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光的本质或有时是显微镜的设计,在图像采集过程中引入了偏见和系统错误。取决于分析的类型,因此有必要通过产生与不同荧光团同时标记的探针和/或产生颜色交换的探针(两组交换荧光团的探针)来评估诸如色差等误差(请参阅第3.4.5节)。这比简单地对安装介质中的荧光标记的珠子进行想象更准确,因为对照和实际实验环境之间的光路相同。在基于划痕的探针的情况下,可以用不同的荧光团标记一个探针的1.2-1.7 kb片段,即在6-碎片场景和3色鱼实验中,一种碎片1和4的颜色,另一种用于片段2和5的颜色,另一种颜色再次用于片段3和6。对于寡头,可以使用与主要的荧光团标记的次级寡聚。[图1附近]
由于其高灵敏度、低毒性、良好的空间和时间分辨率、发射可调、操作简单和非侵入性,它被广泛用于成像。6 用于缺氧成像的荧光探针通常以癌症标志物为目标,特别是与缺氧相关的还原酶。在缺氧肿瘤微环境中,还原酶(如偶氮还原酶和硝基还原酶)过度表达。偶氮基团是对偶氮还原酶敏感的部分,而硝基咪唑是对硝基还原酶敏感的部分。已经开发出各种小分子荧光团用于缺氧条件成像 7 然而,纳米材料由于增强的渗透性和保留 (EPR) 效应而能够实现被动肿瘤积聚和保留。8 这促使人们研究各种用于缺氧成像的纳米材料,9 但非常适合的共价有机框架 (COF) 却被忽视了。由于其纯有机性质、结构和功能可调性、以及可用于药物输送的多孔性,COF 是细胞状况成像的有力候选者。目前仅对少数 COF 进行了生物成像研究,其中细胞成像主要利用材料固有的荧光 10,11 或依靠共轭部分的荧光实现,例如染料标记的核酸 12,13 和荧光探针。14 关于使用 COF 对任何特定细胞状况进行成像的报道更是凤毛麟角。15 在此,我们设计并表征了一种具有硝基还原酶敏感部分的 COF,用于缺氧荧光成像。我们在 b -酮烯胺化学的帮助下合成了一种荧光 COF,16 并在合成后对其进行修饰,以结合硝基咪唑,用于靶向肿瘤缺氧条件下的硝基还原酶。 2-硝基咪唑衍生物是电子缺乏的化合物,已知可作为外源性缺氧标记物,经过生物还原活化后选择性地被缺氧细胞捕获(图 S1,ESI†)。17 由此获得的硝基咪唑 COF(NI-COF)在生理条件下稳定,在中性 pH 和肿瘤组织特有的酸性 pH 水平下均表现出有用的荧光特性,发射峰位于 480 nm(l ex = 420 nm)。利用其低细胞毒性,我们将 NI-COF 用作荧光成像
1 Moe关键实验室的罕见小儿疾病和亨奇医学院,中国南部,亨奇421001,中国; luogaoming163@163.com(G.L.); RJ759076926@163.com(J.R.); ww2287194534@163.com(Q.W.); zhaoxp921@163.com(X.Z.); WEI_USC_3290BGD560@163.com(L.W.); gxuliuyuan@163.com(y.l。); hndengyan@126.com(y.d。)2中国南部大学的未来科学研究所,中国长沙410008,3匈牙省肿瘤细胞和分子病理学主要实验室,湖南湖癌症早期诊断和治疗中心,癌症研究所,癌症研究所,亨格山医学院,南部中国,汉阳421001,hengyang 421001,Instuction of Cyengy of Cyny angy of Cyny and Genytics and Genticics and Genticics and Genetics,Hengy and Genticics and Genetics and Genetics and Genetics and Genetics,HENGY and Genetics and Genetics and Genetics and Genetics and Genetics,中国南部,中国421001,中国5匈奴生物医学纳米材料和装置的主要实验室,荷兰技术大学,朱苏省,朱布412007,中国; yuesir0029@163.com *通信:2023001080@usc.edu.cn(Z.C. ) ); solisong@163.com(S.L.) †这些作者为这项工作做出了同样的贡献。2中国南部大学的未来科学研究所,中国长沙410008,3匈牙省肿瘤细胞和分子病理学主要实验室,湖南湖癌症早期诊断和治疗中心,癌症研究所,癌症研究所,亨格山医学院,南部中国,汉阳421001,hengyang 421001,Instuction of Cyengy of Cyny angy of Cyny and Genytics and Genticics and Genticics and Genetics,Hengy and Genticics and Genetics and Genetics and Genetics and Genetics,HENGY and Genetics and Genetics and Genetics and Genetics and Genetics,中国南部,中国421001,中国5匈奴生物医学纳米材料和装置的主要实验室,荷兰技术大学,朱苏省,朱布412007,中国; yuesir0029@163.com *通信:2023001080@usc.edu.cn(Z.C.); solisong@163.com(S.L.)†这些作者为这项工作做出了同样的贡献。
