目的。根据其心理情感状态,分析乌克兰武装部队武装部队口腔液体中局部免疫的变化。材料和方法。对乌克兰的22名军事液体患者进行了口服液体的局部口服免疫力研究,该患者患有慢性卡塔尔哈尔牙龈炎(主要组),在11名患有慢性卡他的牙龈炎的平民专业患者(比较组)和16个具有健康健康的个体(对照组)中(对照组)。此外,主要组的军事患者根据其心理情绪状态分为4个亚组。通过Mancini等人的方法进行了口服流体中SIGA的决定。使用光电分解法测量患者口服流体的溶菌酶活性。通过竞争性酶联免疫吸附测定法确定了研究组患者口服液中皮质醇的含量。结果。由于实验室研究的结果,发现乌克兰武装部队的慢性卡塔哈尔牙龈炎患者在口服液体中Siga的含量(P <0.01)(P <0.01)和莱s溶酶活性(P <0.05)降低了SIGA的含量(p <0.05),而在Cortisol的数据中,SIGA的含量降低了1.2倍。比较组。结论。同时,随着主要组患者心理情绪状态的恶化,免疫学参数的失衡加深了,这通过口服液中皮质醇水平的升高证实。Thus, summing up the data of laboratory studies, it can be stated that patients of the main group (mili tary personnel of the Armed Forces of Ukraine) with chronic catarrhal gingivitis have a more pronounced weakening of local oral immunity, which is manifested by a decrease in sIgA levels and lysozyme activity, compared with similar data in the comparison group (patients of civilian professions) with chronic catarrhal牙龈炎。
这项研究旨在评估补充益生菌的饮食(芽孢杆菌),益生元(壳聚糖)和合成生物学在120天内的生长性能,先天免疫系统,抗氧化剂水平,肠道社区和粮食质量。实验性鱼(15.5±0.352g)随机分布到12个矩形聚乙烯储罐中,每个储罐60鱼。测试了四种重复的四种治疗方法:对照,益生菌(Sanolife®Pro-F,Pro),益生元(壳聚糖,PRE)和合成生素(益生菌和壳聚糖的组合,SYN)。结果表明,在益生菌治疗中,溶解的氧浓度显着增加和pH水平提高。与对照组相比,所有处理中的联合氨(NH3)水平均降低。益生元补充的饮食显着改善了最终体重,最终长度,体重增加,状况因子,平均每日体重增加,特定的生长速度和存活率。在补充益生菌的所有处理中,血清溶菌酶活性和一氧化氮水平均高。此外,益生菌组中肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)酶水平明显更高,而马发二醛(MDA)水平降低。益生菌的添加和合成生的存在增加了四个月的鱼类肠和池塘水的总细菌数量。病原性气管疏松性仅在对照组的水中鉴定出来。大肠杆菌和沙门氏菌。16S rDNA基因测序在益生菌处理的水中鉴定出了sphaericus sphaericus,在对照处理的肉体中鉴定出cile胶菌菌。添加芽孢杆菌菌株和壳聚糖分别增强了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的生长和健康。
