为了支持改善患者护理,该活动已由Medscape,LLC和新兴的传染病计划和实施。Medscape,LLC得到认可的持续医学教育委员会(ACCME),认证药物教育委员会(ACPE)(ACPE)和美国护士证书中心(ANCC)的认可,为医疗团队提供继续教育。Medscape,LLC指定此基于期刊的CME活动,最多为1.00 AMA PRA类别1 CRECTER™。医师应仅要求其参与活动的程度相称。成功完成此CME活动(包括参与评估部分),使参与者能够在美国内科医学委员会(ABIM)维护认证(MOC)计划中获得高达1.0 MOC的积分。参与者将赚取相当于该活动的CME积分数量的MOC积分。为了授予ABIM MOC信用,向ACCME提交参与者完成信息是CME活动提供商的责任。所有其他完成此活动的临床医生将获得参与证书。参加本期刊CME活动:(1)回顾学习目标和作者披露; (2)研究教育内容; (3)在https://www.medscape.org/qna/processor/73460?showstandalone=true&src = prt_jcme_eid_eid_mscpedu; (4)查看/打印证书。有关CME问题,请参见第415页。注意:Medscape的政策是避免在认可的活动中使用品牌名称。但是,为了尽可能清楚,在此活动中使用商标名称来区分混合物和不同的测试。这并不是要推广任何特定产品。
A dynamic subpopulation of CRISPR-Cas overexpressers allows Streptococcus pyogenes to rapidly respond to phage Marie J. Stoltzfus 1 , Rachael E. Workman 1 , Nicholas C. Keith 1 , Joshua W. Modell 1 * 1 Department of Molecular Biology & Genetics, Johns Hopkins University School of Medicine, Baltimore, MD 21205, USA *Correspondence: jmodell1@jhmi.edu摘要许多CRISPR-CAS系统,可为细菌提供适应性免疫,以防止噬菌体,在其本土宿主中受到转录抑制。如何根据需要诱导CRISPR-CAS的表达,例如在噬菌体感染期间,人们对此仍然了解不足。在链球菌为链球菌中,一种非典型的指南RNA TRACR-L指导Cas9自动燃烧自己的启动子。在这里,我们描述了具有破坏Cas9结合并导致CRISPR-CAS过表达的单个突变的细胞的动态亚群。CAS9通过提高TRACR-L目标部位的突变率来积极扩大该人群。过表达者表现出更高的记忆形成率,旧记忆的效力更强,并且相对于野生型细胞具有更大的记忆存储能力,而野生型细胞非常容易受到噬菌体感染的影响。然而,在没有噬菌体的情况下,CRISPR-CAS过表达会降低健身。我们建议CRISPR-CAS过表达者是噬菌体防御中的关键参与者,使细菌种群能够对噬菌体的快速转录反应,而无需任何一个单元格中的短暂变化。引言有效的免疫系统必须迅速识别和破坏外国威胁,同时避免宿主内的类似主题。细菌编码了越来越多的免疫效应子来防御噬菌体(噬菌体)和质粒,但是这些系统如何平衡免疫力和自身免疫仍然是一个悬而未决的问题。CRISPR-CAS系统可为细菌提供针对异物核酸的适应性免疫,已作为转化基因编辑工具,但是在许多细胞类型中,CAS核酸酶的异源过表达是有毒的1-4。在其本地宿主中,CRISPR-CAS系统通常在没有噬菌体或其他压力源的情况下被转录抑制。尽管这种抑制能够减轻自身免疫性,但尚不清楚(i)原生CIRSPR-CAS启动子是否足够强大以在其解除抑制状态下引起自身免疫性以及(ii)如何根据需要暂时诱导CRISPR-CAS表达。