通常通过 PCR 对淋巴肿瘤中的微小残留病 (MRD) 进行灵敏的定量分析,使用免疫球蛋白或 T 细胞受体基因重排作为靶标,并使用患者或等位基因特异性寡核苷酸 (ASO) 作为引物。自 30 年前首次描述以来,ASO-qPCR 得到了广泛的应用,尤其是在欧洲,欧洲MRD 联盟成员发表的论文提供了有关该方法执行的指南和通用反向引物的推荐序列 [1-3]。如果候选患者特异性正向引物可以将 MRD 定量到 10 −4 的水平,则可以使用它,该引物的序列是患者独有的并且是特定于患者的。一些引物可以定量到 10 −4 以下,但有些会失败 [4]。失败有时可能是由于假阳性,但原因通常不清楚。 HAT-PCR(高 A/T PCR 或高退火温度 PCR)是 qPCR 的一种最新改进,其涉及引物设计和扩增条件的改进,以提高特异性并降低 MRD 检测中假阳性结果的频率 [5]。当检测 20 μg DNA 时,它的检测限为 10 −65 。在开发 HAT-PCR 之后,研究了根据欧洲 MRD 指南使用患者特异性正向引物和推荐的反向 J 引物进行的传统 qPCR 的灵敏度。单个引物对通常可以检测到低至 10 −4 的 MRD 水平,但经常无法检测到更低的水平。PCR 可以潜在地将单个靶标扩增到检测点 [6],但靶标的扩增有时会被与基因组 DNA 同时纯化的外在物质或另一种内在扩增反应所抑制。引物二聚体扩增引起的抑制很常见,人们已对 PCR 进行了多项技术改进以尽量减少这种抑制 [ 7 , 8 ]。其他脱靶 DNA 序列的扩增反应也已被观察到 [ 9 ],但此类反应的特征不甚了解,其重要性尚不清楚。传统 qPCR 无法将 MRD 定量低于 10 −4,这被证明是由于引物与基因组 DNA 相互作用造成的。除了有报道称碎片化的基因组 DNA [ 10 ] 可能会抑制 PCR 外,基因组 DNA 在 PCR 中的作用并未引起人们的兴趣。但是,我们认为分析这种现象很重要,原因有二。首先,了解和预防它可以提高 MRD 定量的灵敏度。其次,其他 PCR 检测需要在存在基因组 DNA 的情况下灵敏地检测靶标,因此可能容易受到抑制。因此,分析抑制及其预防机制可能与许多 PCR 检测的设计相关。
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这项研究工作调查了快绿(C 37 H 34 N 2 O 10 S 3 Na 2)的潜力作为1M HCl中低碳钢腐蚀的抑制剂。使用重量法进行了研究。研究了浓度,浸入时间和温度对腐蚀速率的影响。发现腐蚀速率从3.50 x 10 -4降低至1.8 x 10 -4 g/cm 2/h,因为快绿的浓度从1 v/v增加到5%。抑制效率(IE%)因此在室温(30 O C)的24小时内从浓度范围内(1-5 v/v%)内增加到65%。随着在室温下的研究中,腐蚀速率也从2.44 x 10 -4增加到9.03 x 10 -4 g /cm 2 /h。吸附研究证实,Langmuir等温线是解释快绿色对低碳钢的吸附特征的最佳模型,其相关效率(R 2)为0.9847。与吸附,ΔG°AD相关的标准自由能计算为-25.78 kJmol -1。该值高达-20 kJmol -1,表明快速绿色分子上的碳钢表面吸附基本上是通过物理吸附。可以得出结论,抑制剂充当混合类型抑制剂,因为实验数据适合Langmuir模型,这是化学吸附的特征。关键字:腐蚀,碳钢,快绿色,吸附,物理学简介
竞争性抑制是酶学中的关键概念,对酶调节,细胞稳态和疾病发育产生了影响。由于其可逆性和浓度依赖性效应,它是生物系统中重要的调节机制。了解竞争性抑制的复杂性不仅增加了他们对酶过程的理解,而且还为药物设计和治疗方法打开了大门。新见解和应用已准备好随着研究人员对这个迷人的系统进行更深入的探索,从而使新型治疗的前景以及对酶的复杂世界及其在支持生活中的功能有了更深入的了解。
。CC-BY-NC 4.0国际许可证的永久性。是根据作者/资助者提供的预印本(未经Peer Review的认证)提供的,他已授予Biorxiv的许可证,以在2023年10月18日发布的此版本中显示此版本的版权持有人。 https://doi.org/10.1101/2023.06.05.543687 doi:Biorxiv Preprint
和舒张期(-33.1%;图 A3)与 Veh 相比。虽然 RKER-050 治疗没有显著增加射血分数(图 A4),但观察到缩短分数(图 A5,心肌收缩力指数)增加(+23.0%)的强烈趋势。这些结果证明了 RKER-050 对 LV 的直接益处
补充图 4:用 0.45 μM(JURKAT)和 0.72 μM(P12-ICHIKAWA)5Z7O 孵育 48 小时的 JURKAT 和 P12-ICHIWAKA 细胞的 DNA 含量分析。碘化丙啶 (PI) 染色的流式细胞术分析。