结果和讨论:在总共617个共培养Calli中,21(3.4%)再生芽表现出三种不同的表型:白化,嵌合和浅绿色;与野生型非转化的再生芽相比。在白化芽中,总叶绿素含量大大降低,并且在嵌合芽中显着降低。在六个CAS9基因确认的再生芽中,两种芽表现出由于插入/缺失(Indels)和ACPDS靶点位置和周围的基于替代的突变而引起的白化表型。深度扩增子测序显示两个SGRNA之间的indel频率显着,范围从1.2%到63.4%,以及53.4%的替代频率。ACPDS基因的突变产生了可检测到的白化病表型,因此确定了ACPDS基因的成功编辑。这是第一次在洋葱中成功建立了CRISPR/CAS9介导的基因组编辑方案,而ACPD基因作为一个例子。这项研究将为研究人员提供进一步的洋葱基础研究和应用研究的必要动力。
重金属污染由于其持续性,更高的毒性和顽固性而成为全球严重关注的问题。这些有毒的金属威胁着环境的稳定性和所有生物的健康。重金属还通过食用受污染的食物并对人类健康造成有毒作用,进入人类食物链。因此,必须对HMS污染的土壤进行修复,并且需要在更高的优先级上解决。使用微生物被认为是打击HMS不利影响的有前途的方法。微生物有助于恢复恶化环境的自然状况,并具有长期的环境影响。微生物修复可防止HMS的浸出和动员,并且还使HMS的提取变得简单。因此,在这种情况下,最近的技术进步允许将生物修复用作补救污染土壤的必要方法。微生物使用不同的机制,包括生物呼吸,生物蓄积,生物含量,生物转化,生物胆碱化和生物矿化,以减轻HMS的影响。因此,在此评论中,在此综述中保持有毒的HMS探讨细菌,真菌和藻类在污染土壤的生物修复中的作用。本综述还讨论了可用于提高微生物效率以补救HMS污染土壤的各种方法。它还强调了在未来的研究计划中必须解决的不同研究差距,以改善生物修复效率。
摘要 丙型肝炎病毒 (HCV) 是非甲非乙型肝炎的最重要病原体,也是慢性肝病和肝细胞癌的主要原因。研制有效的疫苗是预防感染最实用的方法,但 HCV 感染是否会在宿主体内引发保护性免疫尚不清楚。尝试用慢性感染患者的血浆在体外中和 HCV,并通过接种八只血清阴性黑猩猩来评估残留传染性。HCV 的来源是从一名患者在移植后非甲非乙型肝炎急性期获得的血浆,该血浆之前已在黑猩猩中测定过传染性。在原发性感染开始 2 年后从同一患者获得的血浆中实现了中和,但在 11 年后获得的血浆中未能实现中和,尽管两种血浆都含有针对非结构和结构(包括包膜)HCV 蛋白的抗体。对同一患者连续病毒分离株的分析表明,早在感染 2 年后,遗传分化就已显著。然而,感染 2 年后从患者身上分离出的 HCV 与从接种了急性期病毒的黑猩猩身上分离出的 HCV 具有惊人的序列相似性,这表明新毒株的祖先在 2 年前就已经存在。这一证据,加上从接受相同接种物的黑猩猩身上分离出的 HCV 的不同序列,证实了 HCV 在体内以准种的形式存在。这些结果提供了体内实验证据,表明 HCV 感染会在人类中引发中和抗体反应,但表明这种抗体是分离株特异性的。这一结果引起了人们对开发广泛反应的 HCV 疫苗的担忧。
组织Cu,Fe和Zn作为实验四甲甲基脑病的主要决定因素。生命科学, /3:897(1973)。24。Packer,L。和Jacobs,E。E。:磷酸化与线粒体呼吸链的末端段的耦合。Biochim。Biphys。 Acta,57:37 I(1962)。 25。 Patel,A。J.,Michaelson,I。 A.,Cremer,J.E。和Balazs,r。:哺乳的大脑的代谢,sucking剂的大鼠被无机铅陶醉。 J. Neurochem。,22:581(1974)。 26。 Patel,A。J.,Michaelson,I。 A.,Cremer,J。E.和Balazs,r。:年轻大鼠摄入铅的大脑中的代谢室内的变化。 J. Neurochem。,22:591(1974)。 27。 Pentschew,A。和Garro,f。:哺乳老鼠的铅瘤性脑病及其对卟啉症神经疾病的影响。 Acta Neuropathol。,6:266(1966)。 28。 Potter,V。R.,Schneider,W。C.和Liebl,G。J。:新生大鼠组织生长和分化过程中的酶变化。 Cancer Res。,5:21(1945)。 29。 Rhyne,B。C.和Goyer,R。A。:实验性铅中毒中肾脏线粒体的细胞色素含量。 EXP。 mal。 Pathol。,14:386(1971)。 30。 Sanadi,D。R.和Jacobs,E。E。:细胞色素氧化酶区域(现场ILL)的氧化磷酸化测定。 JO:38(1967)。 31。 Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。 