结果和讨论:在总共617个共培养Calli中,21(3.4%)再生芽表现出三种不同的表型:白化,嵌合和浅绿色;与野生型非转化的再生芽相比。在白化芽中,总叶绿素含量大大降低,并且在嵌合芽中显着降低。在六个CAS9基因确认的再生芽中,两种芽表现出由于插入/缺失(Indels)和ACPDS靶点位置和周围的基于替代的突变而引起的白化表型。深度扩增子测序显示两个SGRNA之间的indel频率显着,范围从1.2%到63.4%,以及53.4%的替代频率。ACPDS基因的突变产生了可检测到的白化病表型,因此确定了ACPDS基因的成功编辑。这是第一次在洋葱中成功建立了CRISPR/CAS9介导的基因组编辑方案,而ACPD基因作为一个例子。这项研究将为研究人员提供进一步的洋葱基础研究和应用研究的必要动力。
全球大流行很可能是通过人畜共患病传播到人类的,其中呼吸道病毒感染与粘膜系统相关的气道。在已知的大流行中,五个是由包括当前正在进行的冠状病毒2019(Covid-19)在内的呼吸道病毒引发的。在疫苗开发和治疗剂中的惊人进步有助于改善传染剂的死亡率和发病率。然而,生物体复制和病毒通过粘膜组织传播,不能由肠胃外疫苗直接控制。需要一种新型的缓解策略,以引起强大的粘膜保护并广泛中和活动以阻碍病毒进入机制并抑制传播。本综述着重于口腔粘膜,这是病毒传播的关键部位,也是引起无菌免疫力的有希望的靶标。除了审查人畜共患病毒病毒和口腔粘膜组织发起的历史大流传学外,我们还讨论了口服免疫反应的独特特征。我们解决了与开发新型治疗剂有关以在粘膜水平引起保护性免疫的障碍和新的前景,以最终控制传播。
结果与讨论:通过野生型(WT)和TGP PSLOX2突变型线的DNA测序确定了稳定转基因PEA系(TGP)的成功CRISPR/CAS9介导的LOX基因编辑(TGP)。还评估了这些线路的LOX活性,PUFA水平和VOC。Compared to WT peas, the TGP lines showed a signi fi cant reduction (p < 0.05) in LOX activity and in the concentration of key VOCs, including hexanal, 2-hexenal, heptanal, (E)-2-heptenal, (E,E)-2,4- heptadienal, 1-octen-3-ol, octanal, (E)-2-octenal (E,E)-2,4-非二烯和Furan-2-苯基。在TGP浮动中,两个必需的PUFAS,亚油酸和二酚酸的含量是LOX的已知底物,表明CRISPRPR介导的基因编辑的效率在最小化其氧化和PUFAS及其产品的进一步调节方面具有效率。vocs的集合
总结泛素蛋白水解系统在一系列基本的细胞过程中起重要作用。是细胞周期的调节,免疫反应和炎症反应的调节,信号转导途径的控制,发育和分化。这些复杂过程通过单个或子集的蛋白质的特异性降解来控制。deg含量涉及两个连续的步骤,共轭泛素的多种部分以及26S蛋白酶体对标记蛋白的降解。一个重要的问题涉及基于系统特异性的机制的身份。底物识别受一个大型家族泛素连接酶的控制,该连接酶可以认识底物,结合它们并催化/促进它们与泛素的相互作用。生物评估22:442±451,2000。β2000 John Wiley&Sons,Inc。
疫苗是最有价值的人类健康技术之一。从18世纪的爱德华·詹纳(Edward Jenner)对Cowpox进行的Variolation实验,再到乔纳斯·萨克(Jonas Salk)开发脊髓灰质炎的整个病原体疫苗的努力,疫苗研究产生了一些历史上最重要的医疗突破。疫苗刺激针对特定病原体的免疫反应,它必须包含与该病原体有关的抗原。第一代疫苗通常由活或灭活的整个病原体组成。尽管其历史上的成功并广泛采用,但整个病原体疫苗在包含无关紧要的和潜在有害的病原体成分时仍引起了安全问题。他们也可以复制或恢复为致病形式(1)。亚基疫苗仅包含刺激免疫反应所需的病原体的最小成分,例如重组蛋白。这些技术改善了疫苗的安全性(2)。然而,在刺激免疫反应时,亚基疫苗本质上比整个病原体疫苗的效力较低。由于这种限制,它们通常包含额外的免疫刺激分子(称为佐剂)来发展保护性免疫(2)。其他最近的疫苗技术包括病毒载体和基于核酸的疫苗,该疫苗编码致病性抗原
