重瓣花表型因其在各种植物中的吸引力而被人类所选择,并且对观赏植物市场具有巨大的商业价值。在本研究中,我们调查了康乃馨、矮牵牛和玫瑰中显性重瓣花性状的遗传决定因素,并鉴定了 TARGET OF EAT (TOE) 型基因的突变等位基因,其特征是 miR172 靶序列和编码蛋白质 C 末端部分的破坏。尽管这些真双子叶植物之间存在系统发育距离,它们在白垩纪早期分化,但携带这些突变的直系同源基因都属于单个 TOE 型亚组,我们将其命名为 PETALOSA (PET)。同源性搜索使我们能够在其他各种物种中鉴定出 PET 序列。为了证实自然突变的结果,我们使用 CrispR-Cas9 在烟草 PET 基因的 miR172 靶位点内诱导病变,这导致了多余花瓣状结构的形成。本研究描述了具有经济价值的观赏物种中的 pet 等位基因,并提供了关于识别和改造 PET 基因以获得不同植物中理想的重花特性的可能性的证据。
基于蛋白质的疗法可以激活适应性免疫系统,导致中和抗体的产生以及细胞毒性 T 细胞介导的治疗细胞清除。本文表明,连续使用 CRISPR 相关蛋白 9 (Cas9) 和腺相关病毒 (AAV) 的免疫正交直系同源物可以避开适应性免疫反应,并能够通过重复给药实现有效的基因编辑。我们比较了 284 种 DNA 靶向和 84 种 RNA 靶向 CRISPR 效应物以及 167 种 AAV VP1 衣壳蛋白直系同源物与 I 类和 II 类主要组织相容性复合体蛋白的总序列相似性和预测结合强度。我们预测 79% 的 DNA 靶向 Cas 直系同源物不会产生交叉反应性免疫反应,我们在小鼠中对三种 Cas9 直系同源物进行了验证,但预计 AAV 血清型之间存在广泛的免疫交叉反应。我们还表明,在体内有效
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