微流控装置与荧光显微镜相结合,提供了高分辨率和高内涵的平台,用于研究芽殖酵母酿酒酵母的单细胞形态、行为和复制衰老的动态过程。然而,大量记录的图像使得数据处理工作非常耗费人力和时间,而酵母复制寿命 (RLS) 是酵母衰老的主要标准。为了解决这一限制并进行无标记的 RLS 分析,引入了可通过微流控装置中的微电极轻松功能化的电阻抗谱 (EIS) 来监测芽殖酵母的细胞生长和分裂。在此,提出了一种集成 EIS 生物传感器的微流控装置,以单细胞分辨率进行酵母增殖的原位阻抗测量,从而识别子代从母代分离的瞬时事件。单个酵母细胞被可靠地固定在瓶颈状陷阱中以进行连续培养,在此过程中子细胞在水力剪切力的作用下有效地从母细胞中分离出来。每 2 分钟进行一次延时阻抗测量以监测细胞过程,包括出芽、分裂和解剖。通过使用 K 均值聚类算法首次分析自定义参数“解剖指标”,从 EIS 信号中准确提取了子细胞脱离母细胞的瞬时事件。从而验证了基于阻抗传感技术识别子细胞解剖事件。随着进一步的发展,这种集成电阻抗生物传感器的微流控装置在高通量、实时、无标记分析出芽酵母的衰老和 RLS 方面具有良好的应用前景。
研究我们的研究实验室通过开发3D生物工程的人类细胞培养模型来解决2D细胞培养模型的缺点,从而更好地模拟天然人类组织的微环境。我们目前的重点是乳腺癌和前列腺癌的骨转移,我们试图在3D和人类的小鼠模型中在体外和人类模型中重现人骨转移性细分市场。具体而言,我们使用将人类细胞和3D脚手架生物材料结合的先进组织工程技术来设计3D骨肿瘤微动物,以研究骨肿瘤微环境并有效评估当前和新型疗法。我们的跨学科研究是在生物启发的材料科学,组织工程和癌症生物学的边界。
三维 (3D) 细胞培养方法已广泛应用于多种细胞类型,包括干细胞,以精确调节细胞生物物理和生化微环境并控制各种细胞信号传导线索。因此,更像体内的微环境得以重现,特别是通过多细胞球体和类器官的形成,这可能产生更有效的疾病机制。最近,CRISPR Cas9 等基因组工程工具扩展了控制基因表达的技术范围,从而用细胞内控制元件补充了外部信号传导线索。因此,CRISPR Cas9 和 3D 细胞培养方法的结合增强了我们对几种疾病表型背后的分子机制的理解,并可能导致开发出可能更快、更有效地进入临床候选的新疗法。此外,使用 CRISPR Cas9 工具来拯救基因使我们更接近将其用作各种退行性疾病的基因治疗工具。在此,我们概述了 CRISPR Cas9 基因组编辑与 3D 球体和类器官细胞培养之间的联系,以更好地了解患者和非患者来源细胞中的疾病进展,并解决了必须克服才能广泛使用的潜在剩余差距。
澳大利亚产品信息 – VARIVAX ® 冷藏水痘病毒活疫苗(活水痘疫苗) 1 药品名称 活水痘疫苗 2 定性和定量成分 3 剂型 VARIVAX 冷藏 [水痘病毒活疫苗(Oka/Merck)] 是 Oka/Merck 减毒活水痘病毒株的冻干制剂。该病毒最初从患有野生型水痘的儿童身上获得,然后引入人类胚胎肺细胞培养物中,适应并在胚胎豚鼠细胞培养物中繁殖,最后在人类二倍体细胞培养物中繁殖(WI-38)。美国新泽西州拉威市 Merck Sharp & Dohme, LLC 研究实验室在不含外来因子的人类二倍体细胞培养物 (MRC-5) 中对水痘疫苗病毒进行了进一步的传代。按说明配制后,VARIVAX Refrigerated 是用于肌肉注射 (IM) 或皮下注射 (SC) 的无菌制剂。每 0.5 mL 剂量含:配制并在室温下储存 150 分钟(2 个半小时)时至少含 1350 PFU(空斑形成单位)的 Oka/Merck 水痘病毒。注射用粉针 VARIVAX Refrigerated 配制后为无色至淡黄色澄清液体。已知作用的辅料列表:这种疫苗可能含有微量的新霉素。有关辅料的完整列表,请参见第 6.1 节辅料列表。该产品还含有 MRC-5 细胞的残留成分和微量新霉素,以及来自 MRC-5 培养基的牛血清。该产品不含防腐剂。该产品的制造包括接触牛源材料。没有证据表明任何 vCJD(被认为是人类形式的牛海绵状脑病)病例是由任何疫苗产品的给药引起的。
