X射线相对比微型计算机断层扫描使用同步加速器辐射(SR PHC-µCT)具有独特的3D成像功能,可视化人脑的微结构。其对未染色软组织的适用性是积极研究的领域。从组织块中获取图像,而无需按照常规组织学中的要求将其分为薄片,从而可以研究其自然3D空间中的微观结构。本文提出了一个详细的逐步指南,用于成像未染色的人脑组织,该分辨率是在Syrmep上实现的一些SR PHC-µCT的分辨率,即Elettra的硬X射线成像光束线,Italian同步器设施。我们介绍了血管和神经元如何出现在以5μm和1 µm Voxel大小获得的图像中出现的示例。此外,该提议的方案可用于研究重要的生物底物,例如神经苯胺或链氨基链酰胺。可以使用经典组织学方法验证的特定定制的分割工具来研究其空间分布。总而言之,使用所提出的方案(包括数据获取和图像处理)提供了SR PHC-µCT,提供了可行的手段,可以在3D中以细胞水平的细胞水平获取有关人脑解剖结构的信息。
先进的高维测定技术,例如转录组学和表观基因组学32分析,在分子级生物学研究中提供了显着的深度和广度1。尽管有33项优势,这些技术通常只专注于特定的分子变化,34缺乏在细胞状态下观察变化的能力,涉及许多35个复杂和未知过程。为了在细胞系统水平上获取信息,已经开发出高36个吞吐量成像技术,以通过对染色的细胞成像2-4来产生细胞37表型的有用曲线。但是,这些基于图像的技术也有38个局限性,因为它们通常集中在具有已知关联或39个假设的生物过程上,从而限制了现有知识5中的发现5。此外,包括高维测定和基于图像的技术在内的传统40种方法通常受到其复杂性和高成本的约束。为了克服这些问题,已提出该技术称为细胞绘画(CP),已被提议作为解决方案。具体而言,CP技术43涉及染色八个细胞成分,具有六种非常便宜且易于染料的六个细胞成分,并在荧光显微镜6上五个通道中成像,这很易于操作,45
■什么是淀粉样变性?淀粉样变性是一种蛋白质沉积疾病,其中特异性蛋白质蛋白质在病理上从其生理三级结构变成了以β-葡萄片为主的更线性形状。错误折叠的蛋白聚集物成寡聚物,最终形成不溶于细胞外的淀粉样蛋白纤维纤维细胞。均具有细胞毒性的循环低聚物,以及导致组织结构变形的Fi黑色,导致器官功能障碍。淀粉样蛋白fi黑色是刚性的,非分支结构,直径为7至10纳米米,在电子显微镜上具有特征性的外观。对刚果红色染色的亲密关系,与β式的床单结合,当在极化光学显微镜下进行视觉时,会产生病理学的“苹果绿”双折射。均与所有淀粉样蛋白fi的普遍是伴侣蛋白,例如血清淀粉样蛋白P(SAP)和糖胺聚糖以及钙。有30多种不同的前体蛋白与各种淀粉样蛋白有关,这些淀粉样蛋白是遗传性或非遗传性,局部或全身性的,具有不同的器官受累和预后。1–3
简介表皮生长因子受体 (EGFR) 的酪氨酸激酶抑制剂 (TKI) 作为一线疗法在治疗 EGFR 突变型肺癌患者时已显示出生存改善。厄洛替尼是一种 EGFR TKI,也是全球首个获批的针对局部晚期或转移性非小细胞肺癌 (NSCLC) 的靶向治疗药物 (1, 2)。在携带致敏 EGFR 突变的 NSCLC 患者中,EGFR TKI 治疗的反应率为 60%–80% (3–5)。这使得相当一部分癌症对治疗无反应,因此前瞻性地确定 EGFR TKI 反应和耐药的预测因子在临床上非常重要。作为常规临床程序,H&E 染色的病理组织切片可以高分辨率提供详细的肿瘤形态学特征。多项研究已经探讨了临床定义的病理亚型与靶向治疗反应之间的关系。Kim 等人报告称,在肺腺癌 (LUAD) 患者中,主要的乳头状亚型可预测 EGFR TKI 敏感性 (6);Miller 等人报告称,支气管肺泡病理亚型(可能代表当今几种不同的生长模式)与 EGFR TKI 相关
