ATP(三磷酸腺苷)是所有生物体中存在的分子,因此它是存在微生物或其残基可能促进其生长的良好指标。正确清洁后,应大大减少ATP的所有来源。开始监测时,测试中的试剂(荧光素酶/荧光素)与在拭子上收集的ATP反应以产生发光(Sch.1)。发出的光的强度与ATP的量成正比,因此,它也与构造程度成正比。测量光需要使用Phosreader Lumi-Nomer计,结果以相对光单元(RLU)显示。rlu结果提供了有关几秒钟内污染水平的信息。
摘要:消毒是在实验室动物设施中进行的一项重要活动,对消毒的定期评估为体内动物的表面清洁和健康状况提供了信心。主要目的是在验证三磷酸腺苷(ATP)生物发光方法后评估常规消毒和/或消毒实践,该方法进一步表示为相对光单元(RLU),这是一种相对简单且快速的方法,是在擦拭在任何表面上执行一分钟内在一分钟内解释结果的相对快速和快速的方法。五年的数据汇编表明,RLU值在内部可接受的限制内,这些动物室是从机架,隔离器,门,手推车,更换笼子的站点,桌子,桌子,墙壁和笼子配件中采样的。然而,由于有机物可能存在于设备表面上的有机物,诸如高流量区域的架子和手推车等材料显示,RLU值显着增加,但记录的值在设施设定的限制范围内。此外,还将接触板用作确认方法,以评估包括笼子配件在内的动物室中的微生物监测和RLU的进一步历史值提供了信心,使每月接触板抽样间隔增加到季度,并按照时间表按照时间表进行。在隔离期间定期进行微生物监测来筛选来自传入动物的代表性样本,并在综合健康监测计划的一部分中筛选了活跃的哨兵样品,以筛选血清学或PCR。总而言之,ATP方法可用于评估体内消毒实践的实时有效性,因为它可以立即向动物护理人员提供反馈,以实现纠正措施;因此,作为我们实验室动物设施的补充方法之一,ATP生物发光持续了。关键字 - 三磷酸腺苷(ATP),生物发光,发光计,快速微生物学,相对光单元(RLU),幼虫消毒。________________________________________________________________________________________ 1 Biocon Bristol-Myers Squibb R&D Center, 2 Syngene International Limited Correspondence Shakthi Devan R.K Syngene International Limited Biocon Park, # 2 & 3 Jigani Link Road, Bommasandra IV phase, Bangalore - 560 099, India.e邮件:shakthi.devanrk@syngeneintl.com引用:Sakthi Devan RK等,ATP生物发光检测系统作为互补方法在Vivarium In Vivarium:五年状态报告(2024),JLAS,7(2)PP 1-1-11-11-11-1-11-11-11-1-11-1-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-11-111 _________________________________________________________________________________________________________________________________________________________-03-03-2024接受05-03-2024
对于霉菌,任何低于 100 CFU/m 3 的值都被视为可接受的生存环境。任何在 100-500 CFU/m 3 之间的值都值得对致病真菌进行调查。超过 500 CFU/m 3 的值是不可接受的,建议在短期内进行补救。对于细菌,任何低于 500 CFU/m 3 的值都被视为可接受的生存环境,但一旦值增加到 4,000 CFU/m 3 左右,它就变得不适合生存。在所采集的地毯和硬木样本中,RLU 均呈肯定的正值。这意味着存在 ATP,其原因可能是微生物。进行了进一步的测试以测量霉菌(在 MEA 平板上)和细菌(在 TSA 平板上)的菌落形成单位。我们发现地毯中的微生物活性与空气中可培养微生物之间存在弱正相关性 (r = 0.161)(但统计上并不显著;p = 0.512),这表明地毯灰尘可能是空气中微生物的来源,而硬木则不同,硬木的 RLU 水平与菌落形成单位没有显示出任何正相关趋势(r = -0.027;p = 0.908)。这一观察结果表明灰尘与空气中微生物之间的关系很复杂。
目的:为现有和/或新联排别墅住宅区提供发展机会,并提高其吸引力和质量。允许的用途:单户独立住宅和联排别墅住宅。就此用途限制而言,联排别墅住宅是指与其他联排别墅住宅在同一地点排列的住宅,其中联排别墅住宅之间不相互上下,且每个单元都有自己的出入口。密度限制:每英亩 30 个住宅单元。强度限制:强度可能受到城市委员会以立法身份确定的退让、高度、容积率和/或其他限制的限制,这些限制可以实现此土地使用类别的目的并以其他方式实施补充公共政策。但是,在任何情况下,基本强度不得超过容积率 0.7。政策 RLU 1.1.3 FISHER ISLAND 低密度规划住宅 (RM- PRD)
