XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemT7
强大的富集技术揭示了高度活跃的CRIS PR适应蛋白
通过CRISPR – CAS系统进行的自然原核防御需要在称为适应的过程中将间隔者整合到CRISPR are中。为了搜索具有增强能力的适应蛋白，我们建立了一个永久性的DNA PAC Kaging和Transing（P EDP AT）系统，该系统使用T7 pha ge的菌株将pha ge to packa ge质粒构成，然后将其转移并杀死宿主，然后使用T7噬菌体的不同应变来重复该周期。我们使用PED-PAT来识别更好的适应蛋白 - – Cas1和cas2 - 通过富集具有更高适应性效率的突变体。我们识别出在体内增强的10倍增强的cas1蛋白。在体外，一个突变体具有较高的积分和DNA结合活性，与野生型CAS1相比，另一个突变体具有较高的分解活性。最后，我们结婚说，他们选择的特定座位可降低原始图案。在技术上使用的P EDP或型号屏幕，需要有效，轻松的DNA转导。
PGBKT7 DNA-BD矢量分析证书
描述PGBKT7是一种酵母表达载体，旨在表达GAL4 DNA结合结构域（DNA-BD;氨基酸1-147）和诱饵蛋白的融合蛋白。融合蛋白来自培养基ADH1启动子的高水平表达。融合蛋白还包含一个C-MYC表位标签。为了促进体外转录/翻译，PGBKT7包括GAL4 DNA-BD和表位标签之间的T7启动子。
复制周期定时确定噬菌体对胞苷脱氨酶毒素/抗毒素细菌防御系统的敏感性
毒素 - 抗毒素（TA）系统是细菌用来调节噬菌体防御等细菌过程的普遍存在的两基因基因座。在这里，我们演示了一种新型III型TA系统AVCID的机制，并激活了对噬菌体感染的抵抗力。系统的毒素（AVCD）是一种脱氧胞苷脱氨酶，将脱氧胞苷（DC）转化为脱氧尿苷（DU），而RNA抗毒素（AVCI）抑制AVCD活性。我们已经表明，AVCD在噬菌体感染时脱氨基核苷酸脱氨基核苷酸，但是激活AVCD的分子机械词是未知的。在这里我们表明，AVCD的激活是由噬菌体诱导的宿主转录抑制，导致不稳定AVCI的降解。AVCD激活和核苷酸耗竭不仅减少噬菌体复制，而且还增加了缺陷的噬菌体形成。令人惊讶的是，AVCID不抑制的T7等噬菌体的感染也导致AVCI RNA抗毒素降解和AVCD激活，这表明AVCI的耗竭不足以赋予对某些噬菌体的保护。相反，我们的结果支持像T5这样较长复制周期的噬菌体对AVCID介导的保护敏感，而像T7这样的复制周期较短的噬菌体具有抗性。
合成 RNA 寡核苷酸的稳定性测试
摘要 在各种储存条件下测试了三种合成 RNA 寡核苷酸的功能，以模拟运输过程中可能遇到的次优温度。通过标准 T7 内切酶 I (T7EI) 错配检测分析中的 CRISPR-Cas9 基因编辑来测量寡核苷酸的功能。虽然建议在推荐温度 (-20°C) 下储存干燥的 RNA，但所有测试条件均不会对寡核苷酸诱导基因编辑的能力产生不利影响。
建立科罗拉多tick壁虱发烧病毒的反向遗传学系统
具有12个分割的双链RNA基因组的Colorado Tick热病毒（CTFV）是一种致病性arbovirus，可引起人类严重疾病。然而，在分析复制机制和致病性的分析中几乎没有取得进展。这种病毒学约束是由于缺乏CTFV的反向遗传学系统。因此，我们旨在建立系统。最初，在各种细胞系中研究了CTFV复制的功效。CTFV在许多来自不同宿主和器官的细胞类型中生长。随后，用编码编码12个CTFV基因段中每个链的质粒，编码所有CTFV蛋白的表达质粒和vercinia vercinia病毒RNA-RNA粘贴酶转染了稳定表达T7 RNA聚酶的BHK-T7细胞。转染后，将细胞与Vero或HeLa细胞共培养。使用该系统，我们营救了带有肽标记的病毒蛋白的单种植体和重组病毒。此外，还建立了使用表达T7 RNA聚合酶的Expi293F细胞的改进系统，从而使重组报告基因CTFV的产生。总而言之，这些用于CTFV的反向遗传学系统将极大地归因于了解病毒复制机制，发病机理和传染性，最终促进了有理处理和候选疫苗的发展。
项目绩效草案和交通网络草案
• 为项目以外的补充战略提供资金，以推进网络与票价、地图和路线导航的整合，改善关键节点的时间安排，并为现有和新客户提供安全保障。为清晰起见，交通网络草案地图整合了由战略 T5、T6 和 T7 提议资助的多式联运投资，例如由拥堵收费资助的交通服务、沿桥梁走廊的前向公交线路、沿 SR-37 的新快速公交服务，以及所需的 PDA 频率提升投资。
早期蛋白质 - 卡路里营养不良对免疫反应的影响
需要清理几个问题，因此，在我们知道渗透性低论是否含有水之前。Blumberg et a/。可能表明膜损伤只是堕胎感染的部分解释，或者它们可能意味着TP的泄漏是在野生型雄性感染期间遭受的膜损伤总量不足的测定不足。区分这两种选择的难度的一部分是，我们不知道PIF突变体是否真正定义了两个基因，或者PIFA-B+突变体是否仅包含一个残废的PIF基因。jn添加，当我们知道在PIF A -B +男性中是否会影响RNA合成是否受到野生型男性的影响，以及是否在野生型男性中受到RNA合成的影响，以及是否在野生型男性中受到影响，以及是否在野生型雄性中以及PIF A -B +男性在感染后仍然健康。成功的病毒感染代表了病毒与其宿主之间非常仔细的平衡关系，在这种情况下，该病毒与宿主进行了Amuck。似乎有一个T7基因在雄性大肠杆菌中表达时会导致渗透率变化，并且可能最终会直接或间接参与观察到的宏观合成和对核糖的损害的瘫痪。尤其是由于细胞媒介的暗示性，发现该噬菌体基因在雌性细胞的T7感染过程中的正常作用将很有趣。
新英格兰生物实验室分析证书
产品名称：T7 DNA 聚合酶（未修饰） 产品编号：M0274L 浓度：10,000 U/ml 单位定义：一个单位定义为在 37°C 下 30 分钟内将 10 nmoles dNTP 掺入酸不溶性物质的酶量。 包装批号：10272282 有效期：08/2026 储存温度：-20°C 储存条件：50 mM KPO4、1 mM DTT、0.1 mM EDTA、50% 甘油，（pH 7.0 @ 25°C） 规格版本：PS-M0274S/L v1.0
新英格兰生物实验室分析证书
产品名称：T7 DNA 聚合酶（未修饰） 产品编号：M0274L 浓度：10,000 U/ml 单位定义：一个单位定义为在 37°C 下 30 分钟内将 10 nmoles dNTP 掺入酸不溶性物质的酶量。 包装批号：10272282 有效期：08/2026 储存温度：-20°C 储存条件：50 mM KPO4、1 mM DTT、0.1 mM EDTA、50% 甘油，（pH 7.0 @ 25°C） 规格版本：PS-M0274S/L v1.0