,我们使用Samson的解决方案在Fuchs-Rosenthal(Fuchs-Rosenthal(Fuchs-Rosenthal)计数室中,在新生儿部的样品中进行了总白细胞计数。萨姆森的解决方案是细胞计数染色,主要成分是冰乙酸和洋红色染料。该组合物允许红细胞(RBC)融合和单核(MN)和包括分化的多形核(PMN)细胞。我们使用细胞增生技术制备了曙红 - 硫素染色的载玻片,并在光学显微镜下检查了它们。MN和PMN细胞的差异进行了亚分析评估。使用体液(BF)模式,同时在血液分析仪SYSMEX XN-1000(Sysmex,Cobe,Japan)上同时分析了本地CSF样品。SYSMEX XN-1000是一种独立的ana-ana-lyzer,它结合了电障碍,激光光散射和染料结合进行测量。该分析仪通常用于在全血模式下从全血中计数元素。但是,SYSMEX XN-1000可以在BF模式下使用,以测量除全血以外的其他体液。这项工作得到了比尔森大学医院和医学院伦理委员会的批准,参考号为62/23。从患者的亲戚那里获得书面知情同意书,以在医学期间出版。
在彗星测定中的摘要中,如果细胞被X X倍化为Genoto XIC剂,则在单细胞凝胶电泳后形成尾巴。these尾巴包括DNA单链断裂(SSB)和双链断裂(DSB)的混合物。ho w e v er,这些两种类型的链断裂无法使用具有Con V en ventionDNA染色的彗星测定方案来区分。由于DSB对单元格是有问题的,因此如果可以在同一彗星中差异化SSB和DSB,则将很有用。为了能够区分SSB和DSB,我们为聚合酶辅助的DNA损伤分析(PADDA)设计了一种协议,可与Flash Comet协议或固定单元格结合使用。通过使用DNA聚合酶I将SSB和末端脱氧核苷酸转移酶标记为具有荧光团标记的核苷酸的DSB。在此,TK6细胞或HACAT细胞暴露于过氧化氢(H 2 O 2),电离辐射(X射线)或DNA切割酶,然后遵循彗星方案,以实施彗星方案。p adda提供了更广泛的检测范围,未发现的DNA链断裂的未发现的未发现。
胃肠道间质瘤 (GIST) 是最常见的肉瘤,其特征是 KIT 蛋白过度表达,肿瘤通常由致癌 KIT 突变驱动。针对性抑制 KIT 彻底改变了 GIST 治疗,开启了治疗实体恶性肿瘤的精准医疗时代。在这里,我们首次使用 KIT 特异性 DNA 适体进行 GIST 的靶向标记。我们发现抗 KIT DNA 适体以 KIT 依赖的方式结合细胞,并且在体外对 GIST 细胞标记具有高度特异性。在功能上,KIT 适体以类似于 KIT 单克隆抗体染色的方式结合细胞外 KIT,并在体外在细胞内运输。KIT 适体以突变不可知的方式结合分离的原代人类 GIST 细胞,因此标记了具有 KIT 和 PDGFRA 突变的肿瘤。此外,KIT 适体还特异性标记了完整的人类 GIST 组织(体外),以及小鼠腹膜异种移植,灵敏度高。这些结果代表了首次使用基于适体的方法在体外和体内进行 GIST 的靶向检测。
摘要简介:伤口愈合涉及生长因子和细胞因子的相互作用,以恢复组织完整性。褪黑激素和MSC衍生的外泌体具有抗炎作用,增强重新上皮化,血管生成并调节胶原蛋白重塑。作品的目的:将28只男性白化大鼠平均分为4组:I组(对照)未能。其他组,创建了全厚性皮肤圆形伤口。第二组,伤口未经治疗。 第三组(褪黑激素治疗),褪黑激素溶解在盐水中,每天以5 mg/kg的剂量注释14天。 IV组(外泌体治疗),外泌体在200μlPBS中以200μgMSC-诊断的剂量下皮下注射四个部位,在伤口周围的四个部位处注射。 14天后,通过组织学检查皮肤切片(通过光和电子显微镜)。 。 