使用之前,如瓶子上所示,将适当的乙醇量(96-100%)添加到缓冲液CW1,CW2和PW1中。
NucleOmag®HMWDNA试剂盒设计用于从细胞,组织和植物材料中分离出高分子量DNA。此外,还显示了全血(EDTA),唾液,颊拭子以及细菌和酵母样品的兼容性。该程序基于在适当的缓冲液条件下核酸对顺磁珠的可逆吸附。样品裂解是使用裂解缓冲液HM1或HMB和蛋白酶K进行酶促的。用于将核酸与顺磁珠,结合缓冲液HM2和核瘤®B-珠的结合添加到转移和清除的裂解物中。磁分离后,使用洗涤缓冲液HM3,HM4和70%乙醇洗涤顺磁珠以去除污染物和盐分。使用冲洗缓冲液HM5去除以前的洗涤步骤的残留乙醇。接下来,高度纯化的DNA用洗脱缓冲液HM6洗脱,可直接用于下游应用。可以手动使用NucleOmag®HMWDNA试剂盒,也可以在标准的液体处理仪器和自动磁分离器上自动化。
NucleOmag®HMWDNA试剂盒设计用于从细胞,组织和植物材料中分离出高分子量DNA。此外,还显示了全血(EDTA),唾液,颊拭子以及细菌和酵母样品的兼容性。该程序基于在适当的缓冲液条件下核酸对顺磁珠的可逆吸附。样品裂解是使用裂解缓冲液HM1或HMB和蛋白酶K进行酶促的。用于将核酸与顺磁珠,结合缓冲液HM2和核瘤®B-珠的结合添加到转移和清除的裂解物中。磁分离后,使用洗涤缓冲液HM3,HM4和70%乙醇洗涤顺磁珠以去除污染物和盐分。使用冲洗缓冲液HM5去除以前的洗涤步骤的残留乙醇。接下来,高度纯化的DNA用洗脱缓冲液HM6洗脱,可直接用于下游应用。可以手动使用NucleOmag®HMWDNA试剂盒,也可以在标准的液体处理仪器和自动磁分离器上自动化。
我们建议使用Qubit®DSDNABR分析(Q32850; Thermofisher Scientific)确定HMW DNA浓度。该测定法使用超敏感的荧光核酸染色来用标准的荧光计和荧光素激发和发射波长来量化双链DNA(dsDNA)。建议从顶部,中部和底部进行多次测量。
在铺设初始测试段之前至少 10 个工作日,承包商应提交制造商的文献资料和建议、树脂系统和硅藻土装运的材料安全数据表、树脂样品以及 HMWM 树脂系统铺设计划。HMWM 树脂系统铺设计划应包括:(1)每座桥梁的工作和测试时间表(2)表面准备要求(3)涂抹 HMWM 树脂的设备和工艺说明(4)验证涂抹率的工艺说明。(5)改变涂抹率的工艺说明。(6)HMWM 树脂的凝胶时间和最终固化时间范围(7)将使用的吸收材料。(8)涂抹和清除多余沙子和吸收材料的设备说明(9)清除 HMWM 树脂的程序,包括设备。(10)HMWM 树脂组分和吸收材料的储存和处理(11)多余 HMWM 树脂和容器的处理在 HMWM 树脂系统铺设计划获得书面批准之前,不得开始工作。
简介下面描述的SAGE HI-BEAD方案是专门设计的,用于从浓度低于10 ng/µl的样品中完整的HMW DNA分子浓度。通常使用Sage HLS-Catch靶向大片段富集程序遇到这种低浓度样本(请参阅https://sagescience.com/applications/target-capture/)。在低于10ng/µl的输入DNA浓度下,可以实现80%的回收率,如下表所示。表:在未切除的噬菌体T4 DNA样品(166KB线性DNA)上以两个不同的输入浓度(0.5和5 ng/µl)进行了复制HI珠清洁。通过量子HS分析测量恢复。更多的销售?HMW DNA浓度/纯化协议
Darwin Life Project是一项大型生物多样性计划,旨在为整个英国和爱尔兰的70,000种真核生物生成高质量的基因组。对于这样的大型项目,高通量(HT)解决方案至关重要; PACBIO NANOBIND HT DNA提取试剂盒与Revio系统相结合,通过显着增加吞吐量并降低长阅读测序的成本来满足这些需求。
提取高分子量(HMW)DNA进行长读测序,几乎没有碎片和高纯度是从蓝细菌物种中获取的。在这里,我们描述了一种使用Promega的向导R○HMW DNA提取试剂盒从两个蓝细菌物种中获取高分子量DNA的修改方法。套件中使用的协议是“ 3.D。从革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌中分离HMW DNA”方案。在协议中的关键步骤中,我们建议除去细胞碎片的挥之不去的残留物,例如蓝细菌物种的粘液层,以防止其粘在产生的DNA颗粒上。此自定义的修改是在步骤11和12之间进行的,并称为METIS(最大化提取,转移异丙醇步骤)。此步骤大大减少了剩余的粘液层,如果保留将粘贴在DNA上,并使DNA不适合敏感的下游下一代测序,例如PACBIO测序。该方案已用于组装来自蓝细菌的两个基因组(Sychococcussp。和微囊孢子虫),一个来自革兰氏阴性细菌,lacibacter。它还允许在不使用有毒化学物质(例如苯酚)的情况下快速提取HMW DNA,而无需购买额外的试剂。