光学成像彻底改变了我们监测大脑活动的能力,涵盖了从突触到细胞再到电路的空间尺度。本文,我们总结了介观成像的快速发展和应用,这是一种基于广域荧光的方法,平衡了高时空分辨率和超大视野。通过利用用于神经元活动的荧光报告基因的不断扩展和用于指示剂表达的新策略,介观分析能够测量和关联网络动态与行为状态和任务表现。此外,广域成像与双光子显微镜和电生理学等细胞分辨率方法的结合正在弥合细胞和网络分析之间的界限。总体而言,介观成像为研究大脑功能的光学工具箱提供了一个强大的选项。
图 3。AAV9 介导小鼠心肌细胞转基因表达。我们使用心肌细胞报告基因测量了小鼠心脏中这三种血清型的病毒 DNA、RNA 和蛋白质水平。根据病毒基因组 DNA 载量测量,这三种血清型均显示出相似的心脏转导,但是,AAV9 产生的心肌细胞特异性报告 RNA 转录本和蛋白质产物的表达水平高于在同一平台上并行制造的其他两种血清型。对条形码合并和单独给药进行了测试,并产生了相似的结果。在此图中,具有相对定量的 DNA 和 RNA 数据来自条形码合并研究,具有绝对定量的蛋白质数据来自单独给药研究。每项研究招募了五只动物,并在该图中以单独的点表示。
核酸检测在各种诊断和疾病控制中起着关键作用。目前可用的核酸检测技术面临着速度、简便性、精度和成本之间的权衡挑战。在这里,我们描述了一种用于快速核酸检测的新方法,称为 SENSOR(硫 DNA 介导的核酸传感平台)。SENSOR 由硫代磷酸酯 (PT)-DNA 和硫结合域 (SBD) 开发而成,可特异性结合双链 PT 修饰 DNA。SENSOR 利用 PT-DNA 寡核苷酸和 SBD 作为靶向模块,与分裂荧光素酶报告基因连接,在 10 分钟内产生发光信号。我们对合成核酸和 COVID-19 假病毒进行了检测测试,结合扩增程序实现了阿摩尔灵敏度。单核苷酸多态性 (SNP) 也可以区分。表明 SENSOR 是一种有前途的新型核酸检测技术。
图5。TARDIS启动子库。a)概述两个分裂的着陆垫及其相关的启动子插入向量。正确整合后,选择性标记和荧光团表达都会恢复。b)从单个TARDIS阵列线的单个热轴(PX819)中回收了9个基因的转录记者。集成到单个McSarlet-I /Hygr着陆垫中。主图像显示了指定的报告基因的MSCARLET-I表达,而插图显示同一区域的极化图像。c)示例同时,从单个TARDIS阵列中的双重整合到带有害虫的双降落垫菌株中。ceh-10p :: mneongreen :: pest是假彩色绿色和ceh-40p :: mcarlet-i :: pest是假彩色的洋红色。所有比例尺均代表20µm
随后,海牙先生在Albert Kausch博士的实验室开始了研究生研究,在那里他利用农杆菌的转基因植物研究获得了各种各样的经验,这些经验利用了稻米,草皮,草皮,开关和玉米的介导的和生物学转化系统。海牙先生的硕士论文的重点是对从基因ZM13分离的玉米花粉特异性启动子进行分析,并利用转基因水稻携带的启动子与GUSA报告基因融合在一起。他在分子遗传分析方面的实验室工作利用了各种技术,包括DNA提取,凝胶电泳和PCR分析,以及许多分子克隆标准的技术。他完成了高级微生物学,微生物遗传学,生物化学,植物分子生物学,植物生物技术的课程工作,并在2009年成功捍卫了他的论文并获得了硕士学位。分子遗传学。
在环境中,细菌竞争利基占用和资源;因此,他们进化了各种各样的抗菌武器来摧毁竞争对手。当前评估抗菌活性的实验室技术通常是劳动密集型,吞吐量低,昂贵且耗时的。典型的测定依赖于竞争后选择性固体培养基上猎物细胞菌落的生长。在这里,我们提出了快速,廉价和互补的优化方案,以定性和定量测量抗菌活性。第一种方法是基于β-半乳糖苷酶的细胞可侵化的色素底物的降解,β-半乳糖苷酶是一种在攻击报告基因菌株裂解过程中释放的细胞质酶。第二种方法取决于攻击细胞在竞争后达到定义的光密度所需的滞后时间,这直接取决于幸存的细胞的初始数量。
3一个基因视图13 3.1范围。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。13 3.2步骤1:选择视图一个基因模块。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。13 3.3步骤2:选择基因或报告基因。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。14 3.4步骤3:绘制基因表达。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。15 3.5步骤4:选择分析类型:在组中查看基因。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。16 3.6步骤5:标记 /突出图中的样本。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。18 3.7步骤6:有关所选基因的其他信息的来源。。。。。。。。。。。。。。。。。。22 3.8步骤7:高级排序和选择样本。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。23 3.9步骤8:选择子集。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。25 3.10步骤9:通过Clinisnitch找到最佳的轨道分离。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。26 3.11步骤10:寻找样品极端。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。27 3.12步骤11:记者 /探针验证。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。28 3.13最终评论 /未来指示。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。31
图3。用大肠杆菌LASR和构成记者的甲醛活性。a。灰色线,甲醛依赖性生长抑制,占无甲醛的细胞的百分比。在大肠杆菌中与100 nm 3OC12-HSL的甲醛的剂量反应曲线在大肠杆菌培养物中具有阿拉伯糖诱导的LASR和LASR依赖性Lasi-Lacz Reporter(Black Line)或E. coli,或具有组成型APHA-3-LACZ RACZ REPORTER(RED RED REDERTER)。IC50值在表1中给出。结果显示,五个(LASR)或三个(LACZ控制)独立实验的平均值,误差线代表标准偏差。B.来自A的平均值(降低%降低%与Lasi-Lacz报告基因的抑制%),这些值用于确定Pearson的相关系数(R值)和显着性(P),并使用简单的线性回归模型生成拟合线。