摘要。最近,科学家和临床医生对利用唾液作为诊断媒介的非侵入性诊断方法的兴趣越来越大。特定唾液微元素水平的变化在龋齿,牙周疾病加剧,局部免疫疾病中起着至关重要的作用。由于入口门处的免疫系统的状态与急性呼吸道感染的频率有关,因此我们的研究旨在探索唾液研究不足的毒性微元素的影响与经常性呼吸道感染儿童的局部免疫力的指标。目的:研究小学时代儿童唾液中有毒和潜在有毒金属的水平,并分析其与口腔局部免疫标记物的相关性。这项研究涉及30名5-7岁的儿童,患有复发性呼吸道感染(主要组)和10名经历过发作性急性呼吸道感染(对照组)的实际健康儿童。主要组中急性呼吸道感染发作的数量为7.64(1.02)(M(SD)),而在对照组中为1(0.63)。这项研究是根据赫尔辛基医学协会宣布涉及人类受试者的医学研究的伦理原则进行的。唾液样品的有毒金属水平,包括铝(Al),铅(Pb),钡(BA),thallium(TL),镉(CA),腹膜(SR),Bismuth(bi),bismuth(bi)和潜在有毒金属和潜在有毒金属,例如银(AG),胆汁(AG),壁炉(ga)和Indium(ga)和Indium(ga)和Indium(in Indium)。测量。在测试系统的帮助下,使用微板块的光度计(HIPO MPP-96)测量了分泌性IgA和溶菌酶作为局部免疫力的指标。对主要
t eChniquers i n M Olecular b Iology - 用于P LASMID DNA I求解DNA分离的方法:分子生物学技术在复杂基因组分析中的应用取决于准备纯质粒DNA的能力。大多数质粒DNA隔离技术有两种口味,简单 - 低质量的DNA制剂,更复杂,耗时但高质量的DNA制剂。对于许多DNA操作,例如限制酶分析,亚克隆和琼脂糖凝胶电泳,简单的方法就足够了。大多数DNA测序,PCR操作,转换和其他技术都需要高质量的制剂。大多数方法都以大量细菌细胞开头,这些细菌细胞包含选择的质粒并离心至颗粒。然后,细胞在基本条件下通过洗涤剂钠硫酸盐(SDS)的混合物裂解,或添加蛋白酶(溶菌酶)以削弱和破坏宿主细胞壁。这两种方法的结果都导致紧凑型超螺旋质粒DNA分子释放到溶液中。下一个问题是将RNA,基因组DNA和其他细胞成分与细胞分开。如何完成此操作取决于所使用的方法。碱性裂解制剂是隔离少量质粒DNA的最常用方法,通常称为小型质子。此方法将SDS用作弱洗涤剂,以在NaOH存在的情况下使细胞变性,该清洁剂可将细胞壁和其他细胞分子水解起来。高pH值通过添加乙酸钾进行中和。这将质粒DNA和RNA留在溶液中。钾对样品有额外的影响。钾离子与SD相互作用,使其成为不溶性的洗涤剂。SD会很容易沉淀,并且可以通过离心分离。这样做的不溶性SDS会捕获较大的基因组DNA并将其从上清液中清除。通常通过添加RNASEA消化去除RNA。这仅留下溶液中的蛋白质,碳水化合物和RNA核苷单体。原发性醇(例如乙醇或丙醇)用于沉淀DNA。这是通过对水的重新排序来实现的,使DNA聚集体并变得不溶性。结果是一种纯净的DNA颗粒,可以重悬于温和缓冲的溶液或水中。建议使用大量培养物中煮沸的微型REIPREP来制备少量的质粒DNA。虽然此方法非常快,但产生的DNA质量低于碱性裂解小型培训的质量。在碱性裂解小型方法中,溶菌酶用于水解负责使细菌细胞壁具有其强度的广泛交联蛋白。然后将细胞煮沸以进一步使蛋白质结染并破坏细胞壁。然后用酒精沉淀质粒DNA。这两种方法都将仅产生几µg质粒DNA。对于纯度较高的较大数量,需要许多其他步骤。通过在非常高的重力力下在氯化丘密度梯度中离心,根据其密度分离其密度。氯化剖腹梯度产生的高质量质粒DNA不含大多数污染物,但使用溴化乙锭来识别DNA(潜在的诱变剂),并且需要长时间的超级离心运行以建立密度梯度。该方法是通过使用碱性裂解方法裂解细胞的,并在350,000 x g下离心14小时。首先,将CSCL梯度在小管中制成,并用溴化乙锭添加DNA。在旋转时,DNA将向下迁移,直到达到与质粒相同的CSCL的密度。因此,较大的DNA将与紧凑的质粒DNA分离。用紫外线可视化质粒带,用针切除,然后重复该过程。您可以看到,这是一种非常复杂且乏味的方法,用于隔离DNA,通常不经常在柱分离的出现中使用。现在存在一种更流行的方法,它利用了质粒DNA的物理特性和碱性裂解方法中发现的污染物的差异。核酸是负电荷的,因此可以使用阴离子交换
