5。在E列中输入GDNA的量子浓度。6。确定将使用哪个索引套件。在J列中选择索引井位置。7。输入用于在F列中用于文库制备的提取的DNA的体积。基因组量已标准化DNA的起始体积至5μL(GDNA浓度为20-50 ng/μL),但是,建议的输入DNA的建议量为100-500 ng。我们的建议是使用至少100 ng的输入DNA。个别实验室可以调整输入DNA体积,以确保数量属于此范围内。建议的最小输入DNA为2μL,如果DNA过于浓缩,则执行稀释度以使输入DNA体积高于2μL并进行。
除了机载流程外,MiSeq i100 系列的数据还可以传输到 BaseSpace Sequence Hub,这是一个用户友好的基因组学云计算环境,提供简化的运行设置、监控和分析。在这里,用户可以访问全套 DRAGEN 流程,对 NGS 数据进行准确的二次分析和可视化,从而生成有意义的生物学结果。或者,对可扩展性和定制解决方案感兴趣的实验室可以将数据从 MiSeq i100 系列传输到 Illumina Connected Analytics,这是一个灵活的云生物信息学平台,支持更广泛的流程和高度可配置、可扩展的分析。
由Xleap-SBS™化学提供动力,我们最快,最高质量的化学反应,测序运行时间速度高达四个小时。并且在板载次要分析的情况下,可以在一天内生成结果。
两步PCR方法 - 如何工作,两步PCR方法与Illumina的双重索引策略相结合,可以并行处理多达384个样本(见图1)。第一步的PCR使用引物包含特定于基因座的序列以及来自Illumina的Nextera库协议中指定的通用5'尾巴(见表1)。不仅只使用一个前向底漆和反向引物,因此某些原始col使用了最多3个前向引物,这些引物通过在基因座特异性和常见的5'尾巴之间添加摇摆碱(ns)而在长度上有所不同。这可能在高通量项目中尤其有用,在该项目中,测序吞吐量特别关键并且汇总了许多样品。但是,对于大多数项目,仅使用一个正向和一个反向引物,测序吞吐量就足够高。如果您需要有关此特定主题的更高背景,请与我们联系。然后将所得的PCR扩增子用作第二步PCR中的模板,以进一步扩增,但也可以作为