在某些细菌和古细菌物种中,CRISPR-CAS表达对噬菌体感染的直接反应增加了5-9。但是,对噬菌体感染的任何反应都是与相对较短的裂解周期的种族,这可能会限制这种反应的效用。另一种策略是在噬菌体到来之前增加CRISPR-CAS的表达。的确,许多CRISPR-CAS阻遏物受环境信号的调节,可能会预测噬菌体感染,包括种群密度,包络压力和营养供应10-13。然而,噬菌体感染可能会或可能不会先于这些信号,我们想知道是否可能存在更可靠的机制来为噬菌体感染制备细胞。CRISPR-CAS免疫包括三个阶段:适应,生物发生和干扰。在适应性链球菌中II-A型系统,30 bp的噬菌体DNA或“间隔者”中被从噬菌体中捕获,并将其掺入CRISPR阵列的5'末端,并将
自2019年冠状病毒疾病结束(Covid-19)大流行以来,在世界范围内已证明了呼吸道合胞病毒(RSV)和A组链球菌感染等小儿传染病的大量暴发[1,2]。rsv是一种重要的病原体,可导致婴儿和幼儿的下呼吸道感染,并可能引起严重的并发症,需要重症监护病房(ICU)护理。同时,气体可能引起各种临床表现,从表面感染到严重的侵入性气体感染和感染后疾病综合征[2]。随着COVID-19预防措施放松后的RSV和气体感染数量的增加,可能会与这些病原体共同感染,从而导致复杂的临床病程和严重的临床症状。
我们已经从肽二氢硫醇融合的2-吡啶酮支架中开发了GMPCIDES,该二吡咯酮融合了抗微生物活性,该酮具有抗微生物活性。在这里,我们使用皮肤和软组织感染(SSTI)和生物膜形成模型来检查GMPCIDES的治疗功效。筛选我们的化合物文库中的最小抑制性(MIC)和最小杀菌(MBC)浓度鉴定为对pyogenes的GMPCIDE PS757的浓度高度活跃。使用PS757对化脓性链球菌生物膜进行处理,揭示了通过防止初始生物膜发展,停止生物膜成熟并消除成熟生物膜的生物膜形成的所有阶段。在孢子链球菌SSTI的鼠模型中,皮下递送PS757导致组织损伤水平降低,细菌负担降低以及伤口愈合的加速速率,这与关键的病毒率因子的下调有关,包括M蛋白和SPEB蛋白质和SPEB固醇蛋白酶。这些数据表明,GMPCIDES对治疗化脓性链球菌感染显示出巨大的希望。
图 1 布氏锥虫 PCF 中的 GFP 失活。(a)对组成性表达胞浆 eGFP 的布氏锥虫进行荧光流式细胞术分析。在用 20 μ g(无 Cas9、Cas9/gRNA GFP1、Cas9/gRNA GFP2、Cas9/gRNA GFP3)或 60 μ g(Cas9/gRNA GFP2)来自 IDT 的 RNP 复合物转染后 24 至 72 小时随时间监测 GFP 荧光,条形图显示用不同向导转染后 72 小时 GFP 阴性细胞的百分比(n = 3)。采用 Prism 软件进行统计分析,采用 t 检验(非配对、正态分布、参数检验和双尾)。显着性水平(p 值)用星号表示。 (b)上图显示了允许 e Sp Cas9 在大肠杆菌中表达的质粒的示意图。蓝色框表示蛋白质 N 端和 C 端的两个多组氨酸序列,红色框表示 TEV 和肠激酶 (EK) 蛋白酶的切割位点,灰色框表示三个核定位信号 (NLS),黑色框表示 FLAG 表位的三个重复,橙色框表示 e Sp Cas9 编码序列。下图显示了在用来自 IDT 或实验室纯化 (Lab) 的 RNPs 复合物 (无 Cas9、20 μ g Cas9/gRNA GFP2、40 μ g Cas9/gRNA GFP2、40、60 和 80 μ g Cas9/gRNA GFP2) 转染后 72 小时监测的表达 GFP 的 T. brucei 的荧光流式细胞术分析。(c)不再表达 GFP 的克隆中 GFP 基因的一部分的序列比较。该序列仅显示 GFP2 向导 RNA 所针对的区域。灰色框(H1 和 H2)突出显示可能用于 MMEJ 修复的同源区域。由实验室纯化的 Cas9 失活产生的序列和来自商业 Cas9 的序列分别标记为 Lab 和 IDT。下面显示了 Dc6 和 Ba10 克隆的相应色谱图(置信区间 95%— p 值样式:0.1234 (ns);0.0332 (*);0.0021 (**);0.0002 (***);< 0.0001 (****))。
