动态电刺激促进了HIPSC-CM分化和功能抽象的人类诱导的多能干细胞分化的心肌细胞(HIPSC-CMS)具有很大的潜力,可以解决心血管疾病,但由于其功能不成熟而受阻。在心脏病发生过程中测得的复杂电势表明,外源性电刺激在改善心脏分化和功能方面的潜力。在此,我们创建,验证和实施低成本的电刺激装置,以刺激心脏分化期间的hipsc。值得注意的是,我们的开源设备可以生成复杂的电刺激状态,这些刺激状态可能会随着时间的流逝而变化和脉冲持续时间。我们的结果表明,分化过程中的动态刺激提高了心脏分化效率,钙处理和流速性,并促进了与静态刺激或没有刺激控制的显着转录组途径富集。动态刺激可以通过肌节发育增强电化学耦合并促进心源途径的表达。我们预计可以生成更复杂的动态电刺激方案,以进一步优化HIPSC-CM功能和成熟度。简介
摘要:神经内分泌前列腺癌(NEPC)是前列腺癌(PC)的高度攻击性亚型,通常通过前列腺腺癌的转差过程出现,并逃避常规疗法。广泛的分子研究揭示了驱动谱系可塑性的因素,从而探索了新的治疗靶标。目前在临床前和临床研究中评估了各种靶向剂,在抑制或逆转神经内分泌表型和抑制肿瘤生长和跨质量方面有令人鼓舞的结果。这种新知识有可能有助于发展新型治疗方法,从而增强这种致命疾病的临床管理和预后。在本综述中,我们讨论了参与神经内分泌表型的分子参与者,并探讨了目前正在研究NEPC的治疗策略。
DNA 完整性不断面临诱导 DNA 损伤的物质的威胁。所有生物体都配备了 DNA 损伤反应机制网络,可以修复 DNA 损伤并恢复正常的细胞活动。尽管在复制细胞中已经揭示了 DNA 修复机制,但人们对 DNA 损伤在有丝分裂后细胞中的修复方式仍然知之甚少。肌纤维是高度特化的有丝分裂后细胞,以合胞体形式组织,在放射治疗后容易发生与年龄相关的退化和萎缩。我们研究了肌纤维核的 DNA 修复能力,并将其与增殖性成肌细胞中的测量值进行了比较。我们重点研究了纠正电离辐射 (IR) 诱导损伤的 DNA 修复机制,即碱基切除修复、非同源末端连接和同源重组 (HR)。我们发现,在分化程度最高的成肌细胞肌管中,这些 DNA 修复机制表现出 DNA 修复蛋白向 IR 损伤 DNA 募集的动力学减弱。对于碱基切除修复和 HR,这种减弱可能与参与这些过程的关键蛋白的稳态水平降低有关。
15. 将 Matrigel 包被的培养板和 hiPSC 培养基预热至 20-25 C。16. 从预包被的培养板中吸出 Matrigel 并加入 hiPSC 培养基(6 孔板每孔 2 ml)。17. 将 9 ml hiPSC 培养基加入到 15 ml 离心管中。18. 将低温小瓶直接转移到 37 C 水浴中并观察解冻过程。当管中大部分内容物解冻并仅剩下一小块冰时,迅速取出并用 70% 乙醇彻底清洗。19. 小心地将细胞逐滴转移到准备好的带有培养基的 15 ml 离心管中。以 200 3 g 的速度离心 5 分钟。20. 小心吸出上清液。将沉淀物悬浮在 hiPSC 培养基(例如 1 ml)中,并接种到准备好的 Matrigel 包被的培养板上。前 24 小时加入 1 ml/ml 2 mM Thiazovivin(最终浓度 2 m M)。21. 如果 24 小时后细胞附着良好,则用 hiPSC 培养基更换培养基。如果附着力较低,再加入 1 ml/ml 2 mM Thiazovivin(最终浓度 2 m M),培养 24 小时。从第二天开始,每天更换培养基,每孔(6 孔)加入 2 ml hiPSC 培养基。继续“hiPSC 传代和维护”,步骤 1-8。
摘要:人类诱导的多能干细胞(HIPSC)衍生的心肌细胞提高了从广泛的人类疾病中产生多能干细胞的可能性。在心脏病学领域中,HIPSC已被用来解决原发性心律不齐的机械基础和对药物安全的研究。这些研究主要集中在心房和心室病理上。顺便说一句,已经开发出许多基于HIPSC的心脏分化方案来区分心房或心室样的心肌细胞。很少有方案成功地提出了获得HIPSC衍生的心脏起搏器细胞的方法,尽管从窦淋巴结中的人体组织的可用性非常有限。在进一步了解我们对窦淋巴结病理生理学基础机制和测试针对Sinoatrial节点功能障碍的创新临床策略方面,提供类似起搏器样细胞的体外来源至关重要(即生物学改进者和基于遗传学和药理学的治疗)。在这里,我们总结并详细介绍了目前可用的方案,用于获得患者来源的起搏器样细胞。
