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南方 & 北方印迹
南方印迹和北方印迹都是将核酸转移到膜上的分子生物学技术，随后通过杂交程序检测特定的核酸序列。南方印迹用于识别特定的 DNA 序列，例如找出生物体中存在多少个特定基因的拷贝，而北方印迹用于比较不同生物体之间的 mRNA 池。由于 RNAseq、微阵列和 RT-PCR 现在是分析物种间 mRNA 池的常用方法，有时也更灵敏，因此北方印迹现在不太常用。另一方面，南方印迹仍然是一种非常流行的方法，因为与 PCR 相比，它还可用于识别直系同源或旁系同源基因、外来基因的部分插入或基因组内特定基因的拷贝数，因为只需要知道基因的基本序列，而不需要知道特定的引物结合位点。由于如今很少进行北方印迹实验，因此本信息手册将主要关注南方印迹实验。
蛋白质印迹信号的半定量分析
该协议正在从Bio-Rad的手册中创建用于分析软件Imagelab的调整组件。使用此处描述的协议分析的数据出现在以下出版物中：Zeitler AF，Gerrer KH，Haas R，Jiménez-Soto LF。使用无污渍技术在感染测定中优化了半定量印迹分析。J微生物虫。2016年7月; 126：38-41。 doi：10.1016/j.mimet.2016.04.016。EPUB 2016年5月3日。PMID：27150675。Jiménez-Soto LF，HaasR。幽门螺杆菌的CAGA毒素：大量产量，但量相对较低。SciRep。20163月17日; 6：23227。 doi：10.1038/srep23227。 PubMed PMID：26983895; PubMed Central PMCID：PMC4794710。 和标题的“宿主细胞对CAGA易位的抗性”与幽门螺杆菌一样可变。 Zeitler等人2017年在《事务杂志》中接受。SciRep。20163月17日; 6：23227。 doi：10.1038/srep23227。PubMed PMID：26983895; PubMed Central PMCID：PMC4794710。和标题的“宿主细胞对CAGA易位的抗性”与幽门螺杆菌一样可变。Zeitler等人2017年在《事务杂志》中接受。
（A-D）图1B中使用的样品的蛋白质印迹分析。 （a）控制细胞，空N端
PPHLN1_222f: atccgtaa GGATCC ACC atg TCAAAGGTGTTAGACAAACCCAGT PPHLN1_265f: atccgtaa GGATCC ACC atg GGcTCCACAGCACCATTGTTTACT PPHLN1_292F: atccgtaa GGATCC ACC atg ATTCACTCCTCTCTAAAG PPHLN1_304F：ATCCGTAC AC AC ATG AAAAAACAAGATTGAATTTTACGGGTTTTTTTTTTAC PPHLN1_127R：tagattat pphln1_147r：agtatagt gcggccgc agaatcctttcggccaaggt pphln1_147tgar：agtatagt gcggccgc tca agaatcccgc tca agaatccttttttttttttttttttcggcaggcaagggt pphln1_222r pphln1_222tgar: gatagt gcgccgccgccgc ttgaaaactgaacctgaacct pphln1_291r: tatagt gcgccgcgc atcttttcgggggggtgarttgggc ATCTTCAAATAATTCTATCCCATGTGTTG PPHLN1_304r: agtatagt GCGGCCGC TTTTGATGCTATTGCCTTGCTA PPHLN1_304TGAr: agtatagt GCGGCCGC tca TTTTGATGCTATTGCCTTGCTAC PPHLN1_LLIf: gatgtgtgtgaaatggttgaaaatcagCagaaagaaagaaagttttttttggaggggggggggggggggggate _llir：gattttttttttttttttttttttttcccaccacktc tphln156 aaaggctccccaaatttgaagttatcatcatcatcaatcaatcaatcaatcaatcaatcaatcaatcaatcaatcaatcaattattttttttcacaca
