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World File Search System细胞系
伪狂犬病毒利用网格蛋白介导的内吞作用进入 PK15 猪细胞系
伪狂犬病毒 (PRV) 是一种导致伪狂犬病的疱疹病毒，可导致猪群死亡率高。要制定有效且新颖的抗病毒策略，必须了解 PRV 感染宿主的入侵机制。病毒进入宿主细胞的方式多种多样。其中之一就是内吞作用，这是一种基本的细胞过程，通过该过程，来自外部环境的物质被内化到细胞中。根据网格蛋白的作用，该过程分为网格蛋白介导的内吞作用 (CME) 和网格蛋白非依赖性内吞作用 (CIE)。尽管已经描述了富含胆固醇的脂筏参与 PRV 的进入，但迄今为止，涉及网格蛋白的其他内吞途径的重要性仍未得到探索。在这里，我们描述了 CME 在 PRV 进入 PK15 猪细胞系中的作用。通过使用 CME 抑制药物，我们发现当 CME 通路被阻断时，PRV 感染率会降低。我们还对衔接蛋白 AP-2 (AP2M1) 的 µ 亚基进行了 shRNA 敲低，该蛋白在网格蛋白包被囊泡的成熟过程中起着重要作用，当敲低该亚基时，感染率会大大降低。此外，透射电子显微镜图像显示 PRV 病毒体位于网格蛋白包被囊泡内。总体而言，这项研究首次表明 CME 是 PRV 进入 PK15 细胞的一种机制，并为其可能的进入途径提供了有价值的见解。
Wuxiatm细胞系开发过程
Wuxi Biologics提供快速细胞系开发（CLD）时间表，并从我们的Wuxia Cho-K1平台中产生高滴度，质量和稳定性。我们的平台使我们的合作伙伴能够快速迈向IND归档，并提供适合大规模商业生物制造的经济高效的蛋白质表达系统。以下是使用所有内部功能的Wuxia CLD平台的典型工作流程，即使利用了其他哺乳动物细胞系蛋白表达系统，也可以利用此过程（例如HEK293，NS0，Wuxia ADCC Plus TM，GS-Cho或其他Cho菌株）。
CRISPR/CAS9技术在永生化的人类细胞系中的单基因编辑策略
摘要CRISPR/CAS9系统的使用在过去几年中迅速增长。在这里，描述了在人类非机智的体细胞系（NTHY-ORI）中的单核苷酸多态性的优化，突出了以克服有关递送和脱靶的问题的策略。，我们同时使用慢病毒和化学脂质作为递送剂以及两种创建双链断裂（DSB）的策略。前者通过经典的Cas9核酸酶（标准策略）诱导了DSB，而第二个则采用了修改后的CAS9产生单链破裂（SSB）。使用单链供体寡核苷酸或HR410-PA供体矢量（HR）进行敲门。可以通过将双镍酶系统与HR载体化学转染相结合来获得所需的细胞。此结果可能是由于DSB的类型造成的，这可能主要是由于Blunt（标准策略）和伸出时HR（Double Nickase）时的非同源末端连接而进行的。我们的结果表明，双镍酶适合在永生的NTHY-ORI细胞系中敲门，而标准CRISPR/ CAS9系统适合在/ DEL突变中创建基因敲除基因敲除。
大麻（CBNR）影响NSC-34细胞系中与细胞骨架和离子通道相关的突触基因：转录学研究
摘要：大麻素在认知和运动障碍的治疗方法中引起了人们的关注，这是神经系统疾病的特征。迄今为止，已经从大麻sativa中提取了100多种植物大麻含量，其中一些已显示出神经保护性能以及影响突触传播的能力。在这项研究中，我们研究了鲜为人知的植物大麻素，大麻诺（CBNR）对神经元生理学的影响。使用NSC-34运动神经元细胞系和下一代测序分析，我们发现CBNR影响与突触组织和专业化相关的CBNR突触基因，包括与细胞骨架和离子通道有关的基因。特别是钙，钠和钾通道亚基（Cacna1b，cacna1c，cacnb1，grin1，scn8a，kcnc1，kcnj9），以及与NMDAR相关的基因（AGAP3，Syngap1）和CABP1，CABP1，CABKP1，CABKVV）细胞骨架和细胞骨架相关基因（ACTN2，INA，TRIO，MARCKS，MARCKS，MARCKS，BSN，RTN4，DGKZ，HTT）。这些发现突出了CBNR在调节突触发生和突触传播中所起的重要作用，这表明需要进一步研究来评估CBNR在治疗许多神经疾病中表征运动障碍的突触功能障碍中的神经保护作用。
CHOSOURCETM ADCC+ 细胞系用于增强...