细胞负担会影响工程合成系统的性能。出于这个原因,人们对开发跟踪负担和改善生物技术应用的工具有很大的兴趣。荧光RNA适体是实时监测负担的极好候选者,因为他们的产量有望在转录资源上施加可忽略的负载。在这里,我们表征了从大肠杆菌中不同启动子表达的适体库的性能。我们发现适体相对性能取决于启动子和菌株,与期望相反,适体的表达会影响宿主的适应性。通过选择具有更明亮的输出且影响较低的两个适体,我们设计了一个细胞内生物传感器,能够报告工程细胞中负担响应的激活。此处开发的传感器增加了可用于减轻负担的工具的收集,并可能支持寻求改善主机性能的生物处理应用程序。
荧光纳米颗粒(NP)已证明在生物分析和生物成像中使用了吸引力。1,2与传统的分子标签相比,NP可以具有许多优势,包括高度提高亮度和增强的光稳定性。NP的另一个关键优势是,发射材料受到保护,免受使光学特性对复杂生物学环境不敏感的环境。通常,NP在生物系统中也显示出低倾向或定位的倾向。受这些潜在优势的动机,已经报道了许多不同类型的纳米颗粒。以非常一般的方式,可以将它们分为基于无机的或有机的,其中无机NP在早期就更具统治性。无机纳米颗粒中有许多变化3,4,包括众所周知的量子点(QDS)5 - 8和UpConversion NP。9,10荧光NP,其中来自有机分子和材料的吸收和发射茎包括基于分子染料(纯或嵌入在基质材料中)的NPS,11种共轭聚合物,12,13和无态碳材料(碳核心)。14,15
目前,溶酶体被描述为高级细胞器,在细胞稳态中起着关键作用,并介导了各种生理过程,例如蛋白质降解和质膜修复。1,2个证据表明,溶酶体中水解酶的异常活性与疾病的发病机理,例如储存障碍,癌症,神经退行性疾病和心脏疾病。3 - 5,其中lyso- somes中的b-乳糖苷酶(b -gal)参与了糖结合物的分解代谢,其异常水平与原发性卵巢癌的发生和进展有关,使溶酶体的糖尿病癌症成为可靠的诊断和诊断的动力学诊断。6 - 10对实时途径中溶酶体中水解酶的现场监测将为溶酶体酶在疾病进展中的详细作用提供见解,并进一步有助于早期诊断和治疗策略的发展。11 - 13
人造受体和纳米传感器设想为对家庭使用和护理诊断的激动人心的新可能性开放,因为它们可以比补充生物传感器具有化学/热能更强大,更便宜,更快的响应速度。[1-10]鼓舞人心的例子是通过SenseOnics和Glysure Ltd [11,12]开发的分子基于葡萄糖传感器[11,12],以及在OPTI Medical Inc的超分子传感器盒中使用的阳离子选择性化学传感器,用于Na +,K +,K +和Ca 2 + Senser中。[13,14]然而,水中小型亲水分子的选择性和敏感的分子识别仍然极具挑战性(图1)。[15–17]例如,旨在通过直接非共价结合基序识别神经递质多巴胺的合成粘合剂(SBS),例如,盐桥和堆叠互动(图1A)相对选择性地选择了其靶分子,但在水中的结合亲密亲密相交受到了限制。[18]近年来,基本和
摘要:败血症是一种极其危险的医疗状况,它是从人体对先前感染的反应中得出的。早期检测败血症的细菌感染可以极大地增强治疗过程,并有可能阻止败血症的发作。但是,当前的护理点(POC)传感器通常是复杂且昂贵的,或者缺乏对有效细菌检测的理想敏感性。因此,开发快速和敏感的生物传感器对于败血症诱导细菌的现场检测至关重要。在这里,我们开发了一种石墨烯氧化物CRISPR-CAS12A(GO-CRISPR)生物传感器,用于检测人血清中脓毒症的菌株。在此策略中,用氧化石墨烯(GO)将单链(ssDNA)FAM探针淬灭。目标激活的CAS12A反式分离用于降解ssDNA探针,从而使短ssDNA探针从GO中脱离并恢复荧光信号。在最佳条件下,我们采用了我们的Go-Crispr系统来检测鼠伤寒沙门氏菌(s。鼠伤寒)在人血清中的检测灵敏度低至3×10 3 CFU/mL,并且对其他竞争细菌具有良好的检测特异性。此外,Go-Crispr生物传感器对S的检测表现出极好的敏感性。尖刺的人血清中的鼠伤寒。Go-Crispr系统为检测败血症的细菌提供了较高的速度,并且有可能增强资源有限环境中细菌感染的早期检测,从而加快了患有败血症风险的患者的反应。■简介