概述 本文档介绍了 Enhertu (fam-trastuzumab deruxtecan-nxki) 的使用。Enhertu 是 HER2 靶向抗体和拓扑异构酶抑制剂偶联物,可选择性地将化疗药物递送至 HER2 过表达的肿瘤细胞。肿瘤细胞内的溶菌酶对药物进行内化和细胞内连接体裂解,导致 DNA 损伤和细胞凋亡。乳腺癌是一种由恶性(癌性)细胞组成的肿瘤,这些细胞开始在乳房中生长,并可能扩散(转移)到周围组织和身体的其他部位(美国癌症协会,2016 年)。乳腺癌通常采用多种方式治疗,包括手术、放射疗法、化疗和激素疗法的组合(美国国家癌症研究所,2019 年)。肿瘤的临床和病理特征会影响预后和治疗选择。其中之一包括人类表皮生长因子受体 2 基因 ERBB2,通常称为 HER2。该基因的其他名称包括 NEU、Her-2、HER-2/neu 和 c-erb B2。最初在冷冻乳腺肿瘤样本中检测到 HER2 基因。HER2 基因的扩增后来与乳腺癌样本中蛋白质水平的过度表达相关。每年约有 255,000 名患者被诊断出患有浸润性乳腺癌,其中约五分之一的病例被归类为 HER-2 阳性。含有曲妥珠单抗和第二种非特异性细胞毒性药物的抗体药物偶联物能够更特异性地靶向 HER-2 癌细胞并发挥其抗肿瘤作用。Kadcyla 和 Enhertu 是目前市场上仅有的两种 HER2 导向抗体药物偶联物。Kadcyla 与微管蛋白抑制剂 emtansine 相关,而 Enhertu 与拓扑异构酶抑制剂 DXd 相关。FDA 批准的 Enhertu 适应症包括:
概述 本文件介绍了 Enhertu (fam-trastuzumab deruxtecan-nxki) 的使用。Enhertu 是 HER2 靶向抗体和拓扑异构酶抑制剂偶联物,可选择性地将化疗药物递送至 HER2 过表达的肿瘤细胞。肿瘤细胞内的溶菌酶将药物内化并裂解成细胞内连接体,导致 DNA 损伤和细胞凋亡。乳腺癌是一种由恶性(癌性)细胞组成的肿瘤,这些细胞开始在乳房中生长,并可能扩散(转移)到周围组织和身体的其他部位(美国癌症协会,2016 年)。乳腺癌通常采用多种方式治疗,包括手术、放射疗法、化疗和激素疗法的组合(美国国家癌症研究所,2019 年)。肿瘤的临床和病理特征会影响治疗的预后和选择。其中之一包括人类表皮生长因子受体 2 基因 ERBB2,通常称为 HER2。该基因的其他名称包括 NEU、Her-2、HER-2/neu 和 c-erb B2。最初,HER2 基因是在冷冻乳腺肿瘤样本中检测到的。后来,HER2 基因的扩增与乳腺癌样本中蛋白质水平的过度表达相关。每年约有 255,000 名患者被诊断出患有浸润性乳腺癌,其中约五分之一的病例被归类为 HER-2 阳性。含有曲妥珠单抗和第二种非特异性细胞毒性药物的抗体-药物偶联物能够更具体地靶向 HER-2 癌细胞并发挥其抗肿瘤作用。Kadcyla 和 Enhertu 是目前市场上仅有的两种 HER2 靶向抗体-药物偶联物。Kadcyla 与微管蛋白抑制剂 emtansine 相关,而 Enhertu 与拓扑异构酶抑制剂 DXd 相关。FDA 批准的 Enhertu 适应症适用于治疗
摘要:膜是化学净化、生物分离和海水淡化的关键部件。传统的聚合物膜普遍存在渗透性和选择性之间的权衡,这严重阻碍了分离性能。纳米多孔原子薄膜(NATM),如石墨烯 NATM,有可能打破这种权衡。由于其独特的二维结构和潜在的纳米孔结构可控性,NATM 有望通过分子筛获得出色的选择性,同时实现极限渗透性。然而,石墨烯膜的概念验证演示和可扩展的分离应用之间存在巨大的选择性差异。在本文中,我们提供了一种可能的解决方案来缩小这种差异,即通过两次连续的等离子体处理分别调整孔密度和孔径。我们证明,通过缩小孔径分布,可以大大提高石墨烯膜的选择性。首先应用低能氩等离子体来使石墨烯中高密度缺陷成核。然后利用受控氧等离子体选择性地将缺陷扩大为具有所需尺寸的纳米孔。该方法具有可扩展性,制备的具有亚纳米孔的 1 cm 2 石墨烯 NATM 可以分离 KCl 和 Allura Red,选择性为 104,磁导率为 1.1 × 10 −6 ms −1 。NATM 中的孔可以进一步从气体选择性亚纳米孔调整到几纳米尺寸。制备的 NATM 在 CO 2 和 N 2 之间的选择性为 35。随着扩大时间的延长,溶菌酶和牛血清白蛋白之间的选择性也可以达到 21.2,渗透性比商用透析膜高出大约四倍。这项研究提供了一种解决方案,可以实现孔径可调的 NATM,其孔径分布较窄,适用于从气体分离或脱盐中的亚纳米到透析中的几纳米的不同分离过程。关键词:纳米多孔石墨烯膜、纳米多孔原子级薄膜 (NATM)、蛋白质选择性膜、等离子蚀刻、纳米孔工程
