XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search System无活性
CRISPR-Cpf1 激活内源性 BMP4 基因促进脐带间充质干细胞成骨分化
CRISPR 系统提供了强大的基因组编辑工具，广泛应用于生物和医学研究领域。然而，由于 CRISPR 的脱靶效应而产生的安全问题一直是其应用于再生医学的主要障碍之一。传统的 CRISPR 系统存在通过错误的双链 DNA 断裂 (DSB) 在非目标基因组位点诱发不可预测突变的内在危险。在本研究中，我们展示了一种最近发现的 CRISPR-Cpf1 的安全增强应用，用于靶向基因激活，而不会导致 DNA 双链断裂，从而促进人脐带间充质干细胞 (UC-MSC) 的成骨分化。为此，我们开发了一种与三部分转录激活域 (dAsCpf1-VPR) 融合的催化无活性 AsCpf1，可诱导哺乳动物细胞中靶基因表达的上调。我们观察到 CRISPR-dAsCpf1-VPR 激活剂可通过增加内源性 BMP4 基因的表达水平来增强人类 UC-MSCs 的成骨分化。结果表明 CRISPR-Cpf1 激活剂为骨再生和再生医学提供了多种方法。
深入了解胃癌干细胞胃癌耐药性的分子机制
分类）] [2]或四个亚型[乳头状，管状，粘液和凝聚力不佳（WHO分类）] [3]。Based on genomic and epigenomic alterations, the most well-defined molecular-based classification systems include The Cancer Genome Atlas (TCGA) classification [EBV positive (EBV), microsatellite instable (MSI), genomically stable (GS), and chromosomal instable (CIN)] [4] and the Asian Cancer Research Group (ACRG) classification [microsatellite instable (MSI),微卫星稳定的TP53非活性（MSS/TP53无活性），MSS TP53 Active（MSS/TP53 Active）和具有上皮 - 米质转变（EMT）特征（MSS/EMT）的MSS [5]。尽管GC早期诊断领域的进展，但大多数病例仍在晚期[6]诊断出患有无法切除或转移性疾病的阶段。尽管当前的全身疗法，包括手术，化学疗法，放疗，免疫疗法和靶向治疗[表1]，用于晚期GC患者，在最近几十年中，大多数患有晚期GC的患者因肿瘤复发和转移而死亡。晚期和转移性GC的预后仍然很差，5年的存活率<10％[7]。
6,7-二甲氧基二氢香豆素化合物，来自乙酸乙酯提取物
Dysoxylum 属具有多种次生代谢产物。对该属各种物种的研究一直在增长，并产生了具有有趣结构和活性的化合物，到目前为止，已报道了许多萜类化合物、色满生物碱、柠檬苦素类、倍半萜、黄酮类、类固醇、原柠檬苦素类和硫的化合物。这非常有趣。具有多种次生代谢产物的 Dysoxylum 属物种之一是 D. alliaceum 。本研究的目的是获得 D. alliaceum 树皮的次生代谢产物。将 D. alliaceum 树皮依次用正己烷、乙酸乙酯和甲醇浸渍。采用各种色谱技术分离和纯化乙酸乙酯提取物，并使用紫外、红外、核磁共振和质谱等光谱方法进行表征，并通过薄层色谱分析指导获得化合物 6,7-二甲氧基二氢香豆素和拟议的生物合成。根据光谱数据的解释并与先前研究的光谱数据进行比较，确定了这些化合物的化学结构。对 P-388 MTT 白血病细胞的细胞毒活性测试获得 IC 50 为 39.210 g/mL，并被宣布为无活性。