抽象背景:HPSC来源的内皮和造血细胞(ECS和HCS)是组织工程的有趣细胞来源。尽管它们紧密的空间和时间胚胎发育,但当前的HPSC分化方案仅专门用于这些谱系之一。在这项研究中,我们产生了一种可以在两种谱系的体外分化的血红素内皮人群。方法:通过CD144 + - 胚胎体(HPSC-EBS),将两条hESC和一条HIPSC线分化为血红素内皮人群,HPSC-EC和爆炸菌落(HPSC-BC)。HPSC-EC的特征是内皮菌落形成测定,LDL摄取测定,TNF-α的内皮激活,一氧化氮检测和基于基质的管子的形成。造血集落形成细胞分析是从HPSC-BCS进行的。有趣的是,我们确定了以CD144和CD45的表达为特征的HPSC-BC种群。HPSC-EC和HPSC-BC;在小鼠背侧皮肤折室上的缺血性组织损伤模型和造血重建的HPSC-ECS和HPSC-EB-CD144 +的免疫抑制小鼠中,体内实验已通过缺血性组织损伤模型实现。进行转录组分析以确认hESC衍生细胞群体的内皮和造血认同,通过将它们与未分化的hESC进行比较(例如,HPSC-EC与HPSC-EB-CD144 +),并针对人类胚胎肝(EL)内皮,血红蛋白和造血细胞亚群。结果:在无血清条件下进行84小时HPSC-EBS形成后,获得了血红素内皮种群,并根据CD144表达分离。在人间注射HPSC-EB-CD144 +的hPSC-EB-CD144 +有助于免疫缺陷小鼠中CD45 +人类细胞的一代,这表明HPSC-EB-CD144 +内血液发电性ECS存在。HPSC-EB-CD144 +的内皮分化在体外的功能性EC> 95%。HPSC-EC参与了小鼠缺血模型中体内新容器的形成。在体外,HPSC-EB-CD144 +的造血分化产生了> 90%CD43 + HPSC-BC的中间群体,能够产生髓样和红系菌落。最后,转录组分析分别证实了HPSC-EB-CD144 +,HPSC-ECS和HPSC-BC的血液层,内皮和造血认同,以及
造血是由骨髓中造血干细胞(HSC)产生所有血细胞的过程。促红细胞生成和颗粒状是造血的两个主要分支,分别是红细胞(RBC)和中性粒细胞的生产。虽然红细胞和髓样分化均来自相同的常见髓样祖细胞(CMP),但这两个过程之间的相互作用是复杂的,并且由不同的内在和外在因素紧密地策划,这些因子调节了祖细胞对一个细胞谱系或另一个细胞谱系或另一个细胞谱系的组合。1个末端红细胞生成和粒状植物发生在红细胞岛上,这些岛屿是骨髓中的专门微环体,该微晶体由中央宏观噬菌体组成,周围环绕着红细胞和中性粒细胞前体。2这些结构构成了独特的细胞微环境,并且通过提供必需的营养素,去除细胞碎片以及分泌细胞因子和生长方面来支持细胞增殖和分化至关重要。3越来越多的证据表明,在这些壁ches中发生平衡的微环境提示以及代谢物的运输和信号,还有其他
(未通过同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。该预印本版的版权持有人于2023年6月28日发布。 https://doi.org/10.1101/2023.06.27.546688 doi:biorxiv Preprint
