•使用前立即制备裂解缓冲珠混合物(即,在样品裂解之前或样品裂解期间,蛋白酶K孵育步骤)。•通过将君主稳定DNA/RNA缓冲液(随附),君主载体RNA(随附),异丙醇(提供的用户)和君主mag珠M1(包括)组合,如协议中所述,准备裂解缓冲珠混合物(随附),Isropanol(随附),并在列出的顺序中添加组件。涡流磁珠在使用前约20秒钟,形成均匀的悬浮液。涡旋后小心打开瓶子,以确保磁珠不会溢出。•在室温下存储裂解缓冲珠混合物。•如果准备主混合物,请准备多余的混合物,以确保每个反应有足够的混合物。我们建议超过15%的过度。
用户友好的DNA工程方法可以实现多个PCR片段组件,核苷酸序列改变和定向克隆。靶DNA分子和克隆载体由PCR产生,而相邻片段之间具有6-10个同源性碱基。pCR引物包含一个二氧化神经菌残基(DU),该残基(DU)在同源性区域的3´末端,可以容纳核苷酸取代,插入和/或缺失。然后使用引物用离散的重叠片段扩增向量和靶DNA,这些片段在两端都包含DU。随后使用用户酶对PCR片段进行处理会在每个DU上产生一个单个核苷酸间隙,从而导致PCR片段侧翼,侧面有SS延伸,使定制DNA分子的无缝和方向组装成线性化的载体。多碎片组件和/或各种诱变变化。
通过构建由基因组DNA和DNA对照组成的Nebnext®EM-SEQ库(CPG甲基化的PUC19和未甲基化的Lambda),通过构建Nebnext®EM-SEQ库进行了功能测试,并与前面的批次进行了测试。NEBNEXT®EM-SEQ KIT的最小值和最大DNA输入要求用于制作在同一Illumina®流动池上测序的库。库评估基于指标,包括库产量,库大小,GC偏置,插入大小以及在基因组DNA和内部对照中检测到的CpG,CHG,CHH环境的5MC/5HMC百分比。
性质 性质 性质 性质 性质 值 值 值 值 值 备注 备注 备注 备注 备注 • 方法 方法 方法 方法 方法 pH值 pH值 pH值 pH值 pH值 无资料 未知 熔点 / 凝固点 熔点 / 凝固点 熔点 / 凝固点 熔点 / 凝固点 熔点 / 凝固点 无资料 未知 初沸点和沸程 初沸点和沸程 初沸点和沸程 初沸点和沸程 初沸点和沸程 无资料 未知 闪点 闪点 闪点 闪点 闪点 无资料 未知 蒸发速率 蒸发速率 蒸发速率 蒸发速率 蒸发速率 无资料 未知 易燃性(固体, 气体) 易燃性(固体, 气体) 易燃性(固体, 气体) 易燃性(固体, 气体) 易燃性(固体, 气体) 无资料 未知 空气中的燃烧极限 空气中的燃烧极限 空气中的燃烧极限 空气中的燃烧极限 空气中的燃烧极限 未知 燃烧或爆炸上限 燃烧或爆炸上限 燃烧或爆炸上限 燃烧或爆炸上限 燃烧或爆炸上限 无资料 燃烧或爆炸下限 燃烧或爆炸下限 燃烧或爆炸下限 燃烧或爆炸下限 燃烧或爆炸下限 无资料 蒸气压 蒸气压 蒸气压 蒸气压 蒸气压 无资料 未知 蒸气密度 蒸气密度 蒸气密度 蒸气密度 蒸气密度 无资料 未知 相对密度 相对密度 相对密度 相对密度 相对密度 无资料 未知 水溶性 水溶性 水溶性 水溶性 水溶性 无资料 未知 溶解度 溶解度 溶解度 溶解度 溶解度 无资料 未知 分配系数 分配系数 分配系数 分配系数 分配系数 无资料 未知 自燃温度 自燃温度 自燃温度 自燃温度 自燃温度 392.8 °C 分解温度 分解温度 分解温度 分解温度 分解温度 无资料 未知 运动粘度 运动粘度 运动粘度 运动粘度 运动粘度 无资料 未知 动力粘度 动力粘度 动力粘度 动力粘度 动力粘度 无资料
未显示。酶以粗体类型显示,并以常规类型显示具有两个限制位点的酶。所有NEB限制酶的位置位置可以在NEB网站上找到(选择技术参考> DNA序列和地图)。限制位点坐标是指每个识别序列中最高链上最高基数的位置。
Agencourt® Ampure® Beads(Beckman Coulter)制备 - NEBNext 快速 DNA 样本制备主混合物套装,用于 454 端修复和 dA 尾(E6090)
agencourt®Ampure®珠(Beckman Coulter)制剂-Nebnext快速DNA样品准备主混合组合454端修理和DA -Tailing(E6090)
扭曲靶向甲基化系统引入了完整的解决方案,该解决方案产生高度复杂且均匀的测序读数以进行甲基化分析。端到端协议通过结合创新的酶促转换过程,优化目标富集工作流以及高度开发的面板设计过程来实现这一目标。Twist Bioscience与新英格兰Biolabs合作,提供NEBNEXT®EMSEQ(酶促甲基序列)库准备,作为扭曲靶向甲基化系统的一部分。一个简单的工作流修改使二次面板(或尖峰)添加到甲基组中,在研究新应用或表观遗传研究领域时有用。
对于每个DiDail omni-c文库,将染色质与甲醛固定在原子核中,然后提取。用DNase I消化了固定的染色质,将染色质末端修复并连接到生物素化桥适配器,然后将含有末端的衔接子接近粘合。接近连接后,将交联后逆转并纯化了DNA。纯化的DNA以去除未结扎片段内部的生物素。使用NEBNEXT Ultra酶和Illumina兼容适配器生成测序文库。在每个文库富集之前,使用链霉亲和素珠分离含生物素的片段。库是在Illumina Hiseqx平台上测序的,以产生约30倍的序列覆盖率。然后Hirise使用MQ> 50读脚手架的读数(有关数字,请参见上面的“读取对”)。