细胞,并重悬于裂解中(20 mM Tris,500 mM NaCl和10 mM Imidazole,pH 8.0),并补充了“完整的蛋白酶抑制剂鸡尾酒”(Merck,CAT,CAT#11697498001)。重悬于重悬酶后,苯并酶核酸酶(默克,CAT#E1014-5KU,每40 ml裂解物10μl)和溶菌酶(默克,CAT#10837059001,1 mg/ml裂解物),并加入冰上30分钟。细胞在Avestin乳液C-5均质器(15-20 kpsi)上被破坏,并通过离心(15,000 g,4°C,15分钟)去除不溶性细胞碎片。在10°C下进行所有随后的色谱步骤。清除的裂解物被加载在5 ml Histrap FF柱上(Cytiva,Cat#17525501)。将树脂用10列的洗涤液(裂解效果)洗涤(但使用20 mM咪唑)洗涤,并用10列的洗脱体洗脱蛋白(裂解效果,但用250毫米咪唑)洗脱。馏分合并,并在透析中稀释至25 mL(250 mM KCl,20 mM HEPES和1 mM DTT和1 mM EDTT和1 mM EDTA,pH 8.0)。使用透析膜管透析在10°C下透析,使用分子量切割为6-8 kDa(光谱/POR标准级再生纤维素,宽23毫米)的透析膜管。1-2小时后,将透析液替换,透析继续过夜。第二天,将透析样品在10 mM HEPE(pH 8)中稀释了两倍(pH 8),并立即加载在5 mL HITRAP肝素HP柱(Cytiva,CAT,CAT#17040601)上,并用Bu效率a(20 mM Hepes,150 mm Hepes,150 mm KCl,pH 8.0)。关注的分数被汇总并上升。将树脂用2柱体积洗涤,并使用bu虫B(20 mM Hepes,2m kcl,pH 8.0)的线性梯度在12柱体积上洗脱蛋白质。含量为2 mL;通过在120 mL SuperDex200凝胶滤光管(Cytiva#28989335)上注射上浓缩样品,以50 mM磷酸钠,300 mM NaCl,300 mM NaCl,0.1 mm EDTA,pH 7.5 AS分离bu e e e e e e e e e e o 进行了最终的色谱步骤。进行了最终的色谱步骤。
本公告是在关键数据的自然细胞生物学中最近出版的,进一步阐明了MAF生物标志物周围的生物学。INBIomotion联合创始人Roger Gomis教授Roger Gomis教授领导的IRB巴塞罗那的一支团队在此出版物中揭示了MAF基因扩增会增加乳腺癌患者转移风险的机制。这一发现是理解转移分子基础的关键步骤,并且对治疗具有相关的临床意义。关于Inbiomotion Inbiomotion是IRB巴塞罗那和ICREA的衍生作品,该衍生作用是由Roger Gomis教授于2011年成立的,此后将MAF基因鉴定为预测乳腺癌中骨转移的生物标志物。Inbiomotion基于MAF基因扩增(MAFTest®)的检测开发了一种诊断套件,以促进精确医学并改善乳腺癌患者的治疗。该公司拥有200多项专利和专利申请,涵盖其专有MAFTest®鱼,并在早期乳腺癌患者的辅助治疗中使用双膦酸盐。公司的主要投资者是YSIOS Capital,Caixa Capital Risc,Alta Life Sciences和Vila Casas Foundation。有关更多信息,请访问www.inbiomotion.com。