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RNA 的化学修饰（例如修饰核苷）已被用于增加蛋白质表达。与传统 mRNA 相比，自扩增 RNA 或 saRNA 是另一种具有不同结构的 mRNA。saRNA 不仅编码目标基因，还编码病毒复制机制，从而实现细胞内 RNA 扩增和丰富的蛋白质表达。由于自扩增 RNA 可以自我复制，因此所需剂量较小。saRNA 可以作为两个单独的转录本（反式扩增 saRNA）传递，这有助于减小 RNA 的整体大小。环状 RNA 是单链、共价闭合的 RNA 分子，是线性 RNA 构建体的替代品。它们的优势在于对外切酶活性更具抵抗力，寿命更长，并且由于没有 poly A 尾巴，因此无需昂贵的 5' 帽。
QIASEQ®目标DNA Pro面板
产品描述：凤凰热启动TAQ DNA聚合酶是一种重组的，恒温器TAQ DNA聚合酶，与热层，中和抗体复合，可阻断PCR的初始DNA脱酸步骤之前的5'→3'聚合酶活性（1,2）。这种抗体介导的热启动能力通过在PCR循环前还原非特异性扩增和引物二聚体形成，从而提高了PCR的总体特异性，灵敏度和产率，并允许在室温下设置的反应的便利性。在PCR循环的初始DNA定性步骤中，PCR反应混合物的温度达到≥94°C时，TAQ DNA聚合酶的活性被充分恢复。凤凰热启动TAQ DNA聚合酶，例如标准TAQ DNA聚合酶，也具有5'→3'外切核酸酶活性，但缺乏任何可检测到的3'→5'外核酸酶活性。
有效扩增克隆插入片段和人类基因组 DNA 中的长靶标
摘要 我们利用聚合酶链式反应 (PCR) 从人类基因组 DNA 中扩增出长达 22 kb 的 3-珠蛋白基因簇，并从噬菌体 A DNA 中扩增出长达 42 kb 的 3-珠蛋白基因簇。我们还直接从重组 A 斑块中扩增出 91 个 9-23 kb 的人类基因组插入片段。为此，我们增加了 pH 值，添加了甘油和二甲基亚砜，减少了变性时间，增加了延伸时间，并使用了具有 3'-至-5'-外切酶或“校对”活性的次级热稳定 DNA 聚合酶。我们的“长 PCR”方案通过使用较低水平的聚合酶和温度和盐条件进行特定引物退火，保持了基因组 DNA 中目标所需的特异性。扩增10-40 kb DNA序列的能力将为基因组图谱和测序带来PCR的速度和简便性，并促进分子遗传学研究。
环状RNA及其应用研究进展
环状RNA（circRNA）是一种新型的内源性非编码RNA（ncRNA），与microRNA（miRNA）一样，是一个迅速兴起的RNA研究课题。与传统的线性RNA（具有5'和3'端）不同，circRNA具有不受RNA外切酶影响的闭环结构。因此，circRNA具有持续表达并且对降解不太敏感。由于circRNA具有许多miRNA结合位点，因此消除其对靶基因的抑制作用可以大大增强其表达。circRNA通过特定的circRNA-miRNA相互作用在疾病的发生和进展中发挥重要调控作用。我们在本综述中总结了目前在阐明circRNA机制和生物合成方面的进展。特别是，circRNA主要可以作为miRNA海绵发挥作用，调节宿主基因表达和蛋白质运输。最后，我们讨论了基于circRNA的疗法的应用前景和重大挑战。
nzytaq II 2×无色主混合
nzytaq II 2×无色主混合物是一种预混合的现成溶液，其中含有NZytaq II DNA聚合酶（MB354），属于新一代TAQ衍生的DNA聚合酶，优化了用于标准PCR应用的DNA聚合酶。主混合物含有最佳浓度的DNTP，反应缓冲液和添加剂，并支持最高6 kb的广泛的DNA模板的可靠和可靠放大。MGCL 2最终浓度为2.5 mm，允许实施各种PCR协议。对于高度敏感的下游应用，建议在随后的协议中使用前使用nzygelpure（MB011）净化放大的PCR产物。Nzytaq II DNA聚合酶缺乏3'→5'外切核酸酶活性。由此产生的PCR产品具有A-悬垂性，适用于NZYTECH的NZY-A PCR克隆试剂盒（MB053）或NZY-A-A快速PCR克隆试剂盒（MB137）。
«ALzyme-HSTaq» DNA 聚合酶
特性 ALzyme-HSTaq 是一种重组耐热酶，在 dNTP 和引物存在下可催化 5'→3' 单链基质 DNA 合成。它具有 5'→3' 外切酶活性，但没有校正活性。ALzyme-HSTaq 可有效扩增长达 5 bp 的 DNA 片段。特定突变使该酶对血液、土壤、植物组织等中所含的某些抑制剂具有抗性。此外，ALzyme-HSTaq 具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此相当一部分扩增的 DNA 分子在 3' 端带有突出的脱氧腺苷 (dA) 残基。热启动技术。该酶在 PCR 混合物混合条件下无活性，在初始变性步骤后被激活。ALzyme-HSTaq 浓度为 5 单位/µl。 100 微升酶（ZHSTaq-100）含有 500 单位，500 微升（ZHSTaq-500）含有 2500 单位。ALzyme-HSTaq-B 反应缓冲液为 ALzyme-HSTaq DNA 聚合酶提供最佳条件。
