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无缝克隆方法 [ 1 ] 是传统限制性位点克隆的绝佳替代方案，其优势在于只需单管反应，即可在短短 30 分钟内无缝组装多个片段（图 1）。此方法包括 Gibson Assembly 和 Golden Gate，可实现定向克隆，无需特定的限制序列。无缝克隆依赖于使用由嗜温外切酶、嗜热连接酶和高保真聚合酶组成的酶混合物。由于组装需要两端都有完整的序列，因此该方法可以筛选出截短的序列或末端有错误的序列。我们建议在组装和大多数克隆应用中使用无缝克隆方法。
IDT 无缝克隆方法协议 (RUO22 ... - NET
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