脚注 1. IIV3 = 鸡胚和细胞培养三价灭活流感疫苗(注射剂);如需指代细胞培养疫苗,则使用前缀“cc”(例如 ccIIV3)。IIV4 = 鸡胚四价灭活流感疫苗(注射剂);LAIV4 = 鸡胚四价减毒活流感疫苗(鼻喷剂);RIV3 = 三价重组血凝素流感疫苗(注射剂)。 2. 自 2011 年 1 月 1 日或之后的服务申请起,CPT(现行程序术语)代码 90658 不再适用于 Medicare 支付;相反,应提交上述 HCPCS(医疗保健通用程序编码系统)Q 代码以进行支付。
1. 乳糜泻筛查静脉血样本 91492/96101 1 用于鉴定 DQ2 和 DQ8 单倍型的 HLA 91584/96301 3 从不同组织中提取 DNA 91365/93001 1 DNA 保存 91361/92801 1 2. 凝血因子(LEIDEN、MTHFR、凝血酶原) 以下服务需要 2 个请求: a) 使用 PCR 和电泳(每个基因座)进行多态性分析(STR、VNTR) 91302/91306 7 b) 从外周血、组织、细胞培养物、绒毛中提取 DNA 91365/93001 1 静脉血采集 91492/96101 1 DNA 存储 91361/92801 1 3. 利用反向点印迹法进行血色素沉着症 DNA 突变分析(2 至 10 个突变) 91301/91256 2 从外周血、组织、细胞培养物、绒毛中提取 DNA 91365/93001 1 静脉血采集 91492/96101 1 DNA 存储 91361/92801 1 4. 利用 PCR 和电泳法进行多态性(STR、VNTR)的药物遗传学分析(每个位点) 91302/91306 5 从外周血、组织、细胞培养物、绒毛中提取 DNA 91365/93001 1 静脉血采集 91492/96101 1 DNA 保存 91361/92801 1
摘要:肿瘤是全球最常见的死亡原因之一。欧洲每年新增 370 万例肿瘤病例,超过 190 万患者死亡(WHO 数据)。大多数研究领域都致力于开发新的治疗策略,以有效消除肿瘤、防止其缓解并避免或减少治疗的副作用。过去,通常使用经典的 2D 细胞培养或免疫缺陷动物模型来培养和在人类癌细胞系上测试药物。如今,人们对三维 (3D) 细胞培养的兴趣日益浓厚,这种方法与平面培养细胞有显著不同,既考虑了基因表达,也考虑了细胞间相互作用。各种证据表明,高致瘤性可能取决于小细胞群的出现,据指出,这是转移和复发的原因。这个群体被称为癌症干细胞 (CSC),暗示与正常干细胞有很多相似之处。CSC 是化疗失败以及多药耐药 (MDR) 的主要原因。 CSC 还可以通过细胞因子网络与炎症系统的巨噬细胞等其他细胞相互作用。3D 培养的一大优势是可以分离和研究被其环境包围的 CSC 群体。本文旨在总结已知的 3D 细胞培养,特别是在 CSC 研究领域,因为肿瘤环境对干细胞标志物表达及其发育非常重要。
•细胞培养:原发性和3D培养,增殖和细胞毒性测定,肠道细胞培养•免疫学技术:ELISA,ELISA,流式细胞仪,FACS,FACS,免疫组织化学•显微镜检查:共焦,明亮领域,2-光子共摄影显微镜•分析技术:分析技术:HPLC,FPLC,FPLC,FPLC,fpa,skta,rc,lc,lc,lc,akta,lc,lc rc,lc,lc rc,lc rc,lc,rc,lc,rc,rc,lc,rc,rc,rc,lc ta,lc ta,厌食症菌群培养,16S rRNA测序,荧光原位杂交•转录组学:单细胞RNA测序,空间转录组学(Merfish)出版物