病毒是导致全球各种疾病的传染性病原体。最近的 COVID-19 大流行表明,需要快速可靠的检测来确认病毒感染,旨在快速分离、治疗和识别高发地区。基于侧向流免疫层析的快速抗原检测已被证明非常有用。然而,它们对于病毒载量低的患者并不准确。金标准测试是 RT-PCR,它通过检测特定的 DNA 或 RNA 序列来识别病毒基因组的部分。RT-PCR 或类似测试(如 RT-LAMP)涉及样品制备和靶序列扩增的几个步骤,需要训练有素的人员进行,并且可能耗时且昂贵,限制了它们的即时应用。生物传感器是一种很有前途的分析设备,用于检测核酸(主要是病毒中的 RNA),与 RT-PCR 测试相比,由于无需扩增靶序列,因此具有快速、高灵敏度和低成本等优势。最近,已经开发出几种无需扩增序列即可检测 RNA 病毒的生物传感器。本文,我们综述了无需扩增的生物传感器的设计和技术,用于检测病毒 RNA,作为诊断传染病的替代方法。本文将讨论即时诊断电化学、电气和光学生物传感器的挑战和进展。
注意:样品的核酸浓度是通过其在 260 nm 处的紫外吸光度计算得出的,其中吸光度 1(1 cm 光程长度)相当于 50 μL DNA/mL。RNA、蛋白质、盐、乙醇或其他非核酸污染物的污染会导致 260 nm 处的总吸光度增加,因此会导致对真实 DNA 浓度的估计过高。使用紫外光谱测量时,A260/A280 比率在 1.80–1.90 之间且 A260/A230 >1.8 表示纯 DNA。A260/A280 和 A260/230 比率高于 2.0 表示 RNA 污染。相反,A260/A280 比率低于 1.8 表示蛋白质污染。此外,较低的 A260 / A230 比率表明存在腐殖酸以及蛋白质、糖、乙醇、盐和其他污染物,这些污染物可能会抑制后续的酶促反应。
• 样本来源 – 任何细胞(动物、细菌、血细胞等)、所有组织(难裂解、FFPE 等)、血液、生物体液、酶反应(例如,经 DNase I 处理的)和 DNA/RNA Shield ™ 或其他保存试剂中的样本。 • 样本保存和灭活 – DNA/RNA Shield ™ 可裂解细胞、灭活核酸酶和传染因子(例如,病毒、病原体),是常温下样本安全储存和运输的理想选择(第 11 页)。 • 大小 – 基因组 DNA(≥ 40 kb)、线粒体和病毒 DNA(如果存在)以及包括小/microRNA(≥ 17 nt)在内的总 RNA。
糖尿病(DM)是一系列广泛的代谢功能障碍,其特征是胰岛素抵抗,胰岛素分泌不足或过度胰高血糖素分泌引起的高血糖症(1)。2021年全球糖尿病患病率估计为10.5%(5.366亿人)(Li等人)。心血管疾病(CVD)通常伴随DM,代表了全球发病率和死亡率的主要原因(2)。越来越多的证据表明,非编码RNA(NCRNA)在DM和CVD的启动和进展中的关键作用(3,4)。NCRNA代表了一组不同的分子,这些分子被证明可以调节基因表达,并且在人类生长和发育,细胞增殖,凋亡和代谢等生理过程中具有至关重要的作用(5)。NCRNA的主要类别是microRNA(miRNA),长的非编码RNA(LNCRNA)和圆形RNA(CIRCRNA)。由于它们通过调节各种基因的表达来维持生理稳态的作用,miRNA和LNCRNA吸引了与DM和CVD中潜在的治疗靶标的生物标志物相当大的科学兴趣(3)。在本研究主题中,作者通过提供了在这些条件下涉及的各种调节性NCRNA的全面和最新的摘要,解决了全球DM和CVD稳步增加的问题。此外,作者还讨论了NCRNA作为糖尿病和CVD的预后生物标志物和治疗工具。该主题收到了六篇论文,包括五篇文章和一份评论。也是Li等。因此,Bielska等人。在DM中良好确定了导致心脏病发展的不同miRNA和血小板激活之间的联系。从基因表达综合的数据中提出了数据,表明在各种类型糖尿病中差异表达的miRNA的靶基因之间存在密切的联系。然而,仍然需要确定特异性miRNA在缺血性心脏病(IHD)中的调节和功能。研究最近专注于发现循环的血清衍生的miRNA作为DM患者早期诊断和鉴定IHD风险的潜在生物标志物。使用一种新型技术,即识别差异IHD相关的miRNA表达的NCounter平台,发现六个miRNA(miR-615-3p,miR-3147,miR-3147,miR-1224-5p,mir-5196-,mir-5196-
