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World File Search System截短的
PINK1 基因突变通过成对截短的 sgRNA/Cas9 实现
PTEN 诱导激酶 I (PINK1) 突变会导致人类早发性帕金森病 (PD)，并伴有选择性神经退行性病变。然而，目前 PINK1 基因敲除的小鼠和猪模型无法重现 PD 患者中观察到的典型神经退行性表型。这表明，在非人类灵长类动物 (NHP) 中生成与人类相近的 PINK1 疾病模型对于研究 PINK1 在灵长类动物大脑中的独特功能至关重要。配对单向导 RNA (sgRNA)/Cas9-D10A 切口酶和截短的 sgRNA/Cas9 均可以减少脱靶效应而不影响靶向编辑，是 CRISPR/Cas9 系统中用于建立疾病动物模型的两种优化策略。在这里，我们结合了这两种策略，将Cas9-D10A mRNA和两个截短的sgRNA注射到单细胞阶段的食蟹猴受精卵中，以靶向PINK1基因。我们实现了精准、高效的基因
tgCRISPRi：使用截短的 gRNA 和催化活性 Cas9 进行有效的基因敲除
CRISPR 干扰 (CRISPRi) 是一种在哺乳动物细胞中沉默基因的高效方法，它采用酶失活形式的 Cas9 (dCas9) 与一个或多个与靶基因转录起始位点互补 20 个核苷酸 (nt) 的向导 RNA (gRNA) 复合。此类 gRNA/dCas9 复合物与 DNA 结合，阻碍目标基因座的转录。在这里，我们提出了一种替代的基因抑制策略，即使用活性 Cas9 与截短的 gRNA (tgRNA) 复合。Cas9/tgRNA 复合物与特定靶位点结合而不会触发 DNA 切割。当靶向转录起始位点附近时，这些短的 14-15 nts tgRNA 可有效抑制果蝇体细胞组织中几种靶基因的表达，而不会产生任何可检测到的靶位点突变。 tgRNA 在与 Cas9-VPR 融合蛋白复合时还可以激活靶基因表达或调节增强子活性，并且可以整合到基因驱动中，其中传统 gRNA 维持驱动，而 tgRNA 抑制靶基因表达。
泰国 SARS-CoV-2 基因组监测显示，存在混合输入种群、本地谱系扩张和 ORF7a 截短的病毒
。CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可 它是根据作者/资助者提供的，他已授予 medRxiv 永久展示预印本的许可。（未经同行评审认证）
生成Zeb2不足的人IPSC线（...
智力残疾，癫痫，赫希斯普朗氏病和各种先天性畸形（Garavelli and Mainardi，2007年）。此外，Zeb2的过表达与不同形式的癌症的进展有关（Fardi等，2019）。虽然已经对Zeb2蛋白的功能进行了广泛的研究，但目前缺乏可用的Zeb2缺乏的人类细胞模型，无法在胚胎发育过程中进一步删除Zeb2依赖性调节网络，并且可以取消抗癌药物的发展。为此，我们使用CRISPR/CAS9介导的编辑系统生成了人类IPSC线，耗尽了Zeb2蛋白（表1）。我们分别应用了两个靶向Zeb2外显子5和外显子6的GRNA（图1 a），在父母IPSC线上Kicri002a（表1;（Uhlin等，2017）。通过LiPofection将包含两个GRNA的构建体引入IPSC系，并通过荧光激活的细胞分选（FACS）选择转染的细胞以表达绿色荧光蛋白。单细胞克隆在LN521上扩展，并通过基因组DNA上的Sanger测序分析基因编辑。分析显示了具有纯合790 bp缺失的克隆线kicri002a-4，跨越了内含子5和外显子5和6的一部分（chr2：g.144,404,077 - 144,404,404,404,867del;1 a;补充。图1 A-B）。 外显子5和外显子6的其余部分被融合，预测氨基酸194上的截短的Zeb2 mRNA，其截短的Zeb2 mRNA（PTC）（P.THR188888888888888888888888;图1 A-B）。外显子5和外显子6的其余部分被融合，预测氨基酸194上的截短的Zeb2 mRNA，其截短的Zeb2 mRNA（PTC）（P.THR188888888888888888888888;图1 a）。与136PTC位于编码N末端锌指（NZF）域的区域以及更C末端的R-SMAD结合域（SBD），CTBP相互作用结构域（CID）（CID）和C-末端的c-terminal Zinc Zinc Finger（CZF（CZF）和Homeododomain（例如Domains）（epifa）（epifa）。
陶瓷 - 聚合物 - 聚合物 - 碳复合涂料在截短的八面体形的lnmo阴极上，用于高容量，并在高压锂离子电池中延长循环
