供体和受体之间的免疫兼容性是实现Allo-HCT良好结果的关键因素。通过使用细胞,血清学或分子技术键入人类白细胞抗原(HLA)来确定兼容性。HLA是指在HLA -A,-b和-dr基因座上表达的组织类型。根据所治疗的疾病,可接受的供体将与接受者完全或大部分HLA基因座相匹配。同种HCT的常规(“经典”)实践涉及给药的细胞毒性剂,或者以全身照射为剂量,足以破坏受体中内源性造血能力。此过程中的有益治疗效果是由于最初根除恶性细胞的结合以及随后在接收者骨髓空间内植入同种异体干细胞后发展的移植物 - 逆性恶性效应。虽然较慢的移植物伴随抗性效应被认为是潜在的治愈成分,但在不使用前植物调节的情况下,它可能被现存的疾病淹没。但是,强烈的调理方案仅限于足够适合的接受者
k1007双侧臀部,膝盖,脚踝,脚部装置,动力,包括骨盆成分,单台或双立式,膝关节,任何类型的膝关节,有或不带任何类型的脚踝关节,包括所有组件和配件,包括所有组件和配件,电动机,电动机,微处理器,微处理器,传感器
注1。细胞因子:一种主要由其他细胞分泌的蛋白质,并通过与细胞表面的受体结合来维持和生长细胞。如果缺乏,细胞将无法生存。注2。造血干细胞:这些是哺乳动物成人骨髓中发现的少数细胞,通过分裂细胞,它们为生命提供了血液。注3。线粒体:细胞内的细胞器之一。使用两种代谢途径,即柠檬酸循环和电子传输系统,将使用氧气吸入细胞的养分被分解为水和二氧化碳以产生ATP。注4。sdhaf1:一种在电子传输系统中称为复合物II的蛋白质,以及辅助琥珀酸脱氢酶(SDH)复合物的因子的缩写。注5。ATP:三磷酸腺苷。细胞所需的最大能量是由ATP分解时产生的能量提供的。注6。 pGAM1基因诱导的缺失小鼠:一种在磷酸甘油酸突变酶基因(糖酵解酶之一)给予他莫昔芬(一种化学合成的雌激素)时被诱导删除的小鼠。可以在时间和组织中专门删除基因。注7。 糖酵解系统:将葡萄糖掺入细胞中并分解为丙酮酸和乳酸无氧的过程,从而获得能量。注8。 离子色谱/质谱技术:通过组合电离色谱法量化每个分子的丰度的技术,可以高精度分离电离化合物和质谱法,质谱法,从而可以精确测量质量和电荷的比例,从而量化每种分类分子的质量和电荷。注9。 五肽磷酸盐循环:一种代谢途径,该途径合成了来自葡萄糖的Pentose,一种DNA和RNA的材料。在此过程中,细胞提供去除活性氧所需的还原能力。注意10。 活性氧:在包含氧的分子中,它们是特别反应性的,很薄,例如DNAATP:三磷酸腺苷。细胞所需的最大能量是由ATP分解时产生的能量提供的。注6。pGAM1基因诱导的缺失小鼠:一种在磷酸甘油酸突变酶基因(糖酵解酶之一)给予他莫昔芬(一种化学合成的雌激素)时被诱导删除的小鼠。可以在时间和组织中专门删除基因。注7。糖酵解系统:将葡萄糖掺入细胞中并分解为丙酮酸和乳酸无氧的过程,从而获得能量。注8。离子色谱/质谱技术:通过组合电离色谱法量化每个分子的丰度的技术,可以高精度分离电离化合物和质谱法,质谱法,从而可以精确测量质量和电荷的比例,从而量化每种分类分子的质量和电荷。注9。五肽磷酸盐循环:一种代谢途径,该途径合成了来自葡萄糖的Pentose,一种DNA和RNA的材料。在此过程中,细胞提供去除活性氧所需的还原能力。注意10。活性氧:在包含氧的分子中,它们是特别反应性的,很薄,例如DNA
* 今年提交报告的最后日期为12月24日星期二,今年提交报告的最后日期为12月27日星期五。参考文献:陆鑫等. J Clin Microbiol 51(4):1089~1093,2013. (试验方法参考)日本造血细胞移植协会:造血细胞移植指南-病毒感染的预防和治疗-出血性膀胱炎:2018年。 (临床意义参考)