要描述的实验与组蛋白在核功能中的作用有关,特别强调了生物合成反应,这些反应通过引入乙酰基和甲基来改变组蛋白的结构。使用乙酸-C14和蛋氨酸 - 甲基-C'4在孤立的小牛胸腺核中研究了这些反应(参见参见参考文献1)作为前体,将它们的不合格与C14-赖氨酸和其他氨基酸的不合格进行比较,并测试普罗蛋白对不同组蛋白分数的合成的影响。将提供证据,以表明在细胞核中,组蛋白的乙酰化和甲基化很可能发生在多肽链完成后。尤其是乙酰化的组蛋白结构的这种修饰可能会影响组蛋白在体内抑制核糖核酸合成的能力。这种观点得到了以下发现的支持:当孤立的精氨酸组蛋白经过有限的乙酰化时,它们会因小牛胸腺核的DNA依赖性RNA聚合酶的RNA合成抑制剂而失去了许多有效性,因此它们的有效性很大。然而,这种修饰的组蛋白仍然是强烈的碱性蛋白质,它保留了与其得出的母体组蛋白相当的DNA的亲和力。这些发现介绍了组蛋白对核RNA的影响可能涉及的可能性不仅仅涉及对RNA合成的简单抑制,并且可能存在更微妙的机制,这些机制允许抑制和重新激活RNA沿染色体的RNA产生。在过去的几年中,对组蛋白作为染色体活性的调节剂的兴趣已大大提高,因为越来越多的实验证据已经积累了支持组蛋白的作用是抑制染色体
摘要 在各种储存条件下测试了三种合成 RNA 寡核苷酸的功能,以模拟运输过程中可能遇到的次优温度。通过标准 T7 内切酶 I (T7EI) 错配检测分析中的 CRISPR-Cas9 基因编辑来测量寡核苷酸的功能。虽然建议在推荐温度 (-20°C) 下储存干燥的 RNA,但所有测试条件均不会对寡核苷酸诱导基因编辑的能力产生不利影响。
共同称为表面参考组,RNA修饰在调节相关细胞过程的基因控制中起着重要作用。在过去的几十年中,不仅在丰富的核糖体(rRNA)和转移RNA(tRNA),而且在Messenger RNA(mRNA)中鉴定了越来越多的RNA模式。此外,许多动态调节化学标记的作家,橡皮擦和读者也已经表征了。con构建沉积是细胞稳态的先决条件,其改变会导致异常的转录程序,这些程序决定了人类疾病,包括乳腺癌,最常见的女性恶性肿瘤,是女性癌症相关死亡的主要原因。在这篇综述中,我们大小 - tRNA,rRNA和mRNA中存在的主要RNA修饰。我们已经对乳腺癌相关的化学标记进行了分类,并总结了它们对乳腺肿瘤发生的贡献。另外,我们描述了与乳腺癌有关的相关途径的较少丰富的tRNA修饰。最后,我们讨论了当前的局限性,并具有对乳腺癌和其他癌症治疗策略的同意分类组学的观点。
胶质母细胞瘤 (GBM) 是所有原发性脑肿瘤中最恶性的一种,每年导致全球约 200,000 人死亡。GBM 的标准疗法包括手术切除,然后进行以替莫唑胺为基础的化疗和/或放疗。通过这种治疗,GBM 患者在初次诊断后的平均生存期仅为 15 个月。因此,迫切需要新的、更好的 GBM 治疗方式。越来越多的证据表明,非编码 RNA (ncRNA) 作为基因表达的调节剂发挥着关键作用。长链非编码 RNA (lncRNA) 和微小 RNA (miRNA) 是健康和疾病中研究最多的 ncRNA。几乎所有类型的肿瘤,包括 GBM,都存在 ncRNA 失调。在 GBM 细胞系和 GBM 肿瘤样本中已鉴定出几种失调的 miRNA 和 lncRNA。其中一些已被提议作为诊断和预后标志物,以及作为 GBM 治疗的靶点。大多数基于 ncRNA 的疗法使用寡核苷酸 RNA 分子,而这些分子在循环中的寿命通常较短。纳米粒子 (NP) 旨在增加寡核苷酸 RNA 的半衰期。血脑屏障 (BBB) 的存在不仅是 RNA 寡核苷酸面临的另一个挑战,也是针对大脑相关疾病的疗法面临的另一个挑战。BBB 是保护大脑免受不良物质侵害的解剖屏障。尽管一些 NP 已在其表面衍生化以穿过 BBB,但目前还没有最佳的 NP 来将寡核苷酸 RNA 递送到大脑中的 GBM 细胞中。在这篇综述中,我们首先描述了 GBM 疗法的当前治疗方法。接下来,我们将讨论被建议作为 GBM 治疗靶点的最相关的 miRNA 和 lncRNA。然后,我们比较了目前用于 RNA 寡核苷酸输送的药物输送系统(纳米载体/NPs)、将药物输送通过 BBB 所面临的挑战以及克服这一障碍的策略。最后,我们归类了研究应重点关注的关键点,以便设计出用于将药物输送到大脑的最佳 NPs;从而将基于寡核苷酸 RNA 的疗法从实验室转移到临床环境。
在美国开发了几种不同的产品(表1),它们使用不同的技术来刺激疫苗接收者中所需的免疫反应。预计将获得最早使用授权的疫苗是基于一种新型的脂质封装的使者RNA(mRNA)技术。该证据咨询的目的是识别和总结有关mRNA疫苗安全的高级证据。对疫苗有效性的评估不在本报告的范围之内。用于治疗目的(例如癌症或艾滋病毒治疗)的mRNA疫苗也超出了本报告的范围。本报告可能包括有关针对其他疾病的mRNA疫苗的证据,包括流感,巨细胞病毒(CMV),狂犬病和Zika,认为这将是间接证据,以预测SARS-COV-2疫苗的安全性。目前,在美国没有使用此类疫苗用于使用(1)。
1. Dellinger, DJ 等人,《使用 2'-O-硫代氨基甲酸酯保护的核苷亚磷酰胺在固相中化学合成 RNA 的简化流程》,《美国化学会志》133,11540– 11556 (2011);DOI:10.1021/ja201561z