荞麦 (Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn.) 是一种特殊的作物,以其显著的健康益处、高含量的有益多酚和无麸质特性而闻名,使其成为备受追捧的功能性食品。它的自花授粉能力和对恶劣环境的适应性进一步增强了它作为可持续农业选择的潜力。为了利用其独有的性状,荞麦的遗传转化至关重要。在本研究中,我们优化了农杆菌介导的荞麦愈伤组织转化方案,使再生植物的转化率达到约 20%。通过成功的 GUS 染色、GFP 表达以及通过 FtPDS 基因失活产生白化植物,证实了该方案的有效性。这些结果验证了基因操作的可行性,并强调了荞麦性状增强的潜力。
目前,CRISPR/Cas9 的使用是植物(包括生物量作物杨树)精确基因组工程的首选方法。在杨树中传递 CRISPR/Cas9 及其成分的最常用方法是通过农杆菌介导的转化,除了所需的基因编辑事件外,还会导致稳定的 T-DNA 整合。在这里,我们探索了通过 DNA 包被的微粒轰击将基因编辑试剂传递到模型树 Populus tremula x P. alba 中,以评估其开发无转基因、基因编辑树的潜力,以及其在特定靶位整合供体 DNA 的潜力。使用优化的转化方法,有利于再生暂时表达所传递供体 DNA 上基因的植物,我们再生了不含 Cas9 和抗生素抗性编码转基因的基因编辑植物。此外,我们报告了供体 DNA 片段在 Cas9 诱导的双链断裂处频繁整合,为靶向基因插入提供了机会。
文章标题:评论:真菌细胞中的CRISPR/CAS12介导的基因组编辑:植物 - 真菌病理学中的进步,机制和未来方向作者:Chiti Agarwal [1],Vishnutej Ellur [1]附属机构[1]附属机构:华盛顿州立大学[1] ORCID IDS:0000-000-000-0003-41125-25-25-8880 [1] chiti.agarwal@gmail.com许可证信息:这项工作已在Creative Commons Attribution许可证下发布开放访问http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/,只要适当引用任何原始工作,该工作就允许在任何媒介中进行无限制的使用,分发,分发和复制。可以在https://www.scienceopen.com/上找到条件,使用条款和发布政策。预印度语句:本文是预印本,未经同行评审,正在考虑,并提交给ScienceOpen的预印本进行开放的同行评审。doi:10.14293/pr2199.000129.v1预印本在线发布:2023年5月14日关键字:CRISPR,CRISPR/CAS12,真菌病原体,植物病原体
组织Cu,Fe和Zn作为实验四甲甲基脑病的主要决定因素。生命科学, /3:897(1973)。24。Packer,L。和Jacobs,E。E。:磷酸化与线粒体呼吸链的末端段的耦合。Biochim。Biphys。 Acta,57:37 I(1962)。 25。 Patel,A。J.,Michaelson,I。 A.,Cremer,J.E。和Balazs,r。:哺乳的大脑的代谢,sucking剂的大鼠被无机铅陶醉。 J. Neurochem。,22:581(1974)。 26。 Patel,A。J.,Michaelson,I。 A.,Cremer,J。E.和Balazs,r。:年轻大鼠摄入铅的大脑中的代谢室内的变化。 J. Neurochem。,22:591(1974)。 27。 Pentschew,A。和Garro,f。:哺乳老鼠的铅瘤性脑病及其对卟啉症神经疾病的影响。 Acta Neuropathol。,6:266(1966)。 28。 Potter,V。R.,Schneider,W。C.和Liebl,G。J。:新生大鼠组织生长和分化过程中的酶变化。 Cancer Res。,5:21(1945)。 29。 Rhyne,B。C.和Goyer,R。A。:实验性铅中毒中肾脏线粒体的细胞色素含量。 EXP。 mal。 Pathol。,14:386(1971)。 30。 Sanadi,D。R.和Jacobs,E。E。:细胞色素氧化酶区域(现场ILL)的氧化磷酸化测定。 JO:38(1967)。 31。 Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。 xxi!l。Biphys。Acta,57:37 I(1962)。25。Patel,A。J.,Michaelson,I。A.,Cremer,J.E。和Balazs,r。:哺乳的大脑的代谢,sucking剂的大鼠被无机铅陶醉。 J. Neurochem。,22:581(1974)。 26。 Patel,A。