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补充数字ORAI1α和Orai1β支持钙...
补充图2。源自WT MDA-MB-231和ORAI1-KO MDA-MB-231的乳腺癌干细胞（BCSC）中Orai2，Orai3，stim1和stim2的表达。从WT和Orai1-KO（O1KO）MDA-MB-231细胞得出的干细胞中的全细胞裂解物进行10％SDS-PAGE，并用特异性抗ORAI2，抗ORAI2，抗Orai3，anti-Orai3，anti-stim1和anti-stim1和anti-2抗体进行蛋白质印迹。印迹。bar图代表Orai2（a），Orai3（b），STIM1（C）和Stim2（D）蛋白表达，以4个单独的实验的平均值±SEM表示。使用Mann-Whitney U检验对数据进行了统计分析。**** p <0.0001
悖论的BRAF抑制剂PLIXORAFENIB（PLX8394
• A selective, potent paradox-breaker BRAFi that targets mutated BRAF monomers and homodimers and BRAF-CRAF heterodimers without inducing RAF dimer formation • Demonstrated robust anti-tumor activity as a single agent against BRAF-altered tumors including CNS tumors, with durable long-term tolerability, no dose limiting toxicities, infrequent symptomatic G3 AEs, infrequent fever, and no skin toxicities observed with approved BRAFi in clinical settings • This work evaluates the combination of plixorafenib and MEKi in nonclinical models and explored the feasibility of the combination for clinical use Methods • High-throughput cell-based functional assay quantifies MAPK signaling pathway activation using fluorescent imaging coupled with image analysis of cells expressing the mutated protein together with a荧光标记为ERK2为信号途径报道器（Zimmerman，L。et al。SCI。 Rep。63，4192（2020））•使用标准的Western印迹和细胞活力测定法验证了高通量测定结果SCI。Rep。63，4192（2020））•使用标准的Western印迹和细胞活力测定法验证了高通量测定结果Rep。63，4192（2020））•使用标准的Western印迹和细胞活力测定法验证了高通量测定结果
pafah1b3的高表达促进了运动和运动，并抑制乳腺癌细胞1，Zhiqiang yang Yang 2， *，Wei
摘要背景：乳腺癌（BC）是女性最常见的癌症类型。迫切需要确定新的治疗靶标及其机制。血小板激活因子乙酰水合酶1B3（PAFAH1B3）是一种多聚酶，是一种重要的代谢酶，可介导脂质代谢并影响几种肿瘤。进行了这项研究以阐明Pafah1b3在BC进展中的功能并研究其潜在机制。方法：基因表达分析互动分析（GEPIA）数据库和免疫印迹显示了乳腺癌组织中PAFAH1B3的表达。细胞计数KIT-8（CCK-8），菌落形成和Transwell分析显示对乳腺癌细胞生长和迁移的影响。流式细胞仪（FCM）和免疫印迹测定对乳腺癌细胞凋亡的影响。从机械上讲，进一步进行免疫印迹以确认机制。结果：我们的发现表明，pafah1b3在卑诗省高度表达，Pafah1b3的耗竭抑制了BC细胞的生长和迁移，同时促进凋亡。从机械上讲，PAFAH1B3耗尽破坏了磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）途径，从而抑制BC的进展。结论：我们发现PAFAH1B3通过PI3K/AKT轴增强了BC细胞的生长以及运动性，并且可能是BC的目标。
BTX-9341，CDK4和CDK6的双功能降解器，用于多形胶质母细胞瘤
•Prodegy平台用于开发一系列少数（CRBN）介导的CDK4/6双功能降解器，包括开发候选BTX-9341。•通过cas9-grna复合物的核反射产生基因敲除细胞系。•通过用BTX-9341处理的细胞的蛋白质裂解物的免疫印迹分析了靶降解6小时或所示。•经过24小时的治疗后或通过指示的免疫印迹，通过细胞西部分析了磷酸化的RB。•在碘化丙啶染色后通过流式细胞仪治疗24小时后，进行了细胞周期分析。•通过10天菌落形成测定后，通过CellTiter-Glo 2.0分析（Promega）测量细胞增殖。•媒介物，CDK4/6抑制剂和BTX-9341在BALB/C裸鼠异种皮下或颅内模型中口服。
已于 2024 年 7 月 27 日董事会会议上修改
2024 年 8 月 17 日 — 印迹技术、基因和基因组编辑技术、。15. 55 5. 微阵列。V. 显微镜的原理、类型和应用。15. VI. 原理、类型...