xxi!l。Biphys。Acta,57:37 I(1962)。25。Patel,A。J.,Michaelson,I。A.,Cremer,J.E。和Balazs,r。:哺乳的大脑的代谢,sucking剂的大鼠被无机铅陶醉。 J. Neurochem。,22:581(1974)。 26。 Patel,A。J.,Michaelson,I。 A.,Cremer,J。E.和Balazs,r。:年轻大鼠摄入铅的大脑中的代谢室内的变化。 J. Neurochem。,22:591(1974)。 27。 Pentschew,A。和Garro,f。:哺乳老鼠的铅瘤性脑病及其对卟啉症神经疾病的影响。 Acta Neuropathol。,6:266(1966)。 28。 Potter,V。R.,Schneider,W。C.和Liebl,G。J。:新生大鼠组织生长和分化过程中的酶变化。 Cancer Res。,5:21(1945)。 29。 Rhyne,B。C.和Goyer,R。A。:实验性铅中毒中肾脏线粒体的细胞色素含量。 EXP。 mal。 Pathol。,14:386(1971)。 30。 Sanadi,D。R.和Jacobs,E。E。:细胞色素氧化酶区域(现场ILL)的氧化磷酸化测定。 JO:38(1967)。 31。 Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。 xxi!l。A.,Cremer,J.E。和Balazs,r。:哺乳的大脑的代谢,sucking剂的大鼠被无机铅陶醉。J.Neurochem。,22:581(1974)。26。Patel,A。J.,Michaelson,I。A.,Cremer,J。E.和Balazs,r。:年轻大鼠摄入铅的大脑中的代谢室内的变化。J.Neurochem。,22:591(1974)。27。Pentschew,A。和Garro,f。:哺乳老鼠的铅瘤性脑病及其对卟啉症神经疾病的影响。Acta Neuropathol。,6:266(1966)。28。Potter,V。R.,Schneider,W。C.和Liebl,G。J。:新生大鼠组织生长和分化过程中的酶变化。Cancer Res。,5:21(1945)。 29。 Rhyne,B。C.和Goyer,R。A。:实验性铅中毒中肾脏线粒体的细胞色素含量。 EXP。 mal。 Pathol。,14:386(1971)。 30。 Sanadi,D。R.和Jacobs,E。E。:细胞色素氧化酶区域(现场ILL)的氧化磷酸化测定。 JO:38(1967)。 31。 Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。 xxi!l。Cancer Res。,5:21(1945)。29。Rhyne,B。C.和Goyer,R。A。:实验性铅中毒中肾脏线粒体的细胞色素含量。EXP。mal。Pathol。,14:386(1971)。30。Sanadi,D。R.和Jacobs,E。E。:细胞色素氧化酶区域(现场ILL)的氧化磷酸化测定。JO:38(1967)。 31。 Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。 xxi!l。JO:38(1967)。31。Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。 xxi!l。Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。xxi!l。M.和Brierly,G。P。:通过心脏线粒体运输离子。铅对线粒体反应的影响。
结果与讨论:通过野生型(WT)和TGP PSLOX2突变型线的DNA测序确定了稳定转基因PEA系(TGP)的成功CRISPR/CAS9介导的LOX基因编辑(TGP)。还评估了这些线路的LOX活性,PUFA水平和VOC。Compared to WT peas, the TGP lines showed a signi fi cant reduction (p < 0.05) in LOX activity and in the concentration of key VOCs, including hexanal, 2-hexenal, heptanal, (E)-2-heptenal, (E,E)-2,4- heptadienal, 1-octen-3-ol, octanal, (E)-2-octenal (E,E)-2,4-非二烯和Furan-2-苯基。在TGP浮动中,两个必需的PUFAS,亚油酸和二酚酸的含量是LOX的已知底物,表明CRISPRPR介导的基因编辑的效率在最小化其氧化和PUFAS及其产品的进一步调节方面具有效率。vocs的集合
