图 5. 三元复合物形成的亚细胞定位 (A) BRD4 (红色) 仅定位于细胞核,而大多数 HA-KLHL20 (绿色) 位于细胞质中。(左) BRD4 (红色) 和 HA- KLHL20 (绿色) 通道的合并图像。(右) 与 DAPI 染色的合并图像。(B) Strep-KLHL20 和 HA -KLHL20 (绿色) 显示出相似的定位模式。(C) BTR2004 不会改变 BRD4 (红色) 亚细胞定位。DAPI 核染色为蓝色。(D) BTR2004 不会改变 KLHL20 (绿色) 亚细胞定位。DAPI 核染色为蓝色。(E) 使用共聚焦显微镜成像通过邻近连接分析 (PLA) 揭示 BTR2004 介导的三元复合物形成。 (F) 定量 PLA 信号(使用 Imaris 程序)显示三元复合物主要在细胞核中形成。 (G) Exportin 1 抑制剂 KPT276 不能阻止 BRD2 降解,表明核形成的三元复合物被核蛋白酶体降解。