XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search Systemblot
开发HIV疫苗的mRNA平台开发HIV疫苗的mRNA平台
• Trimer design • Timer expression • Timer purification- chromatography • Timer characterisation • Native PAGE and Western blot • Size distribution- DLS • Trimer stability- DSC • Ab binding-BLI Octet • Conformation- NSEM • Trimer design • Timer expression • Timer purification- chromatography • Trimer characterisation
Cas9 切口酶介导的多个疾病位点上的 CAG/CTG 重复序列收缩
图 1. Cas9D10A 切口酶诱导 HD 和 DM1 iPSC 衍生细胞收缩。A) 顶部：用 S100β 和 DAPI 染色的 HD iPSC 衍生星形胶质细胞的代表性共聚焦图像。底部：实验时间线。B) 代表性小池 PCR 印迹显示 HD iPSC 衍生星形胶质细胞的收缩，这些星形胶质细胞仅用 Cas9D10A 转导，或者用 Cas9D10A 切口酶和 sgCTG 转导 6 周。C) 对 HD iPSC 衍生星形胶质细胞的小池 PCR 印迹进行量化。D) 顶部：用 β-Tubulin III 和 DAPI 染色的 HD iPSC 衍生皮质神经元的代表性共聚焦图像。底部：实验时间线。 E) 代表性小池 PCR 印迹显示 HD iPSC 衍生的皮质神经元收缩，这些神经元仅用 Cas9D10A 转导或用 Cas9D10A 和 sgCTG 转导 6 周。F) 对 HD iPSC 衍生的皮质神经元的小池 PCR 印迹进行量化。G) 顶部：用 β-Tubulin III 和 DAPI 染色的 DM1 iPSC 衍生的皮质神经元的代表性共聚焦图像。底部：实验时间线。H) 代表性小池 PCR 印迹显示 HD iPSC 衍生的皮质神经元收缩
ATP1A1是黑色素瘤治疗的有前途的新靶标，其生理配体Bufalin可以抑制其恢复靶向治疗疗法
摘要尽管在治疗转移性黑色素瘤方面取得了进步，但许多患者对靶向疗法表现出抗性。我们的研究重点是ATP1A1，这是一种与癌症发展相关的钠泵亚基。我们旨在评估黑色素瘤患者的ATP1A1预后价值，并检查其配体Bufalin，体外和体内黑色素瘤细胞系的影响。高ATP1A1表达（IHC）与黑色素瘤患者的总体存活率降低相关。 对BRAF抑制剂的抗性与患者活检（IHC，QPCR）和细胞系（Western blot，QPCR）的ATP1A1水平升高有关。 此外，基于癌症基因组图集（TCGA）数据库和Verfaillie增殖基因签名分析的数据，高的ATP1A1 mRNA表达与分化/色素沉着标记正相关。 bufalin在小窝（接近连接测定法）中特异性靶向ATP1A1，并影响SRC磷酸化（Western blot），从而破坏了多个信号通路（磷酸激酶阵列）。 在体外，Bufalin在ATP1A1（siRNA实验）上作用于ATP1A1（siRNA实验），并在体内使用裸小鼠异种移植模型通过连续的Bufalin通过渗透泵递送，从而诱导黑色素瘤细胞系凋亡。 总而言之，我们的研究表明，ATP1A1可以作为患者生存的预后标志物，也可以作为对BRAF抑制剂治疗的反应的预性标记。 通过靶向ATP1A1，Bufalin抑制细胞增殖，体外诱导凋亡，并有效抑制小鼠的肿瘤发育。高ATP1A1表达（IHC）与黑色素瘤患者的总体存活率降低相关。对BRAF抑制剂的抗性与患者活检（IHC，QPCR）和细胞系（Western blot，QPCR）的ATP1A1水平升高有关。