关于艺术家 Christopher Kulendran Thomas 是一位现居伦敦和柏林的泰米尔裔艺术家,他的家人离开了位于斯里兰卡北部泰米尔人聚居地伊拉姆,那里的种族压迫和内乱不断升级,之后他在伦敦度过了成长的岁月。他大多是从远处观察斯里兰卡当代艺术如何从岛上冲突的灰烬中蓬勃发展起来,于是开始研究艺术创造现实的结构过程。如今,这位艺术家的工作室涉及众多学科,经常使用先进技术,是一种流畅的合作,将技术专家、建筑师、作家、记者、设计师、音乐家、活动家和艺术家聚集在一起,探索文化、技术和公民身份交叉点上各种尚未实现的可能性。Kulendran Thomas 是 New Eelam 的创始人兼首席执行官。
荞麦 (Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn.) 是一种特殊的作物,以其显著的健康益处、高含量的有益多酚和无麸质特性而闻名,使其成为备受追捧的功能性食品。它的自花授粉能力和对恶劣环境的适应性进一步增强了它作为可持续农业选择的潜力。为了利用其独有的性状,荞麦的遗传转化至关重要。在本研究中,我们优化了农杆菌介导的荞麦愈伤组织转化方案,使再生植物的转化率达到约 20%。通过成功的 GUS 染色、GFP 表达以及通过 FtPDS 基因失活产生白化植物,证实了该方案的有效性。这些结果验证了基因操作的可行性,并强调了荞麦性状增强的潜力。
在水稻培养中,半枯萎和粘性质地的特征分别是优化产量潜力和晶粒质量的关键。Xiangdaowan(XDW)大米以其出色的芳香特性而闻名,由于其高的身材和高淀粉糖含量而面临挑战,导致住宿耐药性不佳和次优烹饪属性。为了解决这些问题,我们采用了CRISPR/CAS9技术来精确地编辑XDW大米中的SD1和WX基因,从而发展具有所需半昏迷和麸质特征的稳定的遗传纯合线。SD1-WX突变型线表现出降低的gibberellin含量,植物高度和淀粉糖含量,同时保持了几乎不会改变发芽率和其他关键的农艺性状。重要的是,我们的研究表明,外源性GA 3的应用通过补偿内源性Gibberellin的缺乏有效地促进了生长。基于此,开发了半昏昏欲睡的精英大米(Oryza sativa L.)线,对大多数农艺性状没有太大影响。此外,比较转录组分析揭示了差异表达的基因(DEG)主要与膜的锚定成分,过氧化氢分解代谢酶分解代谢酶活性,过氧化物酶活性,萜烯合酶活性和寄生虫相关。此外,将二萜类化合物的生物合成催化为gibberellins的生物合成富集并显着下调。这项全面的研究提供了一种有效的方法,可以同时提高水稻植物的身高和质量,为耐药和高质量的水稻品种的发展铺平了道路。
目前,CRISPR/Cas9 的使用是植物(包括生物量作物杨树)精确基因组工程的首选方法。在杨树中传递 CRISPR/Cas9 及其成分的最常用方法是通过农杆菌介导的转化,除了所需的基因编辑事件外,还会导致稳定的 T-DNA 整合。在这里,我们探索了通过 DNA 包被的微粒轰击将基因编辑试剂传递到模型树 Populus tremula x P. alba 中,以评估其开发无转基因、基因编辑树的潜力,以及其在特定靶位整合供体 DNA 的潜力。使用优化的转化方法,有利于再生暂时表达所传递供体 DNA 上基因的植物,我们再生了不含 Cas9 和抗生素抗性编码转基因的基因编辑植物。此外,我们报告了供体 DNA 片段在 Cas9 诱导的双链断裂处频繁整合,为靶向基因插入提供了机会。
无义介导的 mRNA 衰变 (NMD) 是一种真核 RNA 衰变途径,在细胞应激反应、分化和病毒防御中发挥作用。它在基因表达的质量控制和转录后调控中发挥作用。NMD 也已成为癌症进展的调节剂,尽管现有证据支持其既是肿瘤抑制因子又是促肿瘤发生因子,具体取决于模型。为了进一步研究 NMD 在癌症中的作用,我们在 HT1080 人纤维肌瘤细胞系中敲除了 NMD 因子 SMG7,从而抑制了 NMD 功能。然后,我们比较了亲本细胞系、SMG7 敲除细胞系和我们重新引入 SMG7 两种亚型的拯救细胞系的致癌特性。我们还测试了一种抑制 NMD 因子 SMG1 的药物的效果,以区分 NMD 依赖性效应和假定的 NMD 非依赖性 SMG7 功能。使用基于细胞的分析和小鼠异种移植肿瘤模型,我们发现抑制 NMD 功能会严重损害致癌表型。分子通路分析表明,抑制 NMD 会大大降低基质金属蛋白酶 9 (MMP9) 的表达,而 MMP9 的重新表达会部分挽救致癌表型。由于 MMP9 促进癌细胞迁移和侵袭、转移和血管生成,其下调可能有助于降低 NMD 抑制细胞的致瘤性。总之,我们的结果凸显了 NMD 抑制作为一种治疗方法的潜在价值。