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摘要 我们提出了一种基于液滴的微流体系统,该系统可在芯片上实现基于 CRISPR 的基因编辑和高通量筛选。微流体装置包含一个 10 × 10 元件阵列,每个元件包含用于两个电场驱动操作的电极组:用于合并液滴以混合试剂的电润湿和用于转化的电穿孔。该装置可以并行执行多达 100 个基因改造反应,为生成遗传途径组合优化和可预测生物工程所需的大量工程菌株提供了一个可扩展的平台。我们通过基于 CRISPR 的两个测试案例的工程改造展示了该系统的能力:(1)破坏大肠杆菌中酶半乳糖激酶(galK)的功能;(2)靶向改造谷氨酰胺合成酶基因(glnA)和蓝色色素合成酶基因(bpsA),以提高大肠杆菌中的靛蓝素产量。

使用液滴微流体技术进行可扩展且自动化的基于 CRISPR 的菌株工程

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