图S1。 GSK3β与PRR11相互作用,并影响PRR11降解。 (a)分析GSK3β肽通过质谱法与PRR11蛋白相互作用的能力。 (b)用FLAG-GSK3β和HA-PRR11质粒转染了293T细胞,HA-PRR11和FLAG-GSK3β的Western blot分析在用HA和FLAG抗体分析后进行。 (c)IP分析用针对GSK3β(TOP)和PRR11(底部)的抗体分析IP分析后,Caki-1细胞中PRR11和GSK3β的蛋白质印迹分析。 (d)IP分析后,ACHN细胞中GSK3β的Western印迹分析,抗体抗体对PRR11。 (E)GSK3β在RCC细胞中沉默或过表达,通过QRT-PCR分析验证了GSK3β和PRR11的转录水平(n = 3个生物学独立实验)。 (F-G)RCC细胞用FLAG-GSK3β或SIGSK3β转染,并通过Western Blot分析验证PRR11蛋白表达。 (h)在暴露于DMSO或CHIR-99021(10μM)处理的ACHN细胞后,在指定的持续时间内,对PRR11(TOP)进行了蛋白质印迹分析。 PRR11半衰期的定量(底部,n = 3个生物学独立实验)。 (i)转染后HA-PRR11的蛋白质印迹分析图S1。GSK3β与PRR11相互作用,并影响PRR11降解。(a)分析GSK3β肽通过质谱法与PRR11蛋白相互作用的能力。(b)用FLAG-GSK3β和HA-PRR11质粒转染了293T细胞,HA-PRR11和FLAG-GSK3β的Western blot分析在用HA和FLAG抗体分析后进行。(c)IP分析用针对GSK3β(TOP)和PRR11(底部)的抗体分析IP分析后,Caki-1细胞中PRR11和GSK3β的蛋白质印迹分析。(d)IP分析后,ACHN细胞中GSK3β的Western印迹分析,抗体抗体对PRR11。(E)GSK3β在RCC细胞中沉默或过表达,通过QRT-PCR分析验证了GSK3β和PRR11的转录水平(n = 3个生物学独立实验)。(F-G)RCC细胞用FLAG-GSK3β或SIGSK3β转染,并通过Western Blot分析验证PRR11蛋白表达。(h)在暴露于DMSO或CHIR-99021(10μM)处理的ACHN细胞后,在指定的持续时间内,对PRR11(TOP)进行了蛋白质印迹分析。PRR11半衰期的定量(底部,n = 3个生物学独立实验)。(i)转染后HA-PRR11的蛋白质印迹分析
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