在每个采样日(第1、2、3、5和7天),除了描述的标准测定程序外,还准备了确认板,以确认每个目标微生物的生长,通过将每种产物的环将每种产物的循环连接到适当的琼脂培养基上,然后在正确的温度下孵育。参考方法平台仅在第15天后根据欧盟指令进行。将候选方法的结果与ISO 4833-1:2013进行了比较。也为每个矩阵执行了一种特定的第二个参考方法,如表1所示。阈值RLU值(thr。rlus)在左侧的第三列中提供。表1:测试的所有基质和生物的接种摘要(每个基质,条件,重复和参考方法在矩阵研究中评估)。
缩写ACC,腺样囊性癌;芯片,染色质免疫沉淀; CHIP-SEQ,染色质免疫沉淀测序; dab,二氨基苯甲胺; dox,多西环素; EV,空矢量; FDR,错误发现率; GFP,绿色荧光蛋白;去,基因本体论; GSEA,基因集富集分析; HEGF,人类表皮生长因子; Mac,基于模型的芯片序列分析; MBS,MYB绑定站点; NES,归一化富集评分; NSG,正常的唾液腺; p adj,p值调整; PDX,患者衍生的异种移植物; penstrep,青霉素 - 链霉素; RLU,相对光单元; RMA,强大的多阵列平均值; RNA-seq,RNA测序; RT-QPCR,实时定量PCR; siRNA,小干扰RNA; TMA,组织微阵列; TSS,转录开始站点;谁,世界卫生组织; XPDX,Xenostart患者衍生的异种移植物。
图 1 Zymospetoria tritici 的各种效应物持续抑制 flg22 诱导的活性氧 (ROS) 爆发。候选效应物在本氏烟中用农杆菌瞬时表达。每片叶子的一半表达阴性对照 (sHF),另一半表达效应物。渗入后 72 小时,用 flg22 处理叶子每一侧的叶盘。通过将表达效应物的叶盘的总发光度与阴性对照 (sHF) 进行比较,测量每次 ROS 爆发测定中所有叶盘的平均总相对发光 (RLU)。单独的实验进行了五次,每个图中有五个数据点表示。对于 Zt_2_242,有一个不符合要求的数据点。为了确认这是一个异常值,又进行了三次重复(即总共八个数据点)。与 sHF 对照相比,五种效应物被鉴定为 flg22 诱导的 ROS 爆发的显著抑制剂(Wilcoxon 检验:* p < 0.05,** p < 0.01)。
图1创建合成cAMP响应元件结合蛋白(CREB)响应启动子。(a)腺苷信号传导的描述。腺苷(红色球)结合腺苷受体A2AR/A2BR,该腺苷受体动员相关的G蛋白(绿色)激活腺苷酸环化酶(橙色受体),并将ATP转化为3'5'- 5'-循环腺苷单磷酸腺苷(Camp)。另外,福斯科蛋白(橙色球)可以直接激活腺苷循环酶。CAMP结合蛋白激酶A(PKA)与磷酸化的CREB,该CREB结合了Plindromic DNA基序“ TGACGTCA”,激活了基因表达。(b)启动子设计和筛选示意图。cAMP响应元件基序(CRE,突出显示的黄色)被克隆在3倍重复中,两侧是鸟嘌呤“ G”(带下划线),六个散布的填充核苷酸(N)。3x Cres(灰色正方形)放在核心启动子(蓝色箭头)上游的1-6个重复中。用高斯荧光素酶(GLUC)或绿色荧光蛋白(EGFP)定量启动子活性。(c,d)HEK293T细胞在96个井板中用指示的构建体(x轴)反向转染。转染后48小时,用车辆(DMSO,浅蓝色条)或20μm福斯科林(FSK,深蓝色条)将细胞介质更改为培养基。八个小时后,对培养基进行了采样并测试了GLUC活性(RLU)。条表示n = 3实验重复的平均值,误差线代表标准误差(SEM)。**通过方差分析(ANOVA)Tukey检验,与所有其他样本相比,表示P <0.01。(E,F)流式细胞仪启动子诱导。HEK293T细胞用96个井板中的指定构建体(x轴)反向转染。转染后48小时,细胞培养基被更改为未处理的培养基(浅蓝色条),或补充了0.750 m m m腺苷(ADO,深蓝色条)的培养基。八个小时后,将细胞胰蛋白酶胰蛋白酶进行胰蛋白酶,并将其重悬于FACS缓冲液中以进行流式细胞仪。y轴表示正向散射(FSC)单元的EGFP中位荧光强度。条代表n = 3实验重复的平均值,误差线代表SEM。(g)启动子对腺苷的剂量反应性。HEK293T细胞在96个井板上反向转染,并在传说中指示的构造,然后培养48小时。然后更改培养基以添加不同的腺苷浓度,在8小时后进行采样,并测试了GLUC活性(RLU)。**通过12倍-CRE_YB的ANOVA TUKEY测试代表P <0.01,与1 m m的所有其他样品相比。每个点表示n = 3实验重复的平均值,误差线为SEM。
访问微生物学是一个开放的研究平台。可以通过本文的在线版本找到预印刷,同行评审报告和编辑决策。2023年8月29日收到; 2024年5月14日接受;于2024年7月4日发布作者隶属关系:1个生物端里控制Associates,Inc。,PO Box 3659,普林斯顿,NJ 08540-3659,美国; 2 Luminultra Technologies Ltd,皇家路819号,B楼建筑物,弗雷德里克顿,NB E3G 6M1,加拿大。*通信:Frederick J. Passman,PassCapt@live。com关键字:ATP;生物负责;柴油机;燃料; qpcr。缩写:AEC,腺苷酸能电荷;方差分析,变异分析; ATP,三磷酸腺苷; [CATP],细胞ATP浓度; CN,C碳; N-分子中的碳原子数量;简历,方差系数; GC,基因副本; LOD,检测极限; OTU,运营分类单元; PCR,聚合酶链反应; QPCR,定量PCR; RLU,相对光单元; [TATP],总ATP浓度; TF,全真菌; TP,原核生物。本文的在线版本可以使用五个补充表。000695.V4©2024作者