摘要：Lini 0.5 Mn 1.5 O 4（LNMO）阴极的长期电化学循环寿命（LES）（LES）和对细胞衰竭机制的知识不足是雄辩的致命弱点对实际应用的雄辩，尽管它们具有较大的承诺，可以降低lithium-ion Batteries的成本（Libs）。在此，提出了一种工程的工程策略-LE界面以增强LIBS的循环寿命。通过简单的slot-slot-die coating，通过离子 - 电子（Ambiall）混合陶瓷 - 聚合物 - 聚合物电解质（IECHP）将阴极活性颗粒与LE之间的直接接触通过将溶胶 - 凝胶合成截短的八面体形的LNMO颗粒封装。IECHP覆盖的LNMO阴极显示出250个循环的能力逐渐衰减，1000次充电循环后的容量降低了约90％，显着超过了未涂层的LNMO阴极的能力（在980个周期后的〜57％）中，在1 m lipf 6中，ec in in 1 m lipf 6 in 1 m lipf 6 in in 1 m lipf 6 in in 1 c in in 1 cy n in 1 m lipf 6 in in ec：Dmc：通过聚焦离子束扫描电子显微镜和飞行飞行时间二级离子质谱法检查了两种类型的阴极之间的稳定性差异。这些研究表明，原始的LNMO在阴极表面产生不活动层，从而减少了阴极和电解质之间的离子转运，并增加了界面电阻。IECHP涂层成功克服了这些局限性。因此，目前的工作强调了IECHP涂层的LNMO作为1 M LIPF 6电解质中的高压阴极材料的适应性，以延长使用。拟议的策略对于商业应用来说是简单且负担得起的。
热科学二氧化碳孵化器与140°C干热...
结果和讨论微生物测试的完整和截短的140°C灭菌周期的微生物测试结果如表1所示。在每种情况下，在140°C的干热周期中的任何一个中，来自不锈钢载体的任何样品中均未发现生长，证明了全部消除。在不同日期，所有截短的运行均显示结果的一致性，增长为零。阴性对照没有显示生长（未显示结果），表明技术人员没有样品污染。阳性对照与测试样品相同，除了未放入孵化器中。由于所有灭菌周期都能够消除所有微生物，包括用于干热量灭菌的规定生物学指标孢子，因此恢复程序仅用于阳性对照。表2中为323 L模型提供的结果清楚地表明，恢复的所有正面对照至少为10 6 CFU/载体，因此成功满足了所有接受标准。表3中给出的232升模型中所示的结果表明，最重要的生物学指标（抗抗热孢子孢子芽孢杆菌）最少回收了10 6 CFU/载体。这些结果证明，140°C的灭菌程序至少达到6-7 log 10减少抗脂肪芽孢杆菌的抗热孢子，符合EUP和USP的干热量灭菌所需的灭菌标准。
IDT 无缝克隆方法协议 (RUO22 ... - NET
无缝克隆方法 [ 1 ] 是传统限制性位点克隆的绝佳替代方案，其优势在于只需单管反应，即可在短短 30 分钟内无缝组装多个片段（图 1）。此方法包括 Gibson Assembly 和 Golden Gate，可实现定向克隆，无需特定的限制序列。无缝克隆依赖于使用由嗜温外切酶、嗜热连接酶和高保真聚合酶组成的酶混合物。由于组装需要两端都有完整的序列，因此该方法可以筛选出截短的序列或末端有错误的序列。我们建议在组装和大多数克隆应用中使用无缝克隆方法。
物联网的实用跨层射频基于射频的身份验证方案
摘要常染色体显性症（AD）高IGE综合征（HIE）的抽象患者患有一系列表现形式，包括复发细菌和真菌感染，严重的特应性和骨骼异常。这种情况通常是由单相关的显性阴性（DN）STAT3变体引起的。在2020年，我们描述了来自八名具有DN IL6st变体的八种幼虫的患者，导致了一种新形式的AD HIE。这些变体编码了截短的GP130受体，具有完整的细胞外和跨膜结构域，但缺乏细胞内回收基序和四个STAT3结合残基，导致无法循环和激活STAT3。我们在这里报告了三个无关的HIS-AD家庭中IL6ST的两个新的DN变体。这些变体的生化和临床影响与先前报道的变体的生化和临床影响不同。p。（Ser731Val f s*8）变体，在来自两个家族的7例患者中鉴定出来，缺乏回收基序和所有STAT3结合残基，但其在细胞表面的水平仅略有升高，并且它的基础是轻度生物学表型，具有可变的临床表达性。p。（arg768*）在单个患者中鉴定出的变体缺乏回收基序和三个最远端的STAT3结合残基。这种变体在细胞表面积聚，并构成严重的生物学和临床表型。p。（Ser731Val f s*8）变体表明，在细胞表面上以接近正常水平表达的DN GP130可以是异质临床表现的基础，范围从轻度到重度。p。（arg768*）变体表明，截短的GP130蛋白保留了一种STAT3结合残基可以是严重HIE的基础。