XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search System减弱
合理设计 CRISPR-Cas9 核酸酶以减弱位置依赖性脱靶效应
摘要 化脓性链球菌的 RNA 引导 Cas9 核酸酶已成为一种重要的基因编辑工具。然而，其固有的脱靶活性是生物医学应用面临的主要挑战。与一些报道的专门针对单个结构域的工程策略不同，考虑到 Cas9 的特异性是由各个结构域协同决定的，我们合理地在酶的多个结构域中引入了多个氨基酸替换，以创建潜在的高保真度变体。我们还利用了我们之前推导的活化 Cas9 复合物结构的原子模型来指导新的修饰。这种方法已鉴定出具有增强的 DNA 切割特异性的 HSC1.2 Cas9 变体。虽然 HSC1.2 变体的特异性增强在体外切割试验中似乎与位置有关，但这种 Cas9 变体的脱靶 DNA 编辑频率远低于人类细胞中的野生型 Cas9。通过分子动力学模拟研究了导致观察到的位置依赖性效应的潜在机制。我们的发现为利用结构和动态信息开发具有高基因编辑特异性的 Cas9 样酶奠定了坚实的基础。
合理设计 CRISPR-Cas9 核酸酶以减弱位置依赖性脱靶效应
摘要 化脓性链球菌的 RNA 引导 Cas9 核酸酶已成为一种重要的基因编辑工具。然而，其固有的脱靶活性是生物医学应用面临的主要挑战。与一些报道的专门针对单个结构域的工程策略不同，考虑到 Cas9 的特异性是由各个结构域协同决定的，我们合理地在酶的多个结构域中引入了多个氨基酸替换，以创建潜在的高保真度变体。我们还利用了我们之前推导的活化 Cas9 复合物结构的原子模型来指导新的修饰。这种方法已鉴定出具有增强的 DNA 切割特异性的 HSC1.2 Cas9 变体。虽然 HSC1.2 变体的特异性增强在体外切割试验中似乎与位置有关，但这种 Cas9 变体的脱靶 DNA 编辑频率远低于人类细胞中的野生型 Cas9。通过分子动力学模拟研究了导致观察到的位置依赖性效应的潜在机制。我们的发现为利用结构和动态信息开发具有高基因编辑特异性的 Cas9 样酶奠定了坚实的基础。
mRNA疫苗的有效性和保护的减弱
随机试验表明，对有症状的Covid-19的mRNA疫苗的疗效很高。2 3这些疫苗在降低SARS-COV-2感染的发病率和死亡率方面的有效性已通过现实世界情景中的观察数据证实。4-10个针对高风险群体和老年人的疫苗助推器剂量的运动已经开始。 基于已发表的研究，需要清楚地了解SARS-COV-2病毒的三角洲变体的主要循环系统是否降低了疫苗的有效性，以及这种影响是否加上疫苗提供的免疫力的潜在减弱，支持增强剂量的助推器剂量向所有人口组的扩展和营养不良的时间扩展。 11-20项研究的重点是疫苗有效性，针对由三角洲变体引起的任何SARS-COV-2感染显示，在卡塔尔总体中，估计值范围从18％（95％置信区间-13％到40％）在加拿大的总体中，在加拿大的一般人群中，大约六个月的总人群，大约是QUEBEC的总人群，大约是QUEBEC的总数，大约是QUEBEC的总人群，大约是QUEBEC的一般人群，大约是QUEBEC的一般人群。 21在反对对助推器剂量的需求提出的论点中，尽管自疫苗接种以来，针对任何SARS-COV-2感染的疫苗有效性似乎随着时间的流逝而减弱，但针对严重的Covid-19的有效性仍然很高。 基于这一论点，以减少病毒的流通和致命性以及使用可用资源来改善完整的初级疫苗接种覆盖范围（包括低收入国家）的新变体的叛乱，这是一个主要好处。 