Thermo Scientific Genejet基因组DNA纯化试剂盒通过从200 µL血液中分离基因组DNA和5 mg的哺乳动物组织,遵循所述方案来获得资格。纯化的基因组DNA的A260/280比为≥1.7。在琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色后,看到一个超过30 kb的单个带。通过限制酶对单拷贝基因和消化的PCR扩增来评估基因组DNA的功能质量。
近年来,氧化石墨烯纳米片 (GO) 被广泛研究用作水中多种有机分子和重金属离子的吸附剂。1–3 与其他碳基纳米材料(如标准工业吸附剂活性炭)相比,丰富的表面化学基团加上较大的吸附表面积,使其对几类污染物(包括新兴污染物)的吸附动力学和效率更快。4 这些污染物因其在水体中的持久性、流动性以及健康和环境毒性而备受关注。5–7 GO 纳米片的羧基和羰基在有机分子的吸附效率中起着重要作用,因为它们能够形成氢键和金属离子络合。2,3 此外,可以利用此类表面基团的化学改性来提高选择性吸附能力。例如,据报道,聚乙烯亚胺 (PEI) 改性是一种成功的策略,可以利用 p 堆积、络合和
电话:914-945-3070(SETNA 为 603-548-7870)电子邮件:kwlee@us.ibm.com(SETNA 为 eschulte@set-na.com)摘要锡合金被广泛用作电子互连的焊料。锡焊料表面往往有锡氧化物,需要将其去除以提高互连回流工艺(如倒装芯片连接)的产量。传统上,使用强助焊剂去除这些氧化物,但此工艺的缺点是会留下助焊剂残留物,这可能导致底部填充分层或需要高成本的清洁工艺。随着焊料凸块体积和凸块间间距的减小,这些问题在制造过程中变得更加难以处理。我们建议使用大气等离子体来减少凸块表面的这些氧化物,以便使用非常轻的助焊剂,甚至根本不使用助焊剂。此工艺具有等离子表面处理的优点,而没有真空等离子工艺的成本和产量损失。这种工艺可以提高产量和产量,同时降低成本。我们描述了一个实验,其中锡箔用还原化学大气等离子体工艺处理,然后用X射线光电子能谱 (XPS) 和俄歇电子能谱 (AES) 进行分析。AES 深度剖面分析表明,等离子体显著降低了氧化锡的厚度。没有证据表明任何蚀刻底层元素锡。这些结果表明,氧化锡被还原为金属锡,而底层锡金属没有被蚀刻。在另一个使用带有 SnAg 焊料的半导体芯片的类似实验中,XPS 结果表明氧化锡再次被还原为金属锡。在倒装芯片连接中,使用这种大气等离子体处理的芯片的连接工艺实现了高互连产量,即使在质量差且氧化过度的焊球的情况下也是如此。据我们了解,以前没有报道过在环境中用大气等离子体对氧化锡进行纯化学还原。关键词无铅焊料倒装芯片连接、氧化锡还原、大气等离子体和半导体互连
摘要:CRISPR-Cas9技术的出现彻底改变了基础和转化生物医学研究。为了使Cas9核酸酶发挥基因组编辑活性,通常将源自猿猴病毒40(SV40)T抗原的核定位信号(NLS)作为基因融合体安装,以引导细胞内的Cas9蛋白进入细胞核。值得注意的是,先前的研究表明,多个SV40 NLS融合可以提高Cas9衍生的基因组编辑和碱基编辑工具的靶向活性。此外,多NLS融合可以以组成性表达和直接递送Cas9-引导RNA核糖核蛋白(RNP)复合物的形式增加Cas9的细胞内活性。然而,NLS融合与细胞内Cas9活性之间的关系尚不完全清楚,包括活性对NLS融合数量或组织的依赖性。在本研究中,我们构建并纯化了一组在蛋白质的 N 端或 C 端含有 1 至 4 个 NLS 重复序列的化脓性链球菌 Cas9 (SpCas9) 变体,并系统地分析了多 NLS 融合对 SpCas9 RNPs 活性的影响。我们发现,多 NLS 融合可以提高脂质转染或核转染 Cas9 RNPs 的细胞内活性。重要的是,多 NLS 融合可以增强 SpCas9 RNPs 在原代细胞、干细胞/祖细胞和小鼠胚胎中的基因组编辑活性。
