b“氧扩散,在整个共培养室中产生氧梯度。含有10%氧气的基底外侧气流通过气体入口进入,并用磁性搅拌器均匀地通过不对称的共培养室扩散。排气通过气体插座排放,完成了系统的气流(Fofanova等,2019)。该图是使用生物者创建的。(b)不对称共培养室的物理图片。(c)在将FITC-DEXTRAN添加到包含Tigk单层的Transwells的顶端室后,在24小时内比较了基底外侧室内FITC-脱骨的荧光强度。在常规氧培养条件下未分化(阴性对照)和分化的Tigks(称为\ XE2 \ X80 \ X9CNORMOXIC \ XE2 \ X80 \ X9D)与在不对称培养条件下的分化Tigk(称为AS AS AS) \ xe2 \ x80 \ x9casymmetric \ xe2 \ x80 \ x9d)。对于每种条件,减去空白培养基的背景荧光强度。未分化的TIGK单层在正常氧状态下培养,然后切换为包含Ca 2+的分化培养基,用作负面对照。(N.S.:p> 0.05,***:p <0.001,n = 2技术重复,n = 3个生物重复序列)。(e)在常氧和不对称培养条件下培养的TIGK单层中细胞活力的比较。热处理细胞是阴性对照(N.S.:p> 0.05,**:p <0.01,n = 3,n = 3)。(d)Transwell插入物中的Tigk单层的形态在正常氧化条件下维持在细胞培养培养基中,或在不对称的共培养室中培养24小时。已知胶原蛋白由于胶原纤维的存在而影响明亮的田间成像,与未涂层的表面相比,该胶原纤维可能会掩盖所观察到的细胞或结构的细节(Hashimoto等,2020)。