对经体校正的自体表皮移植的移植第三个成功的故事涉及一个7岁的男孩,患有laminineβ3缺乏的JEB,他接受了相当众所周知的表皮移植治疗。[3] ISO首先从4-CM2突变的男孩皮肤中学到的角质形成细胞,然后通过Gen-Addition纠正这些细胞。这意味着细胞经过了带有逆转录病毒病毒的转导过程,该病毒配备了Lamb3的野生型cDNA,因此这些自体细胞再次将野生型层粘连蛋白β3带到表达中。随后,将遗传校正的细胞生长到〜0.85 m2的表皮移植物的印象,足以移植男孩身体表面的大部分,类似于治疗
由于细胞粘附基因中的遗传变异,表皮溶解Bullosa(EB)的标志是上皮脆弱的附着。我们描述了16例在1992年至2023年之间与英国国家EB部门有关的第三级儿科医院的EB患者。患者患有喉气管狭窄的高度发病率和死亡率。变体。LAMA3编码层粘连蛋白-332的亚基,杂素外细胞外基质蛋白复合物,并通过气道上皮上皮层状系统表达。WEINEVETIGETIGETEDTHEBENEDTHEBENEDTHEBENIFETTHEBENEDTHEBENIFETHEBENIFETHEBEREDEBENIFETHEBENIFETHEBENIL-EB型野生型Lama 3在原始EB患者基底层的基层培养基中表达。eB基础细胞表现出对细胞培养底物的粘附较弱,但否则可以将其相似地扩展到非EB基础细胞。在EB基细胞中LAMA3A的体外慢病毒过表达使它们能够在空气界面培养物中进行区分,从而产生具有正常纤毛节拍频率的CILIA。 此外,转导将细胞粘附恢复到与非EB供体培养物相当的水平。 这些数据提供了组合细胞和基因治疗方法的概念验证,以治疗受喇嘛3的EB中的气道疾病。在EB基细胞中LAMA3A的体外慢病毒过表达使它们能够在空气界面培养物中进行区分,从而产生具有正常纤毛节拍频率的CILIA。此外,转导将细胞粘附恢复到与非EB供体培养物相当的水平。这些数据提供了组合细胞和基因治疗方法的概念验证,以治疗受喇嘛3的EB中的气道疾病。
连接表皮溶解Bullosa(JEB)是一种令人衰弱的遗传性皮肤疾病,由编码Lam-Inin-332,XVII型胶原蛋白(C17)的基因突变引起,并综合素6 B 4,维持模糊和表皮之间的稳定性。我们签署了患者特异性的cas9-核酸酶和基于 - 基因酶的靶向策略,用于在Col17a1的外显子52中重新构建与缺乏全长C17表达相关的共同纯合子deportion。随后对蛋白质的重新修复,糖节组成以及治疗后的DNA和mRNA结局的发散表明,基于成对的基于成对的COL17A1编辑的吉利效率,安全性,安全性和精度。几乎46%的原发性jeb角细胞表达了C17。重新构架Col17a1 tran-文字主要具有25和37-nt的缺失,占所有编辑的> 42%,编码C17蛋白质变体,可准确地定位于细胞膜。此外,与未处理的JEB细胞相比,经过校正的细胞显示出精确的细胞外120 kDa C17结构域的精确脱落,并提高了对层粘连蛋白332的粘附能力。三维(3D)皮肤等效物在表皮和真皮之间的基底膜区域内表现出C17的认可和连续沉积。我们的发现构成了第一次基于基因编辑的Col17a1突变的校正,并证明了基于Cas9 D10A Nickase比野生型CAS9 Cas9基于野生型Cas9策略在临床环境中基于基因重塑的Prox-Imal配对迹象策略的优越性。
基因组编辑的技术,能够引入DNA序列中的精确变化,有可能导致新的遗传疾病治疗方法。表皮溶解Bullosa(EB)是一组以极端皮肤脆弱性为特征的稀有遗传疾病。具有最严重的表型之一的EB(RDEB)的隐性营养不良亚型,是由Col7a1突变引起的。在这项研究中,我们报告了一种基因编辑方法,用于基于体内同源指导的修复(HDR)基因校正,该方法使用了CRISPR-CAS9系统,该系统使用核糖核蛋白(RNP)复合物与供体与adeno相关的Veral Veral Vec-Vec-vec-tors(AAVS)结合使用。我们证明了在原代rdeb ker-固有细胞中实现含有疗法的舒适突变校正频率,其中包含不同的COL7A1突变以及有效的HDR介导的HDR介导的COL7A1模量,可在健康的索有索有索有线山脉CD34 +细胞和细胞中的细胞中(MSC)。这些结果是HDR介导的基因校正的概念证明,其不同细胞类型具有RDEB的治疗潜力。
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