布加勒斯特的农业科学和兽医医学,兽医学院,兽医学院,罗马尼亚布加勒斯特5区,第5区Splaiul Independentei街105淋巴瘤。 即使是肠道淋巴瘤的确切原因仍然不确定,持续性肠炎(例如炎症性肠病(IBD))与该肿瘤的发育之间可能存在联系。 因此,炎症和低度淋巴瘤之间的区分始终是一个挑战。 这项研究包括22只具有复发性呕吐和腹泻的消化综合征的猫,这些猫对治疗也无反应。 已经考虑了来自活动物的全厚性肠活检和死动物的组织样本,以进行常规的细胞病理学和组织病理学诊断。 用于TCRY链的T细胞CD3区的抗原受体重排(PARR)的聚合酶链反应用于区分淋巴瘤与非淋巴瘤病变。 细胞学和组织学发现由残留的异质种群表示,由中性粒细胞,嗜酸性粒细胞和小成熟的淋巴细胞组成,在其中添加了一个显性的小型至中等大小或大型淋巴细胞。 肠系膜淋巴结含有特征性细胞,这些细胞对于初期的恶性淋巴增殖一致。 PARR测试区分了11例T细胞淋巴瘤病例,显示出强烈的淋巴瘤与IBD区分的性能。布加勒斯特的农业科学和兽医医学,兽医学院,兽医学院,罗马尼亚布加勒斯特5区,第5区Splaiul Independentei街105淋巴瘤。即使是肠道淋巴瘤的确切原因仍然不确定,持续性肠炎(例如炎症性肠病(IBD))与该肿瘤的发育之间可能存在联系。因此,炎症和低度淋巴瘤之间的区分始终是一个挑战。这项研究包括22只具有复发性呕吐和腹泻的消化综合征的猫,这些猫对治疗也无反应。已经考虑了来自活动物的全厚性肠活检和死动物的组织样本,以进行常规的细胞病理学和组织病理学诊断。用于TCRY链的T细胞CD3区的抗原受体重排(PARR)的聚合酶链反应用于区分淋巴瘤与非淋巴瘤病变。细胞学和组织学发现由残留的异质种群表示,由中性粒细胞,嗜酸性粒细胞和小成熟的淋巴细胞组成,在其中添加了一个显性的小型至中等大小或大型淋巴细胞。肠系膜淋巴结含有特征性细胞,这些细胞对于初期的恶性淋巴增殖一致。PARR测试区分了11例T细胞淋巴瘤病例,显示出强烈的淋巴瘤与IBD区分的性能。关键词:肠肠疾病,淋巴瘤,帕尔。ABBREVIATIONS EATL II- Feline enteropathy-associated T-cell lymphoma, type II FFPE- formalin-fixed and paraffin-embedded FNA - fine needle aspiration HGITL- high grade intestinal T-cell lymphoma IHC- immunohistochemistry IgG1 - immunoglobulin G1 IgG2 - Immunoglobuline G2 IgH - immunoglobulin heavy chain IgM - immunoglobulin M LGITL - low-grade intestinal T-cell lymphoma LPE- lymphoplasmacytic enteritis PARR - polymerase chain reaction (PCR) to assess antigen receptor gene rearrangements PBS - phosphate buffered saline QC - quality check TCL - T-cell lymphoma TCR - T cell receptor TRB - T cell receptor Betta TRD- T细胞受体Delta PCR-聚合酶链反应V(d)J基因遗传多样性
在过去的几年中,对发育过程的转录调节进行了广泛的研究,但仍然存在有关机械和代谢线索的知识差距,并且基本的形态事件伴随着人类多能干细胞(HPSC)差异。在寻找此类信号时,我首先从胚胎天14.5天(E14.5)和16.5(E16.5)的发育中的鼠pancreata的单细胞RNA-sequect(SCRNA-Seq)数据中识别出Amotl2基因。有趣的是,尽管有保守的规范标记,但这些时间点的内分泌祖细胞(EP)种群在其转录组中差异很大,E16.5 EPS更容易形成胰腺β细胞,而E14.5 EPS优先形成α-Cells。amotl2在E16.5 EPS的亚型中特异性表达,该EPS反映了EPS与上皮绳索的分层,这是一个可能影响内分泌细胞命运的事件。