Gabrelle至1.5.5和Jaina 1,Moduu Lamin Fena Check,船1,Mahammed Manage 1,Cho Goods Glaje 13疫苗和Imunity主题,MRC绅士Schoroen的Schorone的Schoone
loCINC 101300-2:链球菌为链球菌DNA DNA [存在] NAA与非探针检测11268-0:链球菌为链球菌(链球菌):生物体特异性培养17656-0:在喉咙中的存在17656-0:Pyogenes在生机化培养物中的脉冲[BACIMEN]在生气素中的存在:178888-8: 18481-2:喉咙链球菌Ag [存在] 31971-5:pyogenes链球菌Ag [存在]在试样中49610-9:pyogenes pyogenes dna [识别剂]通过NAA在NAA中通过探针检测5036-9:链球菌pyogenses pyogense in Naa在NAA中[识别剂] [识别剂] [ Streptococcus pyogenes DNA [Presence] in Throat by NAA with probe detection 626-2: Bacteria identified in Throat by Culture 6557-3: Streptococcus pyogenes Ag [Presence] in Throat by Immunofluorescence 6558-1: Streptococcus pyogenes Ag [Presence] in Specimen by Immunoassay 6559-9: Streptococcus pyogenes Ag [存在]免疫荧光68954-7:探针78012-2在喉咙中的链球菌链球菌rRNA [存在]:生病的链球菌在喉咙中通过快速免疫分子在喉咙中的存在]
o因黄疸或诊断为五巨头之一而被排除的任何雇员将从医生的书面医疗文件中恢复,并获得监管机构的批准。与监管机构联系以寻求帮助,以恢复其他选择。o由于呕吐或腹泻的症状而被排除的任何员工在至少24小时内无症状后,或者在提供医疗文献证明症状是来自非感染状况的症状之后,将恢复。o在提供医学文献的情况下,他们已经接受了抗菌球链球菌感染的抗生素治疗24小时以上的医疗文献,他们至少有一个由Pyogenes链球菌或IT是由健康实践来确定的, o o。 oo o。 oo。o
没有一个对准一个对齐两个 +对准大肠杆菌3.48%84.57%11.95%链球菌。化脓性99.73%0.22%0.05%mus musculus 99.24%0.65%0.11%homo sapien 99.75%0.19%0.19%0.06%
成年患者由于流感嗜血杆菌,卡他氏菌或肺炎链球菌急性急性细菌急性细菌性急性细菌性鼻窦炎引起的慢性支气管炎的急性细菌性急性恶化。或肺炎链球菌社区社区获得的肺炎,肺炎肺炎,流感嗜血藻,嗜血性嗜血杆菌,肺炎肺炎肺炎,肺炎肺炎或链链球菌在适合于口腔治疗的患者中,伴有肺炎症状症患者,伴有py症状症状症状。在不能使用一线疗法的个人中。由于金黄色葡萄球菌,化脓性链球菌或链球菌链球菌而引起的皮肤和皮肤结构不复杂。由于沙眼衣原体或肺炎奈瑟氏菌引起的尿道炎和宫颈炎,因嗜血杆菌(Chancroid)而导致的男性淋病生殖器性溃疡。由于临床试验中包括少数妇女,阿奇霉素在治疗冠状动脉治疗女性中的疗效尚未确定。