2018 年 IRDS 创造了“电活性粒子 (EAP)”这一术语,专门解决小于 50% ½ 间距设计规则的 EAP 可能导致产量低于预期的问题。
表达和纯化的重组蛋白在生物学和生物医学科学中高度使用。由于缺乏翻译后修饰(PTM)系统以及许多重组蛋白的不溶性,用于蛋白质表达和纯化的传统宿主生物,尤其是大肠杆菌,用于蛋白质表达和纯化。酵母蛋白生产系统一直是生产生物药物蛋白,蛋白质复合物和翻译后修饰蛋白的宝贵工具。在这里,我们使用半乳糖诱导系统描述了酿酒酵母中详细的蛋白质表达和纯化方案。发芽的酵母菌具有快速的细胞生长,可以达到高密度,从而产生具有高蛋白质产量的快速,简单的真核蛋白质生产平台。
引言柠檬酸(2-羟基 - 丙烷-1,2,3-三羧酸)源于拉丁语“柑橘”,柑橘树,类似于柠檬的果实。它是三羧酸和路缘周期的全局中间产物。柠檬酸是一种重要的多功能有机酸,自20世纪初以来就在工业上生产的家庭和工业应用中具有广泛的用途。在开发微生物过程之前,柠檬酸的主要来源是柑橘类水果,即柠檬。尼日尔曲霉的发现柠檬酸盐积累导致了发酵过程的迅速发展,仅十年后,该过程占了全球生产的很大一部分。根据Anastassiadis等人。(2008)160万吨柠檬酸是在2007年全球生产的,需求每年增加约3.5-4%。Majumder等。(2010)报道,柠檬酸通常用于食品和饮料,洗涤剂,药品,化妆品,洗护用品和其他行业。超过75%的柠檬酸在饮料和食品行业中消耗,主要是碳酸饮料中的成分和一种酸性。在工业上,金属精加工和清洁是最大使用柠檬酸的,其次是润滑剂,螯合剂,动物饲料和增塑剂(Bauweleers等,2014)。根据估计,柠檬酸的市场价值将继续增长,并将很快超过20亿美元(Van der Straat等人,2014年)。因为它的三个柠檬酸的应用是基于其三种特性酸度和缓冲能力,味道和风味以及金属离子的螯合作用。
pandapure®️蛋白质表达和纯化试剂盒(“ Pandapure®️蛋白质试剂盒”)包括Pandapure®Pandapure®quroteinReagent和DNA,用于使用合成细胞器和自我切割标签纯化重组蛋白。在蛋白质表达和靶向过程中,对宿主细胞进行编程以形成合成细胞器并使靶蛋白分裂。然后,在蛋白质试剂中,蛋白质会自动从标签上裂解,从而从细胞器释放。
先前用于质粒DNA(PDNA)纯化的小规模方法无法满足该行业对足够数量的需求。大量的细菌裂解物是较大的体积发酵的结果,传统的大规模下流净化过程具有一些缺点和局限性。市场被认为会继续扩展,因此需要有效,具有成本效益和可扩展的纯化过程的需求显而易见。在pDNA产量和纯度之间存在至关重要的权衡,因此需要在色谱量化步骤中进行仔细考虑。每个步骤都会提高纯度,同时牺牲产量。为了达到更高程度的pDNA产量,最佳纯化需要一个单一的构图步骤,特别是与过滤结合的阴离子交换色谱(AEX)。另外,建议采用涉及AEX的两步纯化方法,然后是疏水相互作用色谱法(HIC),以消除互补杂质并达到高纯度。此外,建议使用整体色谱支撑物的利用来促进纯粹的纯化策略。这是由于整体促进了较高的结合能力,即使在高流速下,也可以确保稳健和一致的结果。
胸苷酸合酶 (TS) 已在多种生物体中得到鉴定,并且是癌症化疗中已证实的靶点 (25)。TS 应该是白色念珠菌(一种常见的真菌病原体)的良好化疗靶点,因为该酶的产物 dTMP 只能在酵母中从头合成;酵母缺乏胸苷激酶,并且胸腺嘧啶、胸苷和 dTMP 无法渗透 (6)。有效抑制酵母中的 TS 会导致死亡,因为这些生物体无法产生自己的 dTMP 或从环境中获取它。5-氟胞嘧啶可在体外和体内抑制白色念珠菌和几种其他真菌 (3)。此外,用 5-氟胞嘧啶 (9) 处理白色念珠菌会导致 5-氟-dUMP 积累并抑制 TS,因此表明该酶是真菌的化疗靶点。从体外靶酶表征中获得的信息有助于设计新的潜在化疗剂。大量纯酶的可用性促进了此类研究。由于白色念珠菌培养物中存在低水平的 TS,因此在大肠杆菌中克隆和过表达了白色念珠菌 TS。我们报告了通过功能补充缺乏 TS 的酿酒酵母菌株分离白色念珠菌 TS 基因。该基因的序列包括基因 5' 端约 400 个碱基对 (bp) 的 DNA 和一段较短的 3' 侧翼区,并使用 T7 表达载体在大肠杆菌中表达。制备了来自白色念珠菌和大肠杆菌的纯化酶,并检查了其特性,以确保在大肠杆菌中表达的克隆 TS 酶与白色念珠菌的天然 TS 酶相同。
