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以及由Adeno介导的原发性和培养的肿瘤细胞...
我们已经使用阳离子脂质体来促进原代和培养细胞类型的腺相关病毒（AAV）质粒转染。AAV质粒DNA显示出比标准质粒的复合物高的表达水平。此外，观察到典型的脂质体介导的瞬时表达与标准质粒的转染所证明的瞬态表达不同，该基因的长期表达（> 30天）。染色体DNA的南部分析进一步证实了长期表达是由于AAV质粒转染组中的转基因而不是在标准质粒转染组中引起的。AAV质粒 - 脂质体复合物诱导的转基因表达水平与重组AAV转导相当。原发性乳房，卵巢和肺部肿瘤细胞可与AAV质粒DNA-脂质体复合物转染。转染的原发性和培养的肿瘤细胞即使在致命照射后也能够表达转基因产物。在正常人类外周血的新鲜分离的CD3+，CD4+和CD8+T细胞中也观察到了高级基因表达。转染效率范围为10％至501％，如白细胞介素2转染的细胞中细胞内白细胞介素-2水平评估。在原发性肿瘤和淋巴样细胞中表达转基因的能力可以应用于肿瘤疫苗研究和方案，最终可以对癌症和艾滋病中细胞免疫反应的高度特异性调节。
泛素介导的蛋白水解：通过破坏的生物调节
总结泛素蛋白水解系统在一系列基本的细胞过程中起重要作用。是细胞周期的调节，免疫反应和炎症反应的调节，信号转导途径的控制，发育和分化。这些复杂过程通过单个或子集的蛋白质的特异性降解来控制。deg含量涉及两个连续的步骤，共轭泛素的多种部分以及26S蛋白酶体对标记蛋白的降解。一个重要的问题涉及基于系统特异性的机制的身份。底物识别受一个大型家族泛素连接酶的控制，该连接酶可以认识底物，结合它们并催化/促进它们与泛素的相互作用。生物评估22：442±451，2000。β2000 John Wiley＆Sons，Inc。
微粒介导的 CRISPR DNA 递送用于杨树基因组编辑
目前，CRISPR/Cas9 的使用是植物（包括生物量作物杨树）精确基因组工程的首选方法。在杨树中传递 CRISPR/Cas9 及其成分的最常用方法是通过农杆菌介导的转化，除了所需的基因编辑事件外，还会导致稳定的 T-DNA 整合。在这里，我们探索了通过 DNA 包被的微粒轰击将基因编辑试剂传递到模型树 Populus tremula x P. alba 中，以评估其开发无转基因、基因编辑树的潜力，以及其在特定靶位整合供体 DNA 的潜力。使用优化的转化方法，有利于再生暂时表达所传递供体 DNA 上基因的植物，我们再生了不含 Cas9 和抗生素抗性编码转基因的基因编辑植物。此外，我们报告了供体 DNA 片段在 Cas9 诱导的双链断裂处频繁整合，为靶向基因插入提供了机会。
细胞囊泡介导的胰岛和糖尿病的胰岛间的互块
糖尿病（DM）是一种全身代谢疾病，具有高死亡率和发病率。细胞外囊泡（EV）已成为一种新型的信号分子，生物标志物和治疗剂。EVs-mediated intercellular and interorgan crosstalk of pancreatic islets plays a crucial role in the regulation of insulin secretion of b -cells and insulin action in peripheral insulin target tissues, maintaining glucose homeostasis under physiological conditions, and it ' s also involved in pathological changes including autoimmune response, insulin resistance and b -cell failure associated with DM.此外，EV可以作为生物标志物和治疗剂，分别反映了胰岛的状态并提高功能和生存能力。在这篇综述中，我们提供了电动汽车的概述，讨论了在生理和糖尿病条件下的EVS介导的胰岛的细胞间和跨组织串扰，并总结了电动汽车在DM诊断和处理中的新兴应用。对胰岛介导的EVS介导的胰岛间和实体间交流的更好理解将扩大和丰富我们对生理稳态维持以及DM的开发，诊断和治疗的了解。
微生物介导的重金属毒性的修复
重金属污染由于其持续性，更高的毒性和顽固性而成为全球严重关注的问题。这些有毒的金属威胁着环境的稳定性和所有生物的健康。重金属还通过食用受污染的食物并对人类健康造成有毒作用，进入人类食物链。因此，必须对HMS污染的土壤进行修复，并且需要在更高的优先级上解决。使用微生物被认为是打击HMS不利影响的有前途的方法。微生物有助于恢复恶化环境的自然状况，并具有长期的环境影响。微生物修复可防止HMS的浸出和动员，并且还使HMS的提取变得简单。因此，在这种情况下，最近的技术进步允许将生物修复用作补救污染土壤的必要方法。微生物使用不同的机制，包括生物呼吸，生物蓄积，生物含量，生物转化，生物胆碱化和生物矿化，以减轻HMS的影响。因此，在此评论中，在此综述中保持有毒的HMS探讨细菌，真菌和藻类在污染土壤的生物修复中的作用。本综述还讨论了可用于提高微生物效率以补救HMS污染土壤的各种方法。它还强调了在未来的研究计划中必须解决的不同研究差距，以改善生物修复效率。
crispr/cas9介导的黄豌豆中的脂氧合酶基因编辑导致脂肪酸和脂肪酸的主要变化