CHOSOURCE TM GS KO TTZ 表达池和 CHOSOURCE TM ADCC+ TTZ 表达池的生产力性能分析。两种细胞系均使用 CHOSOURCE TM 转座子技术（基于转座酶的基因整合）进行稳定转染，并在转染后 48 小时进行选择（无蛋氨酸亚砜亚胺，MSX）。恢复后，使用 Revvity 的标准摇瓶补料分批工艺评估池生产力。
单细胞分选，隔离和纳米素分配OMICS，稀有细胞和细胞系开发应用
如果下一个液滴仅包含一个适合用户定义的参数（大小，荧光标记）的单个单元格，则将其分配到目标实验室中。否则，将其分配到恢复瓶中，允许重新处理
Q5A(R2) 源自人类或动物细胞系的生物技术产品的病毒安全性评估
人用药品注册技术要求国际协调会 (ICH) 的使命是实现全球监管的更大协调，以确保以最节省资源的方式开发、注册和维护安全、有效和高质量的药品。通过协调世界各地区的监管期望，ICH 指南大大减少了重复的临床研究，避免了不必要的动物研究，标准化了安全报告和上市申请提交，并促进了全球药物开发和制造以及患者可用产品的质量的许多其他改进。ICH 是一个以共识为导向的过程，监管机构和行业各方的技术专家参与详细的技术和科学协调工作，最终制定出 ICH 指南。全球监管机构承诺一致采用这些基于共识的指南，对于实现安全、有效和高质量的药物对患者和行业的好处至关重要。作为 ICH 的创始监管成员之一，美国食品药品管理局 (FDA) 在每项 ICH 指南的制定中发挥着重要作用，这些指南随后被 FDA 采纳并发布作为行业指导。
高脂肪酸处理诱导天然杀手（NK）细胞系的抗炎变化
抽象背景：自然杀伤（NK）细胞在与肥胖有关的各种代谢疾病的发病机理中起作用。我们的初步发现表明NK细胞可能参与2型糖尿病的发病机理，但这种糖尿病形式的NK细胞介导的发展的确切机制仍然不足。目的：研究高葡萄糖和升高的游离脂肪酸（FFA）对免疫和炎症反应的影响和潜在机制，以及NK92细胞中的氧化应激。方法：在本实验中，使用CCK8细胞毒性测定法分别选择44.4 mm和1.5 mM浓度的高葡萄糖和高FFA，以治疗NK92细胞4天。使用生化分析仪确定超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）的浓度。细胞内活性氧（ROS）水平，细胞因子浓度（TNF-α，IFN-γ，IL-6和IL-10），以及细胞内分子（perforin和Granzyme B）的表达水平通过流式细胞术评估。结果：在高FFA（HF）组中，NK92细胞团的数量显着减少。此外，HF组的ROS产生和细胞因子水平（TNF-α，IFN-γ，IL-6和IL-10）显着降低，但在高葡萄糖（HG）组中没有显着变化。该观察结果与HF组降低的穿孔蛋白和颗粒B的表达水平一致。结论：高FFA引起的形态变化和对NK92细胞中氧化应激和炎症反应的严重损害。
seqverify：用于细胞系基因组完整性，污染和基因编辑结果
3均等的贡献，4个铅接触 *通信：george_church@hms.harvard.edu 1在过去十年中，基因组编辑和多能干细胞（PSC）培养的进步使研究人员生成了编辑的PSC线来研究各种生物学问题。然而，细胞系中的异常，例如非整倍性，靶标和脱靶编辑误差以及在PSC培养过程中或由于不需要的编辑结果，可能会出现微生物污染。这些异常中的任何一个都可能使实验无效，因此检测它们至关重要。下一代测序价格的持续下降使整个基因组测序（WGS）成为有效的质量控制选项，因为WGS可以检测到涉及DNA序列变化或存在不必要序列的任何异常。但是，这种方法缺乏易于使用的数据分析软件。在这里，我们提出了Seqverify，这是一种旨在获取原始WGS数据和预期编辑列表的计算管道，并验证编辑是否存在，并且没有异常。我们预计，Seqverify将成为研究人员生成编辑PSC的有用工具，并且更广泛地对细胞系质量控制。1.1关键字干细胞，多能干细胞，整个基因组测序，微生物污染，非整倍性，基因组编辑，单核苷酸多态性，软件，质量控制，Seqverify 2简介多发性干细胞（PSC）在许多细胞中都在生物学研究中发现了各种细胞的重要用途。 PSC。基因编辑技术（例如CRISPR-CAS9）已使PSC线的工程能够包含感兴趣的潜在等位基因，例如与疾病相关的突变或Nluorescent Reporters。