关于Spa Farma Spa Farma是一家家族拥有的公司,由创始人Rodolfo Ferrari的孙女AliseéMattaEchaurren拥有。公司的遗产深深植根于长期以来的创新和成功遗产。Spa Farma成为战后不久的第一家在意大利生产和商业化青霉素的公司之一,创造了历史。由于与亚历山大·弗莱明爵士的科学合作,这项成就之后是溶菌酶的发展。在60年代,该公司将其业务扩展到其他治疗领域,目前的主要领域是:骨/疼痛,心脏代谢,肿瘤学和肾脏病。最近,该公司在西班牙和葡萄牙建立了一个会员,请访问www.spafarma.com。关于MAF基因MAF(间充质肌动纤维骨肉瘤基因,AP-1家族的转录因子)在原发性癌症肿瘤中放大。它与转移的增加有关,尤其是骨转移。MAF的转录控制基因,例如PTHRP,该基因调节了与转移相关的细胞过程,例如生存,起始,代谢重新布线和对骨髓的粘附 -
arrowia lipolytica 属于子囊菌门、酿酒菌亚门和双足菌科 (1)。除了工业用途 (2) 之外,Y. lipolytica 还广泛存在于食品、环境和动物中 (1)。由于其能够在 32°C 以上不稳定地生长,因此通常认为该菌种可安全用于工业用途 (1)。Yarrowia lipolytica 是一种机会性病原体,可引起侵袭性念珠菌病 (3)。在体外,该菌种被认为对氟康唑敏感 (4)。第一个 Y. lipolytica 基因组 (CLIB122) 于 2004 年发布 (5)。我们报告了对氟康唑有抗性的 Y. lipolytica 临床分离株的基因组草图,该分离株是从溃疡性结肠炎手术后的血培养中采集的。有趣的是,尽管之前曾接触过唑类药物,但使用梯度浓度试纸法(Etest;bioMérieux),该菌株的氟康唑 MIC 为 0.256 mg/mL。患者成功地用卡泊芬净治疗。该菌株在 35°C 的显色琼脂平板(CAN2;bioMérieux)上生长,并使用 Vitek 基质辅助激光解吸电离 - 飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS) 仪器(bioMérieux)进行鉴定。在溶菌酶细胞壁消化后,使用 QIAmp DNA minikit(Qiagen)提取基因组 DNA。使用 Illumina DNA 制备标记试剂盒(Illumina)构建文库。简而言之,使用珠状转座子技术和集成 DNA 技术 (IDT) 的 Illumina DNA/RNA 独特双重 (UD) 索引集将 30 ng 总 DNA 片段化并进行索引。使用 Qubit 高灵敏度试剂盒 (Thermo Fisher Scienti ) 对文库进行扩增、纯化和定量。最后,将 9 pM 汇集和变性文库放入 2 250-bp v2 试剂盒 (Illumina) 中,并使用 MiSeq 仪器 (Illumina) 进行测序。使用 CLC Genomics Workbench v22.0 (Qiagen) 中的 Trim Reads v2.5 和 De Novo Assembly v1.5 工具对原始读取进行修剪、组装成重叠群并进行搭建。使用覆盖率与长度图丢弃覆盖率为 , 10 且长度为 , 500 bp 的重叠群 (6)。使用 QUAST v5.0.2 对最终的 scaffold 集进行质量分析 (7)。总基因组大小为 20,255,408 bp,分布在 521 个 scaffold 上(覆盖率为 100 ),N 50 值为 105 kbp(最长 scaffold,397 kbp),GC 含量为 49.03%。AUGUSTUS v3.4.0 (8) 使用白色念珠菌训练数据集预测了 6,151 个蛋白质编码基因,使用 tRNAscan-SE 2.0 检测到了 484 个 tRNA 基因 (9)。使用 BUSCO v5.3.2 和 saccharomycetes_odb10 谱系数据集 (10) 估计基因组完整性为 95.3%。平均核苷酸同一性 (ANI) 计算