PCR基因分型
Reagent/Material Vendor Stock Number Molecular grade H20 Sigma-Aldrich W4502 * GoTaq® G2 Colorless Master Mix Promega M7833 DNeasy® Tissue Kit Qiagen 69506 Agarose Sigma-Aldrich A9414 1kb+ DNA ladder Life Technologies 10787-018 SYBR SAFE DNA stain Life Technologies S33102 100% ETOH Gold Shield Chemicals DSP-CA-151 *GOTAQ®G2无色主混合混合物是一种预混合的现成溶液，其中含有GOTAQ®G2DNA聚合酶，DNTP，MGCL2和反应缓冲液，可在最佳浓度下以PCR有效地放大DNA模板。GOTAQ®G2DNA聚合酶表现出5´→3´外切核酸酶活性。gotaq®G2无色主混合物，2x：GoTaq®G2DNA聚合酶在2x无色GOTAQ®G2反应缓冲液（pH 8.5），400μMDATP，400μMDGTP，400μMDCTP，400μMDCTP，400μMDTTP和3MM DTTP和3MM MGCL2中提供。
保护无细胞表达系统中的线性DNA模板免受各种细菌的影响
摘要：无细胞系统的最新进展已从遗传回路的快速原型和代谢途径到便携式诊断和生物制造开辟了合成生物学的新功能。当前无细胞系统中的瓶颈，尤其是那些使用非大肠杆菌种类物种的瓶颈，是质粒DNA所需的使用，可以用力地构建，克隆和验证。线性DNA模板为许多无细胞应用提供了更快，更直接的途径，但通常会在无细胞反应中迅速降解。在这项研究中，我们从λphage，含有卡位点的DNA片段和来自结核分枝杆菌的KU评估了GAM，以保护它们在无细菌无细胞的系统中保护线性DNA模板的能力。我们表明，这些核酸酶抑制剂在五个不同的无细胞裂解液中表现出针对内源性外切酶的不同保护活性，突出了它们对各种细菌种类的效用。我们预计这些线性DNA保护策略将加速无细胞合成生物学的高通量方法。关键字：无细胞表达系统，线性DNA，RECBCD，gams，chi，ku
热启动 TTx (DNA) 试剂盒 - 使用说明书 KOD
此外，TTx DNA 聚合酶具有 5'-3' 外切酶活性，因此可用于使用探针分析（如 TaqMan ® 分析）的实时 PCR。该酶含有中和抗体，因此允许进行热启动 PCR。特点 - 卓越的 DNA 扩增效率基于 TTx DNA 聚合酶优化了反应组成。TTx DNA 聚合酶比通用酶（如 Taq DNA 聚合酶和 Tth DNA 聚合酶）具有更高的延伸能力，TTx DNA 聚合酶即使在快速循环条件下也能实现高效的 PCR。 - 耐受 PCR 抑制剂该试剂盒可有效从粗样品（例如生物样本、食品、土壤提取物等）中进行扩增。从全血进行扩增时，无需纯化核酸，直接将其加入反应溶液中即可实现充分的扩增。 - dUTP 的利用 本试剂盒含有 dUTP 而不是 dTTP，用于 rTth/TTx (DNA) 的 2x 缓冲液。因此，通过添加尿嘧啶-N-糖基化酶 (UNG) 可以降低假阳性检测率。 *本试剂盒不提供 UNG。本试剂盒包含以下成分，可用于 250 次反应，总反应体积为 20 μL。所有试剂应储存在 -20°C 下。
SARS-COV-2 RNA依赖性RNA聚合酶作为COVID-19的治疗靶标
摘要简介：当前的SARS-COV-2大流行迫切需要预防和治疗策略。RNA依赖性RNA聚合酶（RDRP）在人类细胞中没有对应物，是药物发育的绝佳靶标。鉴于药物开发的耗时过程，重新利用用于其他适应症的药物或至少在安全性和耐受性方面成功测试的药物是一种有吸引力的策略，可以快速为严重的Covid-19病例提供有效的药物。涵盖的区域：当前可用的数据和即将进行的关于RDRP的研究，可以重新使用以停止SARS-COV-2复制。专家意见：新颖化合物的药物重新利用和设计正常进行，分别提供快速反应和新的特定药物。值得注意的是，校对SARS-COV-2外切核酸酶活性可能会限制设计为直接链终止剂的药物的潜力，并有利于通过延迟终止作用的化合物的发展。虽然等待疫苗接种以遏制SARS-COV-2流行病，但即使是重新利用策略的部分有效的药物也可能有助于治疗严重的疾病病例。考虑到冠状病毒中RDRP的高度保存，对其在体外活动的改进知识可以为药物开发或重新利用提供有用的信息，以与SARS-COV-2和未来的大流行有关。