晚期诊断的颞部综合征患者的长期随访
坦普尔综合征是一种罕见的印迹障碍，是由 14 号染色体的关键印迹区域 14q32 发生改变引起的。其特征是新生儿出生前和出生后生长迟缓、躯干肌张力减退和面部畸形。我们报告了一名 18 岁女孩，她被晚期诊断为坦普尔综合征，表现出所有典型的体征和症状，包括出生时小于胎龄、喂养困难、肌张力减退和发育里程碑延迟、中枢性性早熟、躯干肥胖和生长迟缓。该患者是文献中报告的第二例有临床和生化雄激素过多症迹象的患者，也是第一例使用脱氢可的松® 治疗且反应良好的患者。该患者的临床诊断是在一家罕见内分泌疾病中心进行长期随访后做出的，最近确定了 14q32 染色体印迹中心 (DLK/GTL2) 完全低甲基化的分子遗传学诊断。未进行生长激素治疗，尽管性早熟的治疗符合标准方案，但她的最终身高仍低于目标范围。提高对 Temple 综合征的认识和及时的分子诊断可以改善这些患者的临床护理，并预防固有的代谢后果。关键词：Temple 综合征，晚期诊断，长期随访
纳尔西卡汀通过耐他莫昔芬耐药性乳腺癌细胞中的不同机制靶向STAT3
使用ROS清除剂，10 mM NAC持续1小时，随后进行或不使用NAR的处理，并收集细胞进行蛋白质印迹分析。 用NP-40裂解缓冲液，核和细胞质蛋白用核和细胞质蛋白提取试剂盒（Beyotime，Haimen，中国）提取的NP-40裂解缓冲液，核和细胞质蛋白提取总细胞蛋白。 使用BCA蛋白质试剂盒（Beyotime，Haimen，Chine）确定蛋白质浓度。 用于蛋白质印迹分析，将样品通过SDS-PAGE分离，并转移到PVDF膜上。 用5％的非脂肪干乳封闭后，将膜与制造商建议在4°C的制造商建议的稀释液一起孵育过夜。 在建议的稀释液中加入了山羊抗兔或驴抗小鼠二抗（Irdye 800，Li-Cor，Li-Cor，Lincoln，NE），并且在室温下孵育持续1小时。使用ROS清除剂，10 mM NAC持续1小时，随后进行或不使用NAR的处理，并收集细胞进行蛋白质印迹分析。用NP-40裂解缓冲液，核和细胞质蛋白用核和细胞质蛋白提取试剂盒（Beyotime，Haimen，中国）提取的NP-40裂解缓冲液，核和细胞质蛋白提取总细胞蛋白。使用BCA蛋白质试剂盒（Beyotime，Haimen，Chine）确定蛋白质浓度。 用于蛋白质印迹分析，将样品通过SDS-PAGE分离，并转移到PVDF膜上。 用5％的非脂肪干乳封闭后，将膜与制造商建议在4°C的制造商建议的稀释液一起孵育过夜。 在建议的稀释液中加入了山羊抗兔或驴抗小鼠二抗（Irdye 800，Li-Cor，Li-Cor，Lincoln，NE），并且在室温下孵育持续1小时。使用BCA蛋白质试剂盒（Beyotime，Haimen，Chine）确定蛋白质浓度。用于蛋白质印迹分析，将样品通过SDS-PAGE分离，并转移到PVDF膜上。用5％的非脂肪干乳封闭后，将膜与制造商建议在4°C的制造商建议的稀释液一起孵育过夜。在建议的稀释液中加入了山羊抗兔或驴抗小鼠二抗（Irdye 800，Li-Cor，Li-Cor，Lincoln，NE），并且在室温下孵育持续1小时。
博士乔治·Z·凯扎斯
在水生环境中 2013-15：先进的分子印迹聚合物（MIPs）作为选择性结合和回收各种高附加值环境目标的材料，应用于工业规模的吸附柱 2013：实施生物和非生物参数监测计划并支持对科罗尼亚沃尔维湖的自我监督 2013-14：新型聚合物生物吸附剂的合成、特性和应用，用于环境友好型去除工业废水中的各种污染物 2012-13：Nanocapillary© 2011-13：使用导电纳米粒子制备和表征用于地热加热和冷却应用的具有增强性能和热导率的塑料管 2006-08：通过吸附到分子印迹聚合物（MIPs）上从水溶液中去除染料 2005-06：使用超吸附材料去除水溶液中的污染物
M.Sc. （分子生物学与生物技术）（AY 2023-24）M.Sc. （分子生物学与生物技术）（AY 2023-24）
V.实践•良好的实验室实践，缓冲液和试剂的准备。•离心和分光光度计原理。•细菌培养的生长和生长曲线的制备，从细菌中分离基因组DNA。•从细菌中分离质粒DNA。•lambda噬菌体的生长和噬菌体DNA的分离。•植物DNA的隔离和限制（例如大米 /月光 /芒果 / Merigold）。•通过（a）琼脂糖凝胶电泳和（b）分光光度法•使用分离的DNA定量DNA。•pagegel电泳。•质粒和噬菌体DNA，结扎，重组DNA构建的限制消化。•大肠杆菌的转化和转化体的选择•色谱技术a。 TLC b。凝胶过滤色谱法，c。离子交换色谱法，d。亲和色谱•点印迹分析，南部杂交，北部杂交。•Western印迹和Elisa。•辐射安全性和非拉迪奥同位素程序。
校正：DNA拓扑异构酶II的催化抑制剂II抑制雄激素受体信号传导和前列腺癌进展
纠正了本文：Oncotarget在本文中调查了对重复图像的担忧。在图3中，面板3D中的小管蛋白带是面板3C中H3带的重复。此外，肌动蛋白频带是早期文章的图4C所示的重复，其中包括两位与Oncotarget论文共同的作者[1]。我们还发现了补充图1（三种Lancap细胞系的AR-V7 Western印迹）在[1]的图7C中与WB带重叠。这两篇文章的对应作者Xuesen Dong博士都说：“这些错误的原因是Haolong Li博士同时一直在研究两份出版物（Oncotarget和Cell and Cell and Death and Disey）。每个项目都涉及大量的蛋白质印迹测定；负载控件的所有图像看起来非常相似，并且很容易放错位置。无论如何，这些小错误并没有影响我们得出的结论。”作者提供了原始的Western印迹，上面有校正数字的日期邮票，并指出图3a肌动蛋白（2 h处理），图3D小管蛋白（第二个面板，293T细胞，用质粒编码AR（F876L）转染的293T细胞（F876L）和补充图1 AR-V7 Blot在图组合过程中被放错了。 使用原始数据获得的校正图3和补充图1如下所示。 作者声明这些更正不会改变本文的结果或结论。使用原始数据获得的校正图3和补充图1如下所示。作者声明这些更正不会改变本文的结果或结论。