DIN IN ISO 15189 和 DIN EN ISO/IEC 17025 OE
血清、EDTA 血浆 Western blot SDS-PAGE 和 Western blot/ 版本 003，Western blot - 检测抗炭疽杆菌和相关炭疽病原体的抗体：SDS-PAGE 和印迹 (第 1 部分)/ 版本 004，Western blot - 检测抗炭疽杆菌和相关炭疽病原体的抗体：免疫反应 (第 2 部分)/ 版本 006
天蓝色影像系统
图 5. 使用 AzureRed 和化学发光 Western Blot 同时检测总蛋白。通过 SDS-PAGE 分离 2 倍连续稀释的 HeLa 裂解物并转移到 PVDF 膜上。半干转移完成后，用 AzureRed 总蛋白染料对膜进行染色。然后用 Azure 化学发光印迹封闭缓冲液封闭印迹，然后与小鼠抗 GAPDH 孵育。用 Azure 印迹洗涤缓冲液洗涤印迹 3 次，然后用 Azure 山羊抗小鼠 HRP 二抗孵育。用 Radiance ECL 底物检测化学发光信号。底物孵育后，对印迹进行成像以产生总蛋白染色和 GAPDH 蛋白的叠加。AzureRed 显示为绿色，GAPDH 显示为灰色。
补充材料
图S1。 GSK3β与PRR11相互作用，并影响PRR11降解。 （a）分析GSK3β肽通过质谱法与PRR11蛋白相互作用的能力。 （b）用FLAG-GSK3β和HA-PRR11质粒转染了293T细胞，HA-PRR11和FLAG-GSK3β的Western blot分析在用HA和FLAG抗体分析后进行。 （c）IP分析用针对GSK3β（TOP）和PRR11（底部）的抗体分析IP分析后，Caki-1细胞中PRR11和GSK3β的蛋白质印迹分析。 （d）IP分析后，ACHN细胞中GSK3β的Western印迹分析，抗体抗体对PRR11。 （E）GSK3β在RCC细胞中沉默或过表达，通过QRT-PCR分析验证了GSK3β和PRR11的转录水平（n = 3个生物学独立实验）。 （F-G）RCC细胞用FLAG-GSK3β或SIGSK3β转染，并通过Western Blot分析验证PRR11蛋白表达。 （h）在暴露于DMSO或CHIR-99021（10μM）处理的ACHN细胞后，在指定的持续时间内，对PRR11（TOP）进行了蛋白质印迹分析。 PRR11半衰期的定量（底部，n = 3个生物学独立实验）。 （i）转染后HA-PRR11的蛋白质印迹分析图S1。GSK3β与PRR11相互作用，并影响PRR11降解。（a）分析GSK3β肽通过质谱法与PRR11蛋白相互作用的能力。（b）用FLAG-GSK3β和HA-PRR11质粒转染了293T细胞，HA-PRR11和FLAG-GSK3β的Western blot分析在用HA和FLAG抗体分析后进行。（c）IP分析用针对GSK3β（TOP）和PRR11（底部）的抗体分析IP分析后，Caki-1细胞中PRR11和GSK3β的蛋白质印迹分析。（d）IP分析后，ACHN细胞中GSK3β的Western印迹分析，抗体抗体对PRR11。（E）GSK3β在RCC细胞中沉默或过表达，通过QRT-PCR分析验证了GSK3β和PRR11的转录水平（n = 3个生物学独立实验）。（F-G）RCC细胞用FLAG-GSK3β或SIGSK3β转染，并通过Western Blot分析验证PRR11蛋白表达。（h）在暴露于DMSO或CHIR-99021（10μM）处理的ACHN细胞后，在指定的持续时间内，对PRR11（TOP）进行了蛋白质印迹分析。PRR11半衰期的定量（底部，n = 3个生物学独立实验）。（i）转染后HA-PRR11的蛋白质印迹分析
Guide-it CRISPR/Cas9 基因编辑
◀ Cas9多克隆抗体检测灵敏度（Western blot）(泳道3: 0.15 ng, 4: 0.30 ng, 5: 0.625 ng, 6: 1.25 ng, 7: 2.5 ng, 8: 5.0 ng, 9: 10.0 ng, 10: 20.0 ng)