J.,Michaelson,I。 A.,Cremer,J。E.和Balazs,r。:年轻大鼠摄入铅的大脑中的代谢室内的变化。 J. Neurochem。,22:591(1974)。 27。 Pentschew,A。和Garro,f。:哺乳老鼠的铅瘤性脑病及其对卟啉症神经疾病的影响。 Acta Neuropathol。,6:266(1966)。 28。 Potter,V。R.,Schneider,W。C.和Liebl,G。J。:新生大鼠组织生长和分化过程中的酶变化。 Cancer Res。,5:21(1945)。 29。 Rhyne,B。C.和Goyer,R。A。:实验性铅中毒中肾脏线粒体的细胞色素含量。 EXP。 mal。 Pathol。,14:386(1971)。 30。 Sanadi,D。R.和Jacobs,E。E。:细胞色素氧化酶区域(现场ILL)的氧化磷酸化测定。 JO:38(1967)。 31。 Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。 xxi!l。A.,Cremer,J.E。和Balazs,r。:哺乳的大脑的代谢,sucking剂的大鼠被无机铅陶醉。J.Neurochem。,22:581(1974)。26。Patel,A。J.,Michaelson,I。A.,Cremer,J。E.和Balazs,r。:年轻大鼠摄入铅的大脑中的代谢室内的变化。J.Neurochem。,22:591(1974)。27。Pentschew,A。和Garro,f。:哺乳老鼠的铅瘤性脑病及其对卟啉症神经疾病的影响。Acta Neuropathol。,6:266(1966)。28。Potter,V。R.,Schneider,W。C.和Liebl,G。J。:新生大鼠组织生长和分化过程中的酶变化。Cancer Res。,5:21(1945)。 29。 Rhyne,B。C.和Goyer,R。A。:实验性铅中毒中肾脏线粒体的细胞色素含量。 EXP。 mal。 Pathol。,14:386(1971)。 30。 Sanadi,D。R.和Jacobs,E。E。:细胞色素氧化酶区域(现场ILL)的氧化磷酸化测定。 JO:38(1967)。 31。 Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。 xxi!l。Cancer Res。,5:21(1945)。29。Rhyne,B。C.和Goyer,R。A。:实验性铅中毒中肾脏线粒体的细胞色素含量。EXP。mal。Pathol。,14:386(1971)。30。Sanadi,D。R.和Jacobs,E。E。:细胞色素氧化酶区域(现场ILL)的氧化磷酸化测定。JO:38(1967)。 31。 Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。 xxi!l。JO:38(1967)。31。Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。 xxi!l。Scott,K。M.,Hwang,K。M.,Jurkowitz。xxi!l。M.和Brierly,G。P。:通过心脏线粒体运输离子。铅对线粒体反应的影响。
摘要 丙型肝炎病毒 (HCV) 是非甲非乙型肝炎的最重要病原体,也是慢性肝病和肝细胞癌的主要原因。研制有效的疫苗是预防感染最实用的方法,但 HCV 感染是否会在宿主体内引发保护性免疫尚不清楚。尝试用慢性感染患者的血浆在体外中和 HCV,并通过接种八只血清阴性黑猩猩来评估残留传染性。HCV 的来源是从一名患者在移植后非甲非乙型肝炎急性期获得的血浆,该血浆之前已在黑猩猩中测定过传染性。在原发性感染开始 2 年后从同一患者获得的血浆中实现了中和,但在 11 年后获得的血浆中未能实现中和,尽管两种血浆都含有针对非结构和结构(包括包膜)HCV 蛋白的抗体。对同一患者连续病毒分离株的分析表明,早在感染 2 年后,遗传分化就已显著。然而,感染 2 年后从患者身上分离出的 HCV 与从接种了急性期病毒的黑猩猩身上分离出的 HCV 具有惊人的序列相似性,这表明新毒株的祖先在 2 年前就已经存在。这一证据,加上从接受相同接种物的黑猩猩身上分离出的 HCV 的不同序列,证实了 HCV 在体内以准种的形式存在。这些结果提供了体内实验证据,表明 HCV 感染会在人类中引发中和抗体反应,但表明这种抗体是分离株特异性的。这一结果引起了人们对开发广泛反应的 HCV 疫苗的担忧。