基于低成本、储量丰富且环保的亲和基质的“绿色”蛋白质纯化/固定工艺非常可取。未改性的二氧化硅基质非常适合这些需求。由于富含组氨酸的二氧化硅结合肽经常在生物淘选实验中分离,因此这项工作旨在评估使用裸露二氧化硅作为纯化/固定 His 标记蛋白质的替代基质的可行性。对纯化的 His6 标记 EGFP 进行的吸附和解吸研究表明,在测试条件下,不同大小和孔隙率的裸露二氧化硅颗粒会结合,并且可以使用含有 L-精氨酸/L-赖氨酸的环保洗脱液进行洗脱。未标记的 EGFP 不会与这些基质结合。小规模批量纯化方案使用 Davisil 643 或 646 级硅胶作为亲和基质,Tris 缓冲盐水洗脱液中含有 0.5 M L-精氨酸 (pH 8.5),仅经过一个洗脱步骤,便可从大肠杆菌裂解物中纯化出纯度高达 96% 的 His6-EGFP,回收率约为 70%。用二氧化硅结合肽 Car9 标记的 EGFP 以类似的纯度和产量回收。其他 His 标记蛋白也可以纯化到类似的纯度水平。该批量纯化方案的规模被证明是可扩展的。这些结果表明,未改性的二氧化硅基质可用于有效纯化 His 标记蛋白。由于双标记 His6-EGFP-Car9 的回收率仅为 30 – 55%,因此标签组合对于固定化目的而言是有利的。
摘要 简介 I/II 期临床试验表明,肝细胞生长因子 (HGF)/间质上皮转化 (MET) 通路靶向药物在抑制胃癌 (GC) 方面有效。进行了随机对照试验 (RCT),评估在化疗中添加抗 HGF/MET 药物 (rilotumumab 或 onartuzumab) 是否会改善晚期 GC 的生存结果,但得出的结论相互矛盾。因此,我们计划进行这项系统评价和荟萃分析,以综合有关抗 HGF/MET 药物联合化疗作为晚期 GC 一线治疗的疗效和安全性的证据。方法与分析将从开始到 2022 年 1 月 31 日对 PubMed、Embase 和 Cochrane 对照试验中心注册库进行系统搜索,不受语言限制,以确定探索抗 HGF/MET 药物联合化疗作为晚期 GC 一线治疗的比较疗效和安全性的 RCT。主要结果将是事件发生时间无进展生存期和总生存期,次要结果将是疾病控制率、总不良事件率和 3-5 级不良事件率。统计异质性将通过目视检查森林图来评估,并使用 I 2 统计数据进行测量。当异质性低时,将使用固定效应模型,否则将选择随机效应模型。出版偏倚将通过漏斗图来评估;亚组分析和敏感性分析将在正确的环境中进行。对于每个结果,我们将使用 Rev Man V.5.3 软件进行数据合成,并使用 GRADEpro 软件编制“研究结果摘要”表。道德与传播由于本研究不会收集个人数据,因此无需获得道德批准。预计结果将在会议上和通过在同行评审期刊上发表来传播,对方案的任何调整都将在最终报告中清楚地记录和解释。 PROSPERO 注册号 CRD42020177404。
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20mM Tris,150mM NaCl,pH8.0,含有1mM EDTA,1mM DTT,0.01%SKL,5%海藻糖和Proclin300。 剂型 : 冻干粉 标签 : N端His和GST标签 来源 : 大肠杆菌 生物体 : 褐家鼠(大鼠)
多核苷酸,正如普遍的分子,在生理上分布在所有组织中。内源性多核苷酸样衍生物通过受损或垂死的细胞以及在缺氧1-3的条件下在细胞外空间中在生理上释放。外源性多核苷酸是从饲养人类食用的鳟鱼的性腺DNA中提取的,并用高温灭菌程序纯化,以获得没有药理和过敏性蛋白质污染物1的纯成分1。多亏了采用的高级程序,本文档章节中讨论的高度纯化的多核苷酸是使用首字母缩写PN-HPT™(多核苷酸高度纯化的技术)。一家意大利公司Mastelli SRL获得了专利的PN-HPT™Technologies,并于2004年从意大利的Trout Gonad DNA介绍了第一家基于PN-HPT™的医疗设备。PN-HPT™基于Mastelli的最高标准生物技术的基于60年以上的精致的医疗设备,如今已在全球30多个国家 /地区分发。高科技PN-HPT™纯化程序消除了蛋白质污染物的所有风险。Mastelli是第一家根据世界级GMP和QA标准来控制整个生产链的公司,从鳟鱼育种和PN-HPT™纯化到可固定的PN-HPT-HPT™基于货架的医疗设备。多年来,PN-HPT™设备的演变一直稳定,直到最新®(专利EP 2 407 147 B1-具有生物再生的成分,