结果:I组的组织学和超微结构检查与正常皮肤组织学结构相似。 II组的H&E染色切片表明伤口部位的皮肤外层造成破坏,以及炎症细胞的显着存在和新的血管形成。 此外,Masson染色的部分揭示了皮肤深层层的薄胶原纤维。 II组皮肤切片的电子显微镜分析揭示了不存在Hemidesmosomal连接,以及对基底膜的破坏以及脱骨小体介导的细胞间连接损失。 结论:褪黑激素和MSC衍生的外泌体对皮肤伤口愈合具有改善作用。第二组,伤口未经治疗。第三组(褪黑激素治疗),褪黑激素溶解在盐水中,每天以5 mg/kg的剂量注释14天。IV组(外泌体治疗),外泌体在200μlPBS中以200μgMSC-诊断的剂量下皮下注射四个部位,在伤口周围的四个部位处注射。14天后,通过组织学检查皮肤切片(通过光和电子显微镜)。。结果:I组的组织学和超微结构检查与正常皮肤组织学结构相似。II组的H&E染色切片表明伤口部位的皮肤外层造成破坏,以及炎症细胞的显着存在和新的血管形成。此外,Masson染色的部分揭示了皮肤深层层的薄胶原纤维。II组皮肤切片的电子显微镜分析揭示了不存在Hemidesmosomal连接,以及对基底膜的破坏以及脱骨小体介导的细胞间连接损失。结论:褪黑激素和MSC衍生的外泌体对皮肤伤口愈合具有改善作用。褪黑激素和MSC衍生的外泌体成功地恢复了伤口部位正常的皮肤组织学结构,而接受的外泌体治疗组有了更大的改善。
f i g u r e 1 vwf和VWFPP静止血小板的定位。(a,b)静止的血小板被染色为α-微管蛋白(洋红色),vWF(红色,小鼠单克隆抗VWF,clb-rag20)和(a)vwfpp(green)或(b)纤维化(a)。(c)为α-微管蛋白(洋红色),vWF(红色,兔多克隆抗VWF,dako)和sparc(绿色)染色的静止血小板。成像是通过SIM进行的,显示了代表性的高分辨率单平面,宏伟的图像。黄色正方形内包含单个颗粒的区域在右侧(黄色正方形)上放大。比例尺表示1μm。 (d,e)VWF与α颗粒蛋白VWFPP,SPARC和纤维化的共定位分析。(d)Pearson的共定位系数(PCC)和(E)对单个血小板图像(VWF-VWFPP n = 239,VWF-SPARC N = 199,VWF-FIBLIN N = 73)的成对曼德斯的共定位系数(MCC),与VWF相比,VARC与VWF相比,vwf-fibrin n = 199,vwf-sparc n = 199,vwf-fibrin n = 73)bars表示为95%顺式的平均值,平均PCC和MCC值在图的顶部。SIM,结构化照明显微镜; Sparc,分泌的蛋白质酸性和富含半胱氨酸; vwf,von Willebrand因素; VWFPP,VWF丙肽。
抽象背景:公共公墓是埋葬尸体的区域,因此发生主动分解。可能发现的分解细菌之一是脂肪性细菌,因为人体占21,33-32,51%的脂质。尚未找到印度尼西亚墓地的脂肪性细菌的探索,因此需要进行这项研究。这项非实验研究旨在从Surakarta的Pracimaloyo公墓选择和鉴定脂解细菌分离株。方法:总共选择了使用Tributyrin培养基选择其脂解活性的36种细菌分离株。脂解指数确定脂溶作用。基于殖民形态和革兰氏染色的脂肪性细菌鉴定。结果:研究表明,22.2%(8个分离株)显示脂解阳性,最大的脂解指数(LI)值为2.5(分离株p36)。细菌菌落是圆形的,具有整个边缘,平坦的海拔,是黄色或白色。gram染色结果表明,分离的是一组革兰氏阴性细菌,形式是球菌的形式。结论:这项研究的结论表明,来自pracimaloyo公墓的细菌分离株具有潜在的脂解活性,这很可能来自假单胞菌和克雷伯氏菌属。关键字:公墓;透明区域;脂溶液;筛选; Tributyrin琼脂