图 3. Bioanalyzer 2100 DNA 12000 右侧尺寸选择日期。A1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 0.5 倍。B1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 0.6 倍。C1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 0.7 倍。D1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 0.8 倍。E1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 1.0 倍。F1:通过右侧去除步骤去除的 DNA 片段 – 1.4 倍。A2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 – 0.5 倍/2.0 倍。B2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 – 0.6 倍/1.9 倍。C2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 – 0.7 倍/1.8 倍。 D2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 — 0.8×/1.7×。E2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 — 1.0×/1.5×。F2:右侧尺寸选择后回收的 DNA 片段 — 1.4×/1.1×。
噬菌体悬浮液:如果排序噬菌体的“活跃培养”,或者仅以这种形式可用,我们的噬菌体作为宿主生长培养基中无细菌裂解物的1 ml部分进行。细菌细胞和碎屑通过离心和随后的过滤在单速用乙酸纤维素注射器过滤器(0.2或0.45 µm孔径)中消除。所有噬菌体库存都经过滴度和斑块形态/斑块纯度的测试。向我们的客户交付的噬菌体悬挂是可以使用的,可以在收件人的实验室中传播,通常效率在1 x 10 8-1 x 10 11 11 pfu/ml(pfu = p laque f laque forming units)。我们实验室对一些更困难的噬菌体商定的最低允许的滴度限制为10 6 pfu/ml。我们不提供噬菌体滴度数据,因为在我们的实验室的测试间隔期间滴度可能会下降。噬菌体应在收到后立即冷却和黑暗。不要在不添加冷冻保护剂的情况下冷冻噬菌体悬浮液。当存储冷却时,大多数噬菌体将保持活跃,而几个月内没有明显的活动损失。但是,DSMZ不能保证在较长的存储期内噬菌体生存,请参阅我们的主页信息。如果添加了冷冻保护剂,例如,无菌甘油的10%(v/v),最终浓度,可以将噬菌体裂解物存储为长期目的。
创新型电池材料回收商 Neometals Ltd (ASX: NMT & AIM: NMT)(简称“Neometals”或“公司”)欣然宣布,其锂化学中试(简称“中试”)的净化阶段(简称“净化测试”)已成功完成。在盐水进料源上进行的净化测试已证实了早期的台架试验,去除了 97% 以上的盐水进料源杂质。这支持生产出符合公司多数股权的 ELi™ 工艺(简称“ELi™ 技术”)后续电解阶段规格的净化盐水溶液。
eppendorf®,Eppendorf品牌设计,Epmotion®和EppendorfThermomixer®是德国Eppendorf SE的注册商标。Quick-DNA™是美国Zymo Research Corporation的注册商标。保留所有权利,包括图形和图像。版权所有©2024 Eppendorf SE