22-254-10个针对高风险群体和老年人的疫苗助推器剂量的运动已经开始。基于已发表的研究，需要清楚地了解SARS-COV-2病毒的三角洲变体的主要循环系统是否降低了疫苗的有效性，以及这种影响是否加上疫苗提供的免疫力的潜在减弱，支持增强剂量的助推器剂量向所有人口组的扩展和营养不良的时间扩展。11-20项研究的重点是疫苗有效性，针对由三角洲变体引起的任何SARS-COV-2感染显示，在卡塔尔总体中，估计值范围从18％（95％置信区间-13％到40％）在加拿大的总体中，在加拿大的一般人群中，大约六个月的总人群，大约是QUEBEC的总人群，大约是QUEBEC的总数，大约是QUEBEC的总人群，大约是QUEBEC的一般人群，大约是QUEBEC的一般人群。21在反对对助推器剂量的需求提出的论点中，尽管自疫苗接种以来，针对任何SARS-COV-2感染的疫苗有效性似乎随着时间的流逝而减弱，但针对严重的Covid-19的有效性仍然很高。基于这一论点，以减少病毒的流通和致命性以及使用可用资源来改善完整的初级疫苗接种覆盖范围（包括低收入国家）的新变体的叛乱，这是一个主要好处。22-25
CRISPR-Cas9 介导敲除木薯 CYP79D1 和 CYP79D2 可减弱有毒氰化物的产生
木薯 (Manihot esculenta Crantz) 是一种富含淀粉的块根作物，养活了全世界热带和亚热带地区超过 10 亿人。然而，这种主食会产生有毒的氰化物，需要经过加工才能安全食用。过量食用加工不充分的木薯，再加上缺乏蛋白质的饮食，会对神经退行性产生影响。由于木薯的杂合性质，通过常规育种降低氰化物含量存在问题；重组通常会破坏克隆繁殖品种的一系列理想性状。为了降低木薯中的氰化物水平，我们使用 CRISPR 介导的诱变技术来破坏细胞色素 P 450 基因 CYP79D1 和 CYP79D2，这两个基因的蛋白质产物可催化氰化物葡萄糖苷生物合成的第一步。敲除这两个基因可消除木薯品种 60444 和西非农民偏爱的品种 TME 419 的叶子和块茎中的氰化物。虽然单独敲除 CYP79D2 可显著减少氰化物，但诱变 CYP79D1 则不会，这表明这些旁系同源物的功能已经出现分化。我们的工作表明，木薯基因组编辑可提高食品安全、降低加工要求并带来环境效益，这些优势可轻松扩展到其他农民偏爱的品种。
减弱阳性症状的纵向结果...
早期的精神病：干预和临床检测（EPIC）实验室，精神病学系，精神病学研究所，心理学与神经科学研究所，国王伦敦大学，英国B伦敦，英国B精神病学院和心理健康研究所。
热带地区流感疫苗失败：有效性减弱的回顾性队列研究
1 新加坡国家传染病中心；2 新加坡南洋理工大学李光前医学院；3 新加坡国家传染病中心国家公共卫生实验室；4 新加坡国家传染病中心国家公共卫生与流行病学部；5 新加坡临床流行病学、分析与知识办公室临床流行病学系；6 英国伦敦卫生与热带医学院；7 德国海德堡大学海德堡全球健康研究所；8 新加坡陈笃生医院实验室医学系；9 新加坡国立大学杨潞龄医学院微生物学与免疫学系；10 新加坡国立大学苏瑞福公共卫生学院
自闭症患者感觉习惯减弱及其与行为指标的相关性