EB培养基是基于Stapel培养基(31,32)(表1)。要生成EB,使用细胞释放缓冲液(1/1000 EDTA/PBS)将IPSC细胞145酶脱离,并通过使用EB介质(表1)吸管以147天0-1(表2)来收集细胞146的团块146。通过70 µm大小的滤网将收集的细胞团过滤到50ml 148无菌管中。通过10ML血清学移液移除细胞团,并将其轻轻添加到超低149附件培养皿中(Sigma Aldrich,CAT#CLS3261),在37°C下保持在37°C,将5%CO2 150放置在轨道振荡器上(Scientififix,CAT#NBT-101SRC)旋转32rpm。每100mm 151盘,将2至3×10 6个细胞用于EB形成。媒体更改策略,包括152个分化因子的细节,如表2所述。为了在EB组153步骤中提高细胞活力,将0.2 nm岩石抑制剂Y-27632(Stemcell Technologies,#72307)添加到媒体154天0-1中,并从那时起停产。从第7天开始,IPSC衍生的造血细胞开始从胚胎体作为悬浮细胞出现。156
Key points: - IVTsgRNAs in K562 predict response to highly effective genome editing in HSPCs - Low cost and efficient nucleofection protocols for RNP based editing in K562 and HSPCs - Genome editing efficiencies in HSPCs up to 80% is independent of cell number, and CD34 subpopulations are equally sensitive for genome editing - CRISPR-Cas9 gene editing does not impact细胞增殖和分化或长期p21诱导细胞衰老
抽象背景:HPSC来源的内皮和造血细胞(ECS和HCS)是组织工程的有趣细胞来源。尽管它们紧密的空间和时间胚胎发育,但当前的HPSC分化方案仅专门用于这些谱系之一。在这项研究中,我们产生了一种可以在两种谱系的体外分化的血红素内皮人群。方法:通过CD144 + - 胚胎体(HPSC-EBS),将两条hESC和一条HIPSC线分化为血红素内皮人群,HPSC-EC和爆炸菌落(HPSC-BC)。HPSC-EC的特征是内皮菌落形成测定,LDL摄取测定,TNF-α的内皮激活,一氧化氮检测和基于基质的管子的形成。造血集落形成细胞分析是从HPSC-BCS进行的。有趣的是,我们确定了以CD144和CD45的表达为特征的HPSC-BC种群。HPSC-EC和HPSC-BC;在小鼠背侧皮肤折室上的缺血性组织损伤模型和造血重建的HPSC-ECS和HPSC-EB-CD144 +的免疫抑制小鼠中,体内实验已通过缺血性组织损伤模型实现。进行转录组分析以确认hESC衍生细胞群体的内皮和造血认同,通过将它们与未分化的hESC进行比较(例如,HPSC-EC与HPSC-EB-CD144 +),并针对人类胚胎肝(EL)内皮,血红蛋白和造血细胞亚群。结果:在无血清条件下进行84小时HPSC-EBS形成后,获得了血红素内皮种群,并根据CD144表达分离。在人间注射HPSC-EB-CD144 +的hPSC-EB-CD144 +有助于免疫缺陷小鼠中CD45 +人类细胞的一代,这表明HPSC-EB-CD144 +内血液发电性ECS存在。HPSC-EB-CD144 +的内皮分化在体外的功能性EC> 95%。HPSC-EC参与了小鼠缺血模型中体内新容器的形成。在体外,HPSC-EB-CD144 +的造血分化产生了> 90%CD43 + HPSC-BC的中间群体,能够产生髓样和红系菌落。最后,转录组分析分别证实了HPSC-EB-CD144 +,HPSC-ECS和HPSC-BC的血液层,内皮和造血认同,以及