可差异的CRE重组酶允许在Berghei疟原虫的蚊子阶段进行有条件的基因组编辑
疟原虫的无性血液阶段很容易通过同源重组来适应遗传修饰，从而使寄生虫基因的功能性研究在生命周期的这一部分中并非必不可少。然而，常规的反向遗传学不能应用于无性血液阶段复制中必不可少的基因的功能分析。已经开发了各种策略，用于浆细胞的条件诱变，包括基于重组酶的基因缺失，可调节启动子以及mRNA或蛋白质破坏稳定系统。在其中，可二聚Cre（DICRE）重组酶系统已成为p中有条件基因缺失的强大方法。恶意。在该系统中，噬菌体CRE以两种单独的酶无活性多肽的形式表达，每种酶融合了不同的雷帕霉素结合蛋白。雷帕霉素诱导的两个成分的异二聚化恢复重组酶活性。我们已经在啮齿动物疟原虫p。berghei，并表明可以在哺乳动物和蚊子寄生虫阶段具有很高的效率来实现雷帕霉素诱导的floxed DNA序列切除。此工具可用于投资基本基因的功能，不仅在无性血液阶段，而且在疟原虫生命周期的其他部分。
靶向内源性大麻素信号传导：FAAH和MAG脂肪酶抑制剂
几个世纪以来，植物大麻Sativa已用于药物和娱乐目的。它含有500多种化合物，其中大约100种属于大麻素类（1）。在1960年代，分离并表征了主要的精神活性成分（ - ） - trans -9-二氢大麻酚（THC）（THC）（2）。在确定THC结构后三十年（3，4）确定了大麻素1（CB 1）和2（CB 2）受体，即THC发挥其特征作用的分子实体。这一发现开始寻找与这些受体结合的内源配体（所谓的内源性大麻素）。n-氨基苯二烯丙基氨基胺（Anandamide或AEA）被发现为第一个内源性大麻素，不久后是2-芳基二烯丙基甘油（2-ag）（5，6），促使他们研究了它们的生物合成，新陈代谢，运输和生理学角色（7）。一起，CB 1/2受体，内源性大麻含量以及负责其生物合成和失活的蛋白质构成内源性大麻素系统（ECS）。在这里，我们简要讨论了医用大麻的潜在治疗和不利影响，并审查了基于对EC的调节而考虑的潜在替代策略，重点是针对靶向脂肪酸酰胺水解酶（FAAH）和单酰甘油甘油脂肪酶（MAGL）的实验药物，酶，酶，无活性内替代（8）（8）（8）。
CRISPR介导的转录抑制作用弓形虫Gondii
用于调整内源基因表达的抽象工具是确定各种细胞表型的遗传基础的关键。尽管在弓形虫中可以使用合成的可调节性，但基因表达的靶向和组合下调的可扩展方法（如RNA干扰）尚未得到发展。为了研究CRISPR介导的转录调控的可行性，我们研究了来自甲状腺链球菌和嗜热链球菌的两个催化无活性Cas9（DCAS9）直系同源物的功能。在添加靶向启动子的单个指定RNA（SGRNA）和表面抗原基因SAG1的5 9个未翻译区域（UTR）后，我们对靶基因的蛋白质刺激蛋白质的变化通过流量细胞仪的蛋白质刺激变化，用于转录报告基因和immu-immu-nosu-nosu-noce。我们发现DCAS9直系同源物产生了一系列靶基因表达水平，并且抑制程度持久且稳定地遗传。因此，化脓性链球菌和嗜热链球菌DCAS9可以有效地产生弓形虫中的基因表达水平。两个DCAS9的独特的SGRNA支架要求允许通过转录调制，基于显微镜的研究标记或其他基于DCAS9的方法同时检查两个不同的基因座。利用新近获得的基因组转录起始站点数据，这些工具将有助于开发弓形虫的新功能筛查方法。
机器人精神计量学：验证福利评估...
