XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemRNP
AC 20-138B - 咨询通告 - 联邦航空管理局
第 1 章。一般信息。1-1。目的。本咨询通告 (AC) 为已安装的定位和导航设备的适航审批提供指导材料。定位和导航设备可用于多种功能，例如导航、自动相关监视和/或地形感知和警告系统。本 AC 涉及以下设备：a.全球定位系统 (GPS) 传感器或独立导航设备，包括结合机载增强系统 (ABAS)、卫星增强系统 (SBAS) 或地面增强系统 (GBAS) 的设备。b.区域导航 (RNAV) 集成来自多个导航传感器的数据，例如全球导航卫星系统 (GNSS)、惯性参考单元 (IRU) 和测距设备 (DME)。c. RNAV 旨在用于所需导航性能 (RNP) 操作，包括高级功能和所需 RNP 授权 (AR)，以前称为所需特殊飞机和机组人员授权 (SAAAR)。注意：RNP AR 以前称为 RNP SAAAR。名称已更改为 RNP AR 以实现国际协调，但可能尚未在所有文件中标准化。d. 气压垂直导航 (baro-VNAV) 设备。e. 本 AC 不涉及计划中或目前正在建设的新卫星星座。当有足够的文档支持多星座设备时，本 AC 将会更新。未来的 AC 90-101 和 AC 90-105 修订将删除适航指导。f. 本 AC 结合了 AC 90-101A（带 SAAAR 的 RNP 程序批准指南）和 AC 90-105（美国国家空域系统中的 RNP 运行和气压垂直导航批准指南）中包含的适航性考虑，这是将所有定位和导航设备以及 RNP 适航指南整合到一个 AC 中的必要第一步。本 AC 不会取代 RNP 90 系列 AC 中的运行指南。但是，本 AC 确实通过合并和更新第 1-3 段中列出的 AC 所包含的信息来取代它们。g. 本 AC 不是强制性的，也不是法规。本 AC 描述了遵守适用法规的可接受方法，但不是唯一方法。h. 本 AC 提供了用于新批准的指导信息。本 AC 无意修改、变更或取消现有设备设计或适航批准。
高纯度生产和DNA碱基编辑核糖核蛋白的精确编辑
核糖核蛋白（RNP）复合物介导的碱基编辑预计将非常有益，因为与质粒或病毒载体介导的基因编辑相比，其具有脱靶效应，尤其是在治疗应用中。但是，在细菌系统中产生丰富的产量和高纯度的重组胞嘧啶基础编辑器（CBE）或腺嘌呤碱基编辑器（ABES）的生产具有挑战性。在这里，我们从人类细胞表达系统中获得了高度纯化的CBE/ABE蛋白，并且表明CBE/ABE RNP表现出不同的编辑模式（即，与质粒编码的CBE/ABE相比，CBE/ABE的转化率较小（即，多个碱基与单个碱基的转化率较小），主要是导致细胞中RNP的寿命有限的原因。此外，我们发现与质粒编码的ABE相比，ABE RNP的DNA和RNA的脱靶效应大大降低。我们最终将NG PAM – tarbetable -abe RNP应用于视网膜变性12（RD12）模型小鼠中的体内基因校正。
FAA ICAO 航班计划快速指南 2022
RNAV 1 D1 全部 D2 GNSS D4 DME/DME/IRU 第 18 项中的附加 PBN 能力 NAV/ Z1 固定半径（RF） Z2 固定半径过渡（FRT） Z5 到达时间管制（TOAC） R1 直升机 RNP 0.3 P1 高级 RNP（A-RNP） M1 RNP 2 大陆 M2 RNP 2 远洋/远程 PER/ 性能类别 根据 Vref（如指定）或 1.3Vso 进行分类，每个分类为最大认证着陆重量（根据 CFR 97.3） A 小于 91 节 IAS B 至少 91 节且小于 121 节 IAS C 至少 121 节且小于 141 节 IAS D 至少 141 节且小于 166 节 IAS E 大于 166 节且小于 211 节 IAS H 直升机
基因
™ ( 合成的crRNA 和tracrRN) 和重组的Cas9 蛋白可以形成特核糖核蛋白复合物(RNP) 。 直接转染sgRNA-Cas9 RNP 可以避免质体DNA 嵌入宿主基因组， 也可进一步增强和扩展CRISPR 基因修饰技术的应用。 早期的报导表明， 与转染Cas9 质体相比， 利用sgRNA-Cas9 RNP 转染的基因组修饰具有更高的特异性(Juris et al. 2015, Kim et al., 2014, Lin et al. 2015, Liang et al. 2015) 。 此外， sgRNA- Cas9 RNP 技术在细胞治疗应用中也具有更好的愿景， 比如近期成功获得基因插入的人类原代T 细胞(Schumann et al. 2015) 。
一种多功能、高效的植物原生质体平台...