摘要 自闭症与感觉处理困难密切相关。我们研究感觉习惯化，因为它与理解诸如超敏感性和低敏感性等重要表型特征相关。我们在呈现视觉和听觉序列的重复刺激期间收集了 22 名神经典型 (NT) 儿童和 13 名自闭症 (ASD) 儿童的脑电图数据。我们的数据显示，与 NT 儿童相比，ASD 儿童对听觉和视觉刺激的习惯化程度显著降低。这些结果表明，习惯化受损是 ASD 中的一种普遍现象。此外，习惯化率与与不同表型维度的能力相关的几个临床评分相关。这些数据表明，自闭症中的感觉困难可能与习惯化程度降低有关，并且与临床症状有关。
一种用于减弱猫免疫缺陷病毒感染细胞的感染潜力的 RNA 指导基因编辑策略：概念证明
摘要：尽管现代抗逆转录病毒疗法在控制病毒转录和明显的病毒相关发病率方面非常有效，但由于前病毒整合到长寿命的储存细胞中，它无法完全根除感染宿主体内的逆转录病毒。因此，免疫缺陷病毒感染患者必须终生接受抗病毒治疗，以控制病毒血症、病毒传播和感染相关发病率。不幸的是，患者很难持续接受终生抗病毒治疗，并且可能与治疗特异性发病率有关。患者权益倡导者一直在呼吁采用新方法来实现逆转录病毒根除。作为一项概念验证研究，我们在一系列体外实验中采用了慢病毒传递的 RNA 定向基因编辑策略，试图降低猫免疫缺陷病毒 (FIV) 前病毒载量、病毒转录和感染性病毒体的产生。我们发现，用 FIV 特异性成簇规律散布短回文重复序列 (CRISPR) 相关蛋白 9 (Cas9) 基因编辑工具处理的猫 T 淋巴细胞系 (MCH5-4) 导致无细胞病毒 RNA 相对于对照细胞减少。两步 FIV 感染研究证实了感染潜力降低 — 用从 FIV 感染和 CRISPR 慢病毒处理的细胞中收获的无细胞 FIV 感染的幼稚 MCH5-4 细胞的整合前病毒 DNA 少于对照细胞。这项研究代表了朝着开发一种有效的在免疫缺陷病毒感染宿主中根除原病毒的方法迈出的初步步伐。
TGF-β 诱导的 TMEPAI 减弱了三重... 的反应
目的：三阴性乳腺癌 (TNBC) 是一种难治性乳腺癌，预后不良，治疗选择有限。先前的研究表明，TNBC 具有高跨膜前列腺雄激素诱导蛋白 (TMEPAI) 表达。已知 TMEPAI 由 TGF- β /Smad 信号诱导，并具有致瘤功能，可将 TGF- β 从肿瘤抑制因子转化为肿瘤促进因子并诱导上皮 - 间质转化 (EMT)。因此，我们旨在确定 TMEPAI 在 TGF- β 存在下使用几种抗癌药物治疗三阴性乳腺癌细胞中的作用。方法：在三阴性乳腺癌细胞 BT549 中进行 TMEPAI 敲除 (KO)。 TMEPAI 编辑是使用 CRISPR-Cas9 系统开发的，它使用两种 sgRNA 组合来完全去除 TMEPAI 基因的外显子 4。进行基因分型和蛋白质组学分析以检查 TMEPAI-KO 细胞的建立。在 TGF-β 处理的情况下，野生型 (WT) 和 KO 细胞用于确定几种抗癌药物的 50% 抑制浓度 (IC 50 )：阿霉素、顺铂、紫杉醇和比卡鲁胺。结果：通过完全去除 TMEPAI 基因成功建立了 KO 细胞，这在基因组和蛋白质组学分析中得到了证实。此外，在 TMEPAI-KO 细胞中，我们发现阿霉素和紫杉醇的 IC 50 显著降低，而顺铂和比卡鲁胺的影响最小。我们的研究结果表明，TGF-β 诱导的 TMEPAI 减弱了 TNBC 对阿霉素和紫杉醇的反应，但对顺铂和比卡鲁胺的反应没有影响。结论：TGF-β 诱导的 TMEPAI 导致 TNBC 治疗对阿霉素和紫杉醇的反应降低，但对顺铂和比卡鲁胺的影响最小。需要进一步研究以在其他生长因子诱导的细胞以及体内模型中证实我们的发现。关键词：TMEPAI、TGF-β、阿霉素、紫杉醇