儿童机器人相互作用（CRI）的跨学科性质（CRI）养育了许多已建立领域的措施和方法。但是，当采用CRI方法来敏感的健康和福祉途径时，谨慎对于调整指标以保留其安全标准并确保准确的功效至关重要。在这项工作中，我们对先前的经验工作进行了次要分析，研究了既定的心理问卷的可靠性和构建有效性，例如短暂的情绪和感受询问（SMFQ）（SMFQ）（SMFQ）和三个子量表（SMFQ）（SMFQ）（广泛性焦虑，恐慌和低情绪和低情绪和低情绪），对CRI进行了cri的cri范围内的cri和cri范围内的良好设置。通过局限性主成分分析，我们观察到这些措施在CRI的背景下是可靠且有效的。此外，我们的分析表明，与自我报告相比，机器人传达的量表表现出更好的效果，强调了在这些环境中机器人介导的心理问题的效率和有效性。尽管如此，我们还观察到对主要因素的项目贡献的变化，这表明在CRI中使用时，潜在的检查和修订领域（例如，与生理变化，无活性和认知需求有关）。这项工作的发现强调了在CRI环境中使用标准化指标和评估工具的可靠性和有效性的重要性，因此，旨在避免任何误解和虚假陈述。
《俄亥俄州科学杂志》目录---第86卷
摘要含有α6亚基的A型A型氨基丁酸A型（GABA A）位于三叉神经节中，并且通过小干扰RNA的减少会增加大鼠的炎性颞下颌和肌毛的炎症。因此，我们假设增强其活性可能有助于源自三叉神经系统的神经性综合征。在这里，我们对两个最近开发的结构上相似的吡唑唑喹啉酮com-compuss进行了详细的电生理和药代动力学分析。在重组大鼠α6β3γ2，α6β3δ和α6β3受体下，浓度低于1 µm的浓度下的DK -I -56-1在1 µM以下增强的γ-氨基丁酸（GABA）电流，而在大多数GABA A受体亚型中，它在包含其他α子un的大多数GABA A受体亚型中都是不活跃的。dk -i -87-1在浓度以下的浓度低于1 µm时在含α6的受体下无活性，仅研究了弱调节的其他GABA A受体。DK-I-56-1的血浆和脑组织动力学相对较慢，半个世纪分别为6和13小时，从而使估计的自由脑浓度在10-300 nm范围内的持续性持续到整个24 hr时期。在两种方案中获得了两种慢性狭窄损伤的肌肌甲型肌肌神经的结果
活细胞成像揭示了 Cas9 和 Cas12a 靶标搜索灵活性与效率之间的权衡
摘要 CRISPR-Cas 系统已被广泛用作基因组编辑工具，其中两种常用的 Cas 核酸酶是 Spy Cas9 和 Lb Cas12a。虽然这两种核酸酶都使用 RNA 向导来寻找和切割靶 DNA 位点，但这两种酶在原间隔区相邻基序 (PAM) 要求、向导结构和切割机制方面有所不同。在过去的几年里，合理工程设计导致了 PAM 放宽变体 Sp RYCas9 和 imp Lb Cas12a 的诞生，以拓宽可靶向的 DNA 空间。通过使用它们的催化无活性变体 (dCas9/dCas12a)，我们量化了蛋白质特异性特征如何影响靶标搜索过程。为了进行量化，我们将这些核酸酶与光激活荧光蛋白 PAmCherry2.1 融合，并在大肠杆菌细胞中进行单粒子追踪。通过跟踪分析，我们推导出了每种具有非靶向 RNA 向导的核酸酶的动力学参数，这强烈表明 Lb dCas12a 变体对 DNA 的询问比 Spy dCas9 更快。在存在靶向 RNA 向导的情况下，模拟和细胞成像均证实 Lb dCas12a 变体在找到特定靶位点方面更快、更高效。我们的工作展示了使用强大的框架工作放宽 Spy dCas9 和 Lb dCas12a 中的 PAM 要求的权衡，这可以应用于其他核酸酶以量化它们的 DNA 靶标搜索。
生物活性肽：生产和功能
牛奶蛋白发挥各种营养，功能和生物学活性。许多牛奶蛋白具有特定的生物学特性，这些特性使这些成分的促进食品的潜在成分。越来越多的注意力集中在源自牛奶蛋白的生理活性肽上。这些肽在父蛋白分子的序列内无活性，可以通过（1）牛奶的胃肠道消化释放，（2）用蛋白水解启动培养物或（3）蛋白水解酶进行水解牛奶。牛奶蛋白衍生的肽已在体内显示出影响各种影响，例如消化，心血管，免疫和神经系统。研究已经确定了主要牛奶蛋白中特定生物活性的大量肽序列，并确定了其释放的条件。最近开发并推出了适合生物活性牛奶肽商业生产的工业规模技术。这些技术基于新兴乳制品成分行业采用的新型膜分离和离子交换色谱方法。在发酵乳制品中发现了各种自然形成的生物活性肽，例如酸奶，酸奶和奶酪。然而，尚未确定这些传统产品中归因于这些传统产品中肽的健康益处。另一方面，已经有几种商业乳制品补充了牛奶蛋白来源的生物活性肽，其健康对健康有益于临床人类研究。可以预见，随着关于牛奶肽的多功能特性和生理功能的更多知识，这种趋势将扩大。r 2005 Elsevier Ltd.保留所有权利。