1。Xu Y,Chiang YH,HO PC,Vannini N:线粒体决定HSC和T细胞的功能和命运。2023 CANCAR IMMUNOL RES 2。Girotra M, Chiang YH, Charmoy M, Ginefra P, Hope HC, Bataclan C, Yu YR, Schyrr F, Franco F, Geiger H, Cherix S, Ho PC, Naveiras O, Auwerx J, Held W, Vannini N: Induction of mitochondrial recycling reverts age-associated decline of the hematopoietic and immune系统。2023 NAT老化3。Wilkinson AC,Ishida R,Nakauchi H,Yamazaki S:小鼠造血干细胞的长期离体扩张。 2020 NAT ProtoC 4。 Wang Y,Backman TWH,Horan K,Girke T:FMCSR:不匹配的最大最大常见子结构搜索R. 2013 Bioinformatics 5。 Hennig C:_FPC:clustering_的灵活过程。 2024 cran.r- project.org/package=fpc 6。 Maechler,M.,Rousseeuw,P.,Struyf,A.,Hubert,M.,Hornik,K:集群:聚类分析基础知识和扩展。 2023 cran.r-project.org/package=cluster 7。 Ritz,C.,Baty,F.,Streibig,J.C.,Gerhard,D:使用R 2015 PLOS ONE 8。的剂量反应分析 Landrum G等人:RDKIT:开源化学信息学。 2024 doi.org/10.5281/zenodo.591637Wilkinson AC,Ishida R,Nakauchi H,Yamazaki S:小鼠造血干细胞的长期离体扩张。2020 NAT ProtoC 4。Wang Y,Backman TWH,Horan K,Girke T:FMCSR:不匹配的最大最大常见子结构搜索R. 2013 Bioinformatics 5。Hennig C:_FPC:clustering_的灵活过程。2024 cran.r- project.org/package=fpc 6。Maechler,M.,Rousseeuw,P.,Struyf,A.,Hubert,M.,Hornik,K:集群:聚类分析基础知识和扩展。2023 cran.r-project.org/package=cluster 7。Ritz,C.,Baty,F.,Streibig,J.C.,Gerhard,D:使用R 2015 PLOS ONE 8。Landrum G等人:RDKIT:开源化学信息学。2024 doi.org/10.5281/zenodo.591637
同种异体造血细胞移植(HCT)用供体1,2的患者代替了负责血液产生的干细胞。在这里,为了量化长期干细胞植入的动力学,我们测序了来自2,824个单细胞衍生的造血菌落的基因组,该菌落是十个供体 - recipient对的hla匹配sibling sibling sibling hct 3后9-31年进行的。与年轻的捐助者(移植期18-47年),有5,000-30,000个干细胞植入了,在采样时仍在为造成造血症。年龄较大的捐助者(50 - 66年)的估计低十倍。植入的细胞对髓样,B淋巴样和T淋巴样群体产生了多肾化贡献,尽管单个克隆经常对一种或其他成熟的细胞类型表现出偏见。接受者的克隆多样性低于匹配的捐助者,相当于大约10 - 15年的额外衰老,这是干细胞克隆的扩张大约25倍。与移植相关的种群瓶颈无法解释这些差异。取而代之的是,系统发育树认为HCT特异性选择的两种不同模式。在修剪选择中,供体富含克隆的克隆扩张的基础细胞分裂发生在供体中,在移植之前,即从优先动员,收集,生存的离体或初始归巢中获得的选择性优势。在生长选择中,植入后的受体骨髓中发生了克隆膨胀的基础细胞分裂,最明显的是具有多个驱动器突变的克隆。与捐助者的不受干扰的造血相比,从本地环境中拔起干细胞并将其移植到异物中会夸大选择性压力,使克隆多样性的丧失扭曲和加速。