此外，基于癌症基因组图集（TCGA）数据库和Verfaillie增殖基因签名分析的数据，高的ATP1A1 mRNA表达与分化/色素沉着标记正相关。bufalin在小窝（接近连接测定法）中特异性靶向ATP1A1，并影响SRC磷酸化（Western blot），从而破坏了多个信号通路（磷酸激酶阵列）。在体外，Bufalin在ATP1A1（siRNA实验）上作用于ATP1A1（siRNA实验），并在体内使用裸小鼠异种移植模型通过连续的Bufalin通过渗透泵递送，从而诱导黑色素瘤细胞系凋亡。总而言之，我们的研究表明，ATP1A1可以作为患者生存的预后标志物，也可以作为对BRAF抑制剂治疗的反应的预性标记。通过靶向ATP1A1，Bufalin抑制细胞增殖，体外诱导凋亡，并有效抑制小鼠的肿瘤发育。因此，我们的发现强烈支持ATP1A1作为一个有前途的治疗靶标，Bufalin是破坏其肿瘤促进活性的潜在药物。
24-004-在家重新思考杂草管理
相对较少的研究研究了除草剂对传粉媒介的直接影响，因此不幸的是，我们不知道大多数除草剂可能对传粉媒介物种产生的影响。但是，研究发现一些常见的除草剂会造成伤害。特别是，通常使用的除草剂草甘膦和包含它的产品已被发现：•干扰蜜蜂的导航能力（Balbuena等人2015）并学习与食物来源相关的信号（MengoniGoñalons和Farina，2018年）。 这可能会影响蜜蜂有效觅食的能力。 •更改蜜蜂的肠道微生物组（Motta等人 2018，Dai等。 2018，Blot等。 2019），这可能会增加对有害疾病的敏感性。 •巨型燕尾，spicebush燕尾，黑色燕尾和君主蝴蝶卵暴露于草甘膦的可能性要小得多，孵化的可能性要小得多。 Spicebush燕尾鸡的卵损失最大，只有6％的裸露卵孵化，而100％的未暴露卵（Albanese 2019）。 可能会在经过处理的区域内及其周围发生巨大的燕尾卵损失。2015）并学习与食物来源相关的信号（MengoniGoñalons和Farina，2018年）。这可能会影响蜜蜂有效觅食的能力。•更改蜜蜂的肠道微生物组（Motta等人2018，Dai等。 2018，Blot等。 2019），这可能会增加对有害疾病的敏感性。 •巨型燕尾，spicebush燕尾，黑色燕尾和君主蝴蝶卵暴露于草甘膦的可能性要小得多，孵化的可能性要小得多。 Spicebush燕尾鸡的卵损失最大，只有6％的裸露卵孵化，而100％的未暴露卵（Albanese 2019）。 可能会在经过处理的区域内及其周围发生巨大的燕尾卵损失。2018，Dai等。2018，Blot等。 2019），这可能会增加对有害疾病的敏感性。 •巨型燕尾，spicebush燕尾，黑色燕尾和君主蝴蝶卵暴露于草甘膦的可能性要小得多，孵化的可能性要小得多。 Spicebush燕尾鸡的卵损失最大，只有6％的裸露卵孵化，而100％的未暴露卵（Albanese 2019）。 可能会在经过处理的区域内及其周围发生巨大的燕尾卵损失。2018，Blot等。2019），这可能会增加对有害疾病的敏感性。•巨型燕尾，spicebush燕尾，黑色燕尾和君主蝴蝶卵暴露于草甘膦的可能性要小得多，孵化的可能性要小得多。Spicebush燕尾鸡的卵损失最大，只有6％的裸露卵孵化，而100％的未暴露卵（Albanese 2019）。可能会在经过处理的区域内及其周围发生巨大的燕尾卵损失。
纳尔西卡汀通过耐他莫昔芬耐药性乳腺癌细胞中的不同机制靶向STAT3
使用ROS清除剂，10 mM NAC持续1小时，随后进行或不使用NAR的处理，并收集细胞进行蛋白质印迹分析。 用NP-40裂解缓冲液，核和细胞质蛋白用核和细胞质蛋白提取试剂盒（Beyotime，Haimen，中国）提取的NP-40裂解缓冲液，核和细胞质蛋白提取总细胞蛋白。 使用BCA蛋白质试剂盒（Beyotime，Haimen，Chine）确定蛋白质浓度。 用于蛋白质印迹分析，将样品通过SDS-PAGE分离，并转移到PVDF膜上。 用5％的非脂肪干乳封闭后，将膜与制造商建议在4°C的制造商建议的稀释液一起孵育过夜。 