基因组编辑技术发展的最终目标是实现任何细胞或生物体中精准的基因组改变。本文我们描述了原生质体系统，该系统利用预组装的 Cas9 核糖核蛋白 (RNP) 复合物在拟南芥、本氏烟、白菜和亚麻荠中实现精准、高效的 DNA 序列改变。Cas9 RNP 介导的双 gRNA 基因破坏在拟南芥原生质体中可达到约 90% 的插入/缺失。为了便于测试任何 Cas9 RNP 设计，我们开发了两个 GFP 报告基因，从而可以灵敏地检测非同源末端连接 (NHEJ) 和同源定向修复 (HDR)，编辑效率分别高达 85% 和 50%。当与最佳单链寡脱氧核苷酸 (ssODN) 供体共转染时，RNP 通过 HDR 对 AtALS 基因的精确编辑达到 7%。值得注意的是，预组装引物编辑器 (PE) RNP 介导的精确诱变导致原生质体中 GFP 报告基因回收率为 50%，基因组中特定 AtPDS 突变的编辑频率高达 4.6%。原生质体中 CRISPR RNP 变体的快速、多功能和高效基因编辑为开发、评估和优化基因和基因组操作的新设计和工具提供了宝贵的平台，适用于多种植物物种。
用于基因组编辑的 Cas9 核糖核蛋白的制备
通过递送预组装的 Cas9 核糖核蛋白 (Cas9 RNP) 进行基因组编辑是一种越来越流行的方法，适用于难以通过传统质粒和病毒方法进行遗传操作的细胞类型。Cas9 RNP 编辑稳健、精确、能够多路复用且不含遗传物质。它在细胞中的短暂存在限制了残留的编辑活性。该方案描述了通过异源表达和从大肠杆菌纯化来制备重组化脓性链球菌 Cas9 (SpCas9) 蛋白，以及通过体外转录和 PAGE 纯化合成 CRISPR 向导 RNA。SpCas9 是第一个发现的 CRISPR Cas9（Jinek 等人，2012 年），也是基因组编辑应用中最典型的 Cas 酶之一。使用这种 Cas9 RNP 配方，我们已证明通过电穿孔在原代人类 T 细胞和自然杀伤 (NK) 细胞中以及通过聚乙二醇介导的转化在真菌和植物中实现了高效的基因组编辑。我们的 Cas9 RNP 制备协议是一致且简单的，可用于其他细胞类型和生物体的基因组编辑。
工程慢病毒衍生的纳米颗粒（LVNP）用于...
使用CRISPR / CAS实施治疗性体内基因编辑，依赖于基因编辑工具的有效输送。由CAS蛋白和单个指南RNA（SGRNA）组成的核糖核蛋白（RNP）复合物提供了短期的编辑活性和安全优势，而不是惯性病毒和非病毒基因和RNA Delivery方法。通过工程慢病毒衍生的纳米颗粒（LVNP）促进RNP的递送，我们证明了SPCAS9以及SPCAS9衍生的基础和Prime Editor（BE / PE）的有效施用，从而导致受体细胞中的基因编辑。独特的GA G / GA GPOL蛋白融合策略促进了LVNP中的RNP包装，并确定LVNP stoichiometry y支持优化的LVNP收益率和治疗有效负载的纳入。我们将在4天内进行瞬时目标DNA C LEAV年龄，并在4天内完成RNP周转。结果，与培养细胞中标准的d rnp nuc Leofection相比，LVNP降低了靶向dna c leav年龄和tale of tar clea族的活性。lvnps可容纳be / sgrna和pe / epegrna rnps，导致基础编辑，旁观者编辑和质量编辑降低而无需检测到的indel indel形成。值得注意的是，在鼠标眼中，我们介绍了LVNP指导的体内基因破坏的第一个概念概念。我们的发现建立LVNP作为促进的车辆或促进RNP的交付
使用CRISPR-CAS9核糖核蛋白复合物
白内障是全球失明的主要原因。先天性或小儿白内障也可能导致永久性视力障碍或失明，即使尝试进行最佳尝试。很大一部分小儿白内障具有遗传原因。因此，识别导致白内障形成的基因对于理解遗传性小儿白内障的病理过程以及新疗法的发展至关重要。尽管基因组技术取得了明显进展，但对新鉴定的候选基因和变体的生物学效应的验证仍然具有挑战性。在这里，我们提供了一条逐步的管道，使用CRISPR-CAS9核糖核蛋白复合物（RNP）评估F0斑马鱼中的白内障候选基因。包括CRISPR-CAS9 RNP设计和配方的详细片段，微注射，CRISPR-CAS9 RNP RNP剂量和交付途径的优化，编辑功效分析以及白内障形成评估。遵循此协议，可以在2周内使用基本实验室供应在2周内轻松评估任何白内障候选者。
卫星导航为航空带来益处
摘要 全球导航卫星系统 (GNSS) 使航空业受益匪浅，它使飞机能够使用最省油的路线从出发地直飞目的地，并在低空飞行复杂地形。卫星导航提供了设计新程序的灵活性，使飞机能够更紧密地飞行以提高到达和离开率，并进行连续爬升和下降操作，以最大限度地减少燃料消耗、噪音和碳排放。用航空界的语言来说，GNSS 支持基于性能的导航，包括区域导航 (RNAV) 和所需导航性能 (RNP)。RNAV 和 RNP 都支持不受限制的点对点飞行路径。RNP 与 RNAV 不同，因为它还提供监控和警报功能，在需要纠正时警告飞行员，使飞机能够飞行更紧密的飞行路径。GNSS 是唯一获准用于 RNP 操作的导航源。本文介绍了这些新功能，以及确保空中导航发展保持安全所需的 GNSS 增强功能。
使用 RNP 在永生化细胞系中进行阵列式 CRISPR 多向导文库核转染
功能测定通常使用阵列式 CRISPR 筛选进行，以关联每种基因扰动对细胞功能、形态或生理学方面的影响。优化所选测定至关重要，以确保其能够可靠地识别感兴趣的表型。这可以使用测定特异性阳性和阴性对照来完成（参见第 5 页的建议对照表）。此外，优化 CRISPR 编辑和测定之间的时间也很重要，以确保可以测量清晰的表型信号。测定特异性阳性对照可用于此目的。