结果与讨论：通过野生型（WT）和TGP PSLOX2突变型线的DNA测序确定了稳定转基因PEA系（TGP）的成功CRISPR/CAS9介导的LOX基因编辑（TGP）。还评估了这些线路的LOX活性，PUFA水平和VOC。Compared to WT peas, the TGP lines showed a signi fi cant reduction (p < 0.05) in LOX activity and in the concentration of key VOCs, including hexanal, 2-hexenal, heptanal, (E)-2-heptenal, (E,E)-2,4- heptadienal, 1-octen-3-ol, octanal, (E)-2-octenal （E，E）-2,4-非二烯和Furan-2-苯基。在TGP浮动中，两个必需的PUFAS，亚油酸和二酚酸的含量是LOX的已知底物，表明CRISPRPR介导的基因编辑的效率在最小化其氧化和PUFAS及其产品的进一步调节方面具有效率。vocs的集合
crispr/cas9介导的精英木米（Oryza sativa L.）中半昏昏欲睡性特征的增强：靶向SD1和WX基因的产量和
在水稻培养中，半枯萎和粘性质地的特征分别是优化产量潜力和晶粒质量的关键。Xiangdaowan（XDW）大米以其出色的芳香特性而闻名，由于其高的身材和高淀粉糖含量而面临挑战，导致住宿耐药性不佳和次优烹饪属性。为了解决这些问题，我们采用了CRISPR/CAS9技术来精确地编辑XDW大米中的SD1和WX基因，从而发展具有所需半昏迷和麸质特征的稳定的遗传纯合线。SD1-WX突变型线表现出降低的gibberellin含量，植物高度和淀粉糖含量，同时保持了几乎不会改变发芽率和其他关键的农艺性状。重要的是，我们的研究表明，外源性GA 3的应用通过补偿内源性Gibberellin的缺乏有效地促进了生长。基于此，开发了半昏昏欲睡的精英大米（Oryza sativa L.）线，对大多数农艺性状没有太大影响。此外，比较转录组分析揭示了差异表达的基因（DEG）主要与膜的锚定成分，过氧化氢分解代谢酶分解代谢酶活性，过氧化物酶活性，萜烯合酶活性和寄生虫相关。此外，将二萜类化合物的生物合成催化为gibberellins的生物合成富集并显着下调。这项全面的研究提供了一种有效的方法，可以同时提高水稻植物的身高和质量，为耐药和高质量的水稻品种的发展铺平了道路。
长期在小鼠成纤维细胞植入物中逆转录病毒介导的基因转移的体内表达
当前的基因治疗模型涉及逆转录病毒介导的遗传材料转移到源自各种体细胞组织的细胞中，包括造血系统的细胞，成纤维细胞，肝细胞，内皮细胞和成肌细胞（1、2）。我们先前已经描述了一种通过小鼠皮肤成纤维细胞逆转录病毒感染的基因产物传递方法（3）。我们先前在成纤维细胞研究中使用的转导基因是人和狗因子IX cDNA（3，4）。尽管在组织培养中可以实现高水平的持续性，而当在啮齿动物的同种异体移植中移植时，这些成纤维细胞仅在短时间内就产生了大量因子IX（3，5）。从理论上讲，体内表达的短期可能归因于不同的因素：（i）宿主对外源性因子IX的免疫反应； （ii）移植后外国细胞的破坏； （IIM）一旦将转导细胞移植到动物的转移基因的转录基因转录的特异性下降。已经表明（3，5），植入改良的成纤维细胞后，对人类因子IX的抗体存在，这至少可以解释，部分原因是第IX因子的短期。在这项工作中，使用不同的启动子来控制8-半乳糖苷酶的表达，我们证明，在组织培养中，长期表达可以轻松获得，但指导感兴趣基因转录的启动子的类型可能是决定体内长期表达的关键因素之一。
高效农杆菌介导转化和...
荞麦 (Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn.) 是一种特殊的作物，以其显著的健康益处、高含量的有益多酚和无麸质特性而闻名，使其成为备受追捧的功能性食品。它的自花授粉能力和对恶劣环境的适应性进一步增强了它作为可持续农业选择的潜力。为了利用其独有的性状，荞麦的遗传转化至关重要。在本研究中，我们优化了农杆菌介导的荞麦愈伤组织转化方案，使再生植物的转化率达到约 20%。通过成功的 GUS 染色、GFP 表达以及通过 FtPDS 基因失活产生白化植物，证实了该方案的有效性。这些结果验证了基因操作的可行性，并强调了荞麦性状增强的潜力。
抗体介导的体外中和作用可预防黑猩猩感染丙型肝炎病毒
摘要 丙型肝炎病毒 (HCV) 是非甲非乙型肝炎的最重要病原体，也是慢性肝病和肝细胞癌的主要原因。研制有效的疫苗是预防感染最实用的方法，但 HCV 感染是否会在宿主体内引发保护性免疫尚不清楚。尝试用慢性感染患者的血浆在体外中和 HCV，并通过接种八只血清阴性黑猩猩来评估残留传染性。HCV 的来源是从一名患者在移植后非甲非乙型肝炎急性期获得的血浆，该血浆之前已在黑猩猩中测定过传染性。在原发性感染开始 2 年后从同一患者获得的血浆中实现了中和，但在 11 年后获得的血浆中未能实现中和，尽管两种血浆都含有针对非结构和结构（包括包膜）HCV 蛋白的抗体。对同一患者连续病毒分离株的分析表明，早在感染 2 年后，遗传分化就已显著。然而，感染 2 年后从患者身上分离出的 HCV 与从接种了急性期病毒的黑猩猩身上分离出的 HCV 具有惊人的序列相似性，这表明新毒株的祖先在 2 年前就已经存在。这一证据，加上从接受相同接种物的黑猩猩身上分离出的 HCV 的不同序列，证实了 HCV 在体内以准种的形式存在。这些结果提供了体内实验证据，表明 HCV 感染会在人类中引发中和抗体反应，但表明这种抗体是分离株特异性的。这一结果引起了人们对开发广泛反应的 HCV 疫苗的担忧。