在建议的稀释液中加入了山羊抗兔或驴抗小鼠二抗（Irdye 800，Li-Cor，Li-Cor，Lincoln，NE），并且在室温下孵育持续1小时。使用ROS清除剂，10 mM NAC持续1小时，随后进行或不使用NAR的处理，并收集细胞进行蛋白质印迹分析。用NP-40裂解缓冲液，核和细胞质蛋白用核和细胞质蛋白提取试剂盒（Beyotime，Haimen，中国）提取的NP-40裂解缓冲液，核和细胞质蛋白提取总细胞蛋白。使用BCA蛋白质试剂盒（Beyotime，Haimen，Chine）确定蛋白质浓度。 用于蛋白质印迹分析，将样品通过SDS-PAGE分离，并转移到PVDF膜上。 用5％的非脂肪干乳封闭后，将膜与制造商建议在4°C的制造商建议的稀释液一起孵育过夜。 在建议的稀释液中加入了山羊抗兔或驴抗小鼠二抗（Irdye 800，Li-Cor，Li-Cor，Lincoln，NE），并且在室温下孵育持续1小时。使用BCA蛋白质试剂盒（Beyotime，Haimen，Chine）确定蛋白质浓度。用于蛋白质印迹分析，将样品通过SDS-PAGE分离，并转移到PVDF膜上。用5％的非脂肪干乳封闭后，将膜与制造商建议在4°C的制造商建议的稀释液一起孵育过夜。在建议的稀释液中加入了山羊抗兔或驴抗小鼠二抗（Irdye 800，Li-Cor，Li-Cor，Lincoln，NE），并且在室温下孵育持续1小时。
datos del contrato
- 生物化学毕业生 - 在以下实验技术中证明的经验：在使用细胞作物（尤其是棕色脂肪细胞），核酸纯化和蛋白质的工作中，通过数量PCR，Western -Blot，荧光显微镜，流式细胞术，流式抑制剂，植物学动物和转染技术来确定mRNA水平。 div>- 培训课程使用动物实验类别A，B和C。-编程语言R的基础知识R用于分析和表示数据。将评估在对缺氧和/或代谢以及脂肪组织的功能的反应领域进行研究工作。 div>位置1
β-核蛋白阻塞肽
Application key: E- ELISA, WB- Western blot, IH- Immunohistochemistry, IF- Immunofluorescence, FC- Flow cytometry, IC- Immunocytochemistry, IP- Immunoprecipitation, ChIP- Chromatin Immunoprecipitation, EMSA- Electrophoretic Mobility Shift Assay, BL- Blocking, SE- Sandwich ELISA, CBE- Cell-based ELISA，RNAi-RNA干扰物种反应性关键：H-人，M-小鼠，r-大鼠，B-牛，C-鸡，d-Dog，G-Goat，G-Goat，Mk-Monkey，P-Pig，P- Pig，rb-Rabbit，S羊，Z- Zebrafish，Zebrafish
体外和计算机研究
进行了本研究，以研究c-大环亚钠肽（C-ANP 4-23）对人脂肪衍生的干细胞在10天内分化为脂肪细胞的人（1 m m m m）。在存在或不存在C-ANP 4-23的情况下，分别通过QRT-PCR和Western印迹确定了细胞内cAMP，CGMP和蛋白激酶A水平的水平，分别通过QRT-PCR和Western印迹确定蛋白质表达。还确定了脂解和葡萄糖摄取的水平。c-ANP 4-23治疗显着增加了细胞内cAMP水平和葡萄糖转运蛋白4型（GLUT4）和蛋白激酶的基因表达，AMP激活，α1催化亚基（AMPK）。Western印迹显示GLUT4和磷光体A水平的显着增加。重要的是，腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536废除了这些影响。此外，C-ANP 4-23增加了葡萄糖摄取2倍。我们的结果表明，C-ANP 4-23增强了葡萄糖代谢，并可能有助于开发基于肽的新代谢疾病疗法。